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2025-01-10 10:53:35色譜分析柱
色譜分析柱是色譜儀中的關(guān)鍵部件,用于分離和純化樣品中的化合物。它采用特定的填料(如硅膠、氧化鋁、聚合物等),根據(jù)化合物在填料上的吸附、溶解或離子交換等性質(zhì)的差異進(jìn)行分離。色譜分析柱具備良好的分離效率和選擇性,能夠準(zhǔn)確分離和檢測復(fù)雜混合物中的目標(biāo)化合物。同時(shí),它還具有高穩(wěn)定性和重現(xiàn)性,廣泛應(yīng)用于藥物分析、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域,為科研和質(zhì)量控制提供可靠的數(shù)據(jù)支持。

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2018-11-29 02:40:50氣相色譜分析柱溫的選擇主要考慮哪些因素
 
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2022-12-07 12:03:22加速色譜分析方法開發(fā)與驗(yàn)證
近年來USP和ICH都針對(duì)分析方法開發(fā)與驗(yàn)證進(jìn)行了修訂。USP新收錄通則分析方法生命周期已于2022年5月1日生效,分別從分析方法開發(fā)、分析方法性能確認(rèn)及分析方法使用三個(gè)階段分別闡述如何在分析方法整個(gè)生命周期內(nèi)對(duì)方法進(jìn)行管理。而ICH Q14分析方法開發(fā)和Q2(R2) 分析方法驗(yàn)證的修訂也進(jìn)入到了第三階段,按照計(jì)劃其將在2023年5月前完成階段的定稿。這些信息都表明了分析方法開發(fā)和驗(yàn)證的管理將會(huì)變得更嚴(yán)謹(jǐn)、更科學(xué)。因?yàn)樯V儀器包括色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在藥物開發(fā)過程中的廣泛使用,色譜分析方法的開發(fā)與驗(yàn)證也成為了方法開發(fā)與驗(yàn)證,乃至分析方法生命周期管理中的重要內(nèi)容。針對(duì)色譜方法開發(fā)與驗(yàn)證的整體流程,可以將其大致分為:方法篩選、方法優(yōu)化、耐用性測試和完整的方法驗(yàn)證這四個(gè)階段。而這四個(gè)階段都離不開儀器準(zhǔn)備、隊(duì)列運(yùn)行、數(shù)據(jù)查看與處理以及報(bào)告這幾個(gè)環(huán)節(jié)。賽默飛的旗艦版色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)Chromeleon 軟件功能豐富而注重實(shí)踐,能夠幫助實(shí)驗(yàn)室的色譜分析實(shí)現(xiàn)精簡、高效的工作流,以實(shí)現(xiàn)更快的樣品到結(jié)果的轉(zhuǎn)換。自定義變量的靈活應(yīng)用在Chromeleon CDS 中創(chuàng)建隊(duì)列時(shí)可以通過手工填寫的傳統(tǒng)方式,也可基于事先建好的隊(duì)列模板。值得一提的是Chromeleon 強(qiáng)大的樣品列表功能。除了運(yùn)行樣品的基本信息(樣品名稱、儀器方法、運(yùn)行的其他必須參數(shù))之外,還可以通過自定義變量的形式,添加額外的注釋信息,例如色譜柱類型、緩沖液名稱等用于清晰識(shí)別每一針進(jìn)樣的信息。使用者還可以進(jìn)一步創(chuàng)建一些自定義變量并將其與儀器方法中的參數(shù)進(jìn)行鏈接,更加簡單地實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(DoE)的環(huán)節(jié)。一旦基本方法固定,便可通過改變色譜柱選擇閥或溶劑選擇閥等參數(shù)實(shí)現(xiàn)不同要素的組合以尋找具備可行性的色譜條件,也體現(xiàn)了ICH和USP所倡導(dǎo)的“多變量分析方法開發(fā)”這一方針。相比傳統(tǒng)的樣品隊(duì)列創(chuàng)建方式,減少了所需創(chuàng)建的儀器方法的數(shù)量,并以清晰直觀的模式展示了所使用的變量以及變量值,結(jié)合縮略圖功能提供了更直觀的信息。在數(shù)據(jù)處理階段,可以再次利用Chromeleon 樣品列表中的自定義結(jié)果變量功能,可以方便地實(shí)現(xiàn)運(yùn)行樣品的同時(shí)進(jìn)行結(jié)果計(jì)算,例如系統(tǒng)適用性參數(shù)的計(jì)算,峰面積、含量以及測試是否通過等信息的顯示,幫助使用者快速查看所需信息以便靈活調(diào)整實(shí)驗(yàn)的方向。完全可定制的Chromeleon報(bào)告模板也支持自定義變量、公式和計(jì)算,使用者可以使用內(nèi)置的模板,也可以根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整,得到包括多個(gè)工作表、結(jié)果表和圖形的報(bào)告,無需導(dǎo)出到其他軟件,也無需手動(dòng)計(jì)算,從而消除轉(zhuǎn)錄錯(cuò)誤。所有報(bào)告和計(jì)算都可以在合規(guī)的環(huán)境中完成,并在源數(shù)據(jù)發(fā)生變化時(shí)自動(dòng)更新??梢赃x擇在運(yùn)行結(jié)束時(shí)自動(dòng)打印、導(dǎo)出也可以發(fā)送電子郵件通知給相關(guān)人員。更便捷的eWorkflowChromeleon 也提供一個(gè)創(chuàng)建序列、運(yùn)行并得到結(jié)果的簡單而直接的方法,這就是eWorkflow。它最 大限度地減少了操作步驟并涵蓋了色譜或 MS 工作流程的所有方面,定義了可以在哪些儀器上運(yùn)行分析以及應(yīng)該使用哪些方法和文件,包括儀器方法、處理方法、報(bào)告和外部文件,例如 SOP。 與前面提到的自定義變量等有效結(jié)合,只需單擊幾下即可創(chuàng)建復(fù)雜的序列并立即運(yùn)行,并在運(yùn)行后得到所需的報(bào)告。這些都可以減少錯(cuò)誤、更快地產(chǎn)生可靠的結(jié)果,并且顯著減少了培訓(xùn)的需求,有效加速了方法開發(fā)的流程。分析方法驗(yàn)證工具包ICH指南定義了方法驗(yàn)證應(yīng)該執(zhí)行包括專屬性、準(zhǔn)確度、精密度、檢測和定量限度、線性、范圍和耐用性的測試。除了樣品運(yùn)行的環(huán)節(jié)之外,計(jì)算、整理和報(bào)告驗(yàn)證結(jié)果也可能需要很長的時(shí)間,而且大多數(shù)測試都涉及將結(jié)果與指標(biāo)進(jìn)行比較,相對(duì)比較繁瑣。 在eWorkflow的基礎(chǔ)上,Chromeleon 又提供了一個(gè)方法驗(yàn)證的高效工具,ICH方法驗(yàn)證擴(kuò)展包。擴(kuò)展包內(nèi)有一系列的模板,每個(gè)模板都包含處理方法、報(bào)告模板和自定義變量以覆蓋所需的變量和參數(shù)。所有這些都在 eWorkflow 程序中捆綁在一起,以確保正確執(zhí)行ICH所要求的相關(guān)測試,減少人為錯(cuò)誤并加速流程:eWorkflow 可以引導(dǎo)創(chuàng)建隊(duì)列,自動(dòng)執(zhí)行所有計(jì)算,并通過報(bào)告直接顯示通過或失敗的結(jié)論。以上介紹的幾個(gè)工具僅為Chromeleon 強(qiáng)大功能的冰山一角。結(jié)合Chromeleon 實(shí)用的多廠商儀器控制能力,出色的系統(tǒng)適用性和智能運(yùn)行控制功能,便捷的數(shù)據(jù)積分、處理功能,直觀的圖形化顯示,全面的合規(guī)能力,Chromeleon不但可以提升方法開發(fā)、驗(yàn)證的效率,也一定能夠幫助色譜工作者執(zhí)行分析方法生命周期的管理。
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2024-11-13 15:14:01柱后衍生系統(tǒng)的原理是什么?柱后衍生的作用有哪些?
柱后衍生系統(tǒng)(Post-Column Derivative System)是一種廣泛應(yīng)用于液相色譜分析中的技術(shù),旨在提高分離效果與檢測靈敏度。該技術(shù)通過在色譜柱分離后,增加一個(gè)衍生反應(yīng)步驟,允許分析物與試劑反應(yīng)生成新的衍生物,從而增強(qiáng)其在檢測儀器中的可檢測性。本文將深入探討柱后衍生系統(tǒng)的基本原理、應(yīng)用場景及其對(duì)分析精度的提升作用。核心原理及工作機(jī)制柱后衍生系統(tǒng)的核心原理是通過化學(xué)反應(yīng)對(duì)分析物進(jìn)行衍生化,衍生后的化合物通常具有更強(qiáng)的吸光度、熒光性或更高的質(zhì)譜響應(yīng),使得原本難以檢測或響應(yīng)較弱的化合物變得更容易檢測。具體來說,色譜分析物在分離出色譜柱后,與特定的衍生試劑發(fā)生反應(yīng),這一反應(yīng)通常發(fā)生在柱后設(shè)備中。此過程常常依賴于特定的反應(yīng)條件,如溫度、pH值和反應(yīng)時(shí)間等,確保反應(yīng)的選擇性和高效性。柱后衍生系統(tǒng)的組成與工作流程柱后衍生系統(tǒng)的主要組成部分包括色譜柱、柱后衍生裝置和檢測器。在整個(gè)系統(tǒng)中,液相色譜柱負(fù)責(zé)分離混合物中的各組分,柱后衍生裝置負(fù)責(zé)對(duì)分離出的各組分進(jìn)行衍生化反應(yīng),而檢測器則負(fù)責(zé)檢測反應(yīng)后的產(chǎn)物。具體工作流程如下:樣品進(jìn)樣與分離:樣品通過液相色譜系統(tǒng)進(jìn)入色譜柱,并在柱內(nèi)根據(jù)分子間的相互作用力進(jìn)行分離。柱后衍生化反應(yīng):分離后的各組分流經(jīng)柱后衍生裝置,與預(yù)設(shè)的衍生試劑發(fā)生反應(yīng)。此過程通常在特定的溫控系統(tǒng)下進(jìn)行,以保證衍生化反應(yīng)的完整性和效率。產(chǎn)物檢測與分析:衍生化產(chǎn)物進(jìn)入檢測器(如熒光檢測器或質(zhì)譜儀),通過對(duì)比分析信號(hào)強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)行定性與定量分析。柱后衍生系統(tǒng)的應(yīng)用柱后衍生技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,尤其在復(fù)雜樣品的分析中,能夠顯著提高檢測靈敏度。常見的應(yīng)用領(lǐng)域包括:環(huán)境監(jiān)測:如水質(zhì)、空氣中的有害物質(zhì)檢測,柱后衍生技術(shù)能提高某些污染物的檢測限,使其更適用于低濃度分析。食品與藥品檢測:例如,食物中的添加劑、農(nóng)藥殘留以及藥品中的微量成分分析,柱后衍生化有助于識(shí)別和量化這些物質(zhì)。臨床分析:在生物樣品(如血液、尿液)中,柱后衍生化技術(shù)能增強(qiáng)某些生物標(biāo)志物的響應(yīng),有助于疾病診斷和監(jiān)測。優(yōu)勢與挑戰(zhàn)柱后衍生系統(tǒng)大的優(yōu)勢在于其能夠有效提高難以直接檢測物質(zhì)的靈敏度和選擇性。這一技術(shù)也并非沒有挑戰(zhàn)。衍生反應(yīng)的選擇性和反應(yīng)條件必須得到精確控制,稍有不慎可能會(huì)影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。某些試劑可能存在毒性或不穩(wěn)定性,使用時(shí)需要謹(jǐn)慎處理。
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2024-11-13 15:37:47柱后衍生系統(tǒng)哪些公司在做,柱后衍生化可改善色譜分離嗎?
液相柱后衍生系統(tǒng)在高效液相色譜(HPLC)分析中扮演著關(guān)鍵角色,通過在色譜分離之后進(jìn)行衍生反應(yīng),顯著提高了目標(biāo)化合物的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性。以下是一些生產(chǎn)柱后衍生系統(tǒng)的公司:通微公司:該公司提供PCD-3000柱后衍生系統(tǒng),采用模塊化設(shè)計(jì)的衍生泵和反應(yīng)器,配置靈活,可提供一級(jí)柱后衍生系統(tǒng)和二級(jí)柱后衍生系統(tǒng)供您選擇,滿足不同柱后衍生實(shí)驗(yàn)操作的需求。大連依利特分析儀器有限公司:該公司也提供多種柱后衍生系統(tǒng),如P1200型柱后衍生儀等,適用于多種應(yīng)用領(lǐng)域。Waters Corporation:作為領(lǐng)先的分析儀器制造商,Waters也提供了先進(jìn)的柱后衍生解決方案,以滿足不同領(lǐng)域用戶的需求。Agilent Technologies:另一家知名的分析儀器制造商,同樣提供高質(zhì)量的柱后衍生系統(tǒng),廣泛應(yīng)用于制藥、環(huán)保、食品等領(lǐng)域。Thermo Fisher Scientific:該公司在分析儀器領(lǐng)域擁有深厚的技術(shù)積累,其柱后衍生系統(tǒng)以高性能、高穩(wěn)定性著稱,受到廣大用戶的青睞。Shimadzu Corporation:日本島津公司也是一家知名的分析儀器制造商,其柱后衍生系統(tǒng)在技術(shù)上不斷創(chuàng)新,為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供了有力支持。柱后衍生化對(duì)色譜分離的影響柱后衍生化對(duì)色譜分離本身沒有直接影響,但它可以間接改善色譜分離的效果。具體來說,柱后衍生化通過以下方式影響色譜分離:提高檢測靈敏度:柱后衍生化可以將原本難以直接檢測的化合物轉(zhuǎn)化為易于檢測的物質(zhì),從而提高檢測靈敏度。這有助于更準(zhǔn)確地識(shí)別和定量色譜峰,尤其是在復(fù)雜樣品基質(zhì)中。減少干擾物質(zhì)的影響:通過柱后衍生化,可以選擇性地改變被測物的物理或化學(xué)性質(zhì),使其與干擾物質(zhì)區(qū)分開來,從而減少干擾物質(zhì)對(duì)檢測結(jié)果的影響。增強(qiáng)分離效果:在某些情況下,柱后衍生化可以使原本難以分離的化合物產(chǎn)生不同的衍生物,這些衍生物在色譜柱上的保留行為可能有所不同,從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。但需要注意的是,這種分離效果的改善通常是針對(duì)特定化合物而言的,并非對(duì)所有化合物都適用。
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2022-11-25 14:08:19送福利了 | 凝膠滲透色譜分析方法開發(fā)tips
凝膠滲透色譜法是體積排阻色譜法的一種,以水或者緩沖液為流動(dòng)相;以有機(jī)溶劑為流動(dòng)相的一般叫凝膠過濾色譜法。兩者都屬于體積排阻色譜法(Size exclusion chromatography,SEC)。SEC是20世紀(jì)60年代發(fā)展的一種分離模式。它是根據(jù)空間結(jié)構(gòu)不同的分子在多孔顆粒中的路徑不同而進(jìn)行分離。原理如下原理看完原理給我們就有了一個(gè)小的tips啦:tips 1分子直徑比最 大孔隙直徑大的分子全部被排阻在凝膠顆粒以外,兩種或兩種以上的這樣的分子不能達(dá)到分離效果。tips 2分子直徑比最小孔隙直徑小的分子能全部進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,這樣的兩種或兩種以上的分子也不能達(dá)到分離效果。應(yīng)用領(lǐng)域生物藥質(zhì)控?單抗?雙抗?ADC?融合蛋白?血液制品?重組白蛋白?糖蛋白?PEG蛋白?多肽?多糖?纖維素生物藥工藝監(jiān)控?單抗?雙抗?ADC?融合蛋白?血液制品?重組白蛋白?PEG蛋白?多肽輔料和殘留分析?吐溫80/20?聚乙二醇?泊洛沙姆?聚乙烯吡咯烷酮食品化藥領(lǐng)域?水溶性抗生素聚體分析?乳品中乳白蛋白和乳球蛋白分離?中藥中吐溫20/80不同的樣品由于空間結(jié)構(gòu)不同,在同一根柱子上的排阻范圍不同。參考選用跟標(biāo)準(zhǔn)品結(jié)構(gòu)最相近的排阻范圍內(nèi)的柱子。如下BIOBASIC系列SEC色譜柱的不同標(biāo)準(zhǔn)品的校準(zhǔn)曲線如下:方法開發(fā)考慮因素1、孔徑分布相近孔徑分布的柱子,在檢測同一個(gè)樣品時(shí),聚體與主峰或者主峰與片段的分離可能會(huì)存在比較大的差異。2、粒徑不同的粒徑的相近孔徑分布的柱子,分析需要的柱長和分析時(shí)間會(huì)有差異。3、緩沖體系緩沖體系中流動(dòng)相的組成,pH值可能會(huì)改變蛋白的三維結(jié)構(gòu)和折疊狀態(tài),進(jìn)而影響單體,片段與聚體的分離。4、鹽濃度由于包裹技術(shù)的差異,樣品可能會(huì)跟色譜柱之間存在一些離子性吸附,這個(gè)時(shí)候,需要提高流動(dòng)相中鹽的濃度來屏蔽這種作用。Mabpac SEC 系列優(yōu)異的包裹技術(shù),可以在比較低的鹽濃度下分析蛋白樣品,進(jìn)而用于Native 質(zhì)譜方法開發(fā)。僅僅給出方法開發(fā)tips怎么能表達(dá)我們的誠意呢,我們更推出了免費(fèi)SEC做樣的服務(wù),快快掃描以下二維碼報(bào)名參加吧:
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