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2025-03-28 15:24:44細胞可視化分選培養(yǎng)
細胞可視化分選培養(yǎng)是一種先進的細胞處理技術,它結合了顯微成像與細胞分選技術,實現(xiàn)了對細胞的高精度識別與分離。該技術能在培養(yǎng)過程中對細胞進行實時觀察,依據(jù)細胞的形態(tài)、大小、熒光標記等特征進行精準分選,進而將特定類型的細胞分離出來進行單獨培養(yǎng)。這有助于科學家深入研究細胞的功能、行為及相互作用,廣泛應用于生物醫(yī)學研究、藥物篩選及再生醫(yī)學等領域。

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2022-03-01 10:17:17新品搶先試 用 | 納米磁珠細胞分選 ,Get最方便的細胞分選方法!
提到細胞分選實驗,大家首先想到就是流式細胞分選,該方法使用熒光抗體標記單細胞懸液,再通過調(diào)節(jié)合適的電壓、補償?shù)?,可以將目的細胞與非目的細胞區(qū)分開來。由于可以對多參數(shù)、不同熒光強度的細胞進行鑒定、分類、定量和分離,流式分選技術在同時進行多標記的細胞分選時,其地位無可替代。但是當需要快速獲得某種分選后的細胞時,流式分選的操作較為復雜,且花費的時間過長,對細胞的刺激也比較大。因此,使用免疫納米磁珠進行快速細胞分選的方法應運而生,該方法不僅對細胞刺激性小、速度快,而且操作簡單,稍等片刻就可快速獲得目的細胞。(▲瑞沃德細胞分選新品)新品來襲,自主研發(fā)瑞沃德細胞分選產(chǎn)品包括自主研發(fā)的磁珠分選試劑盒和細胞分選柱,能在短時間內(nèi)通過簡單、快速的操作分選得到高純度、高活率的目標細胞。使用流程同時,納米級別磁珠無需洗脫,分選得到的細胞可直接應用于流式分析、細胞培養(yǎng)、單細胞測序等下游實驗。結果展示純度*注:小鼠脾 臟細胞樣本CD3分選后純度流式檢測結果,A為分選后陰性管(流出組分),B為分選后陽性管(滯留組分)。Marker激活情況注:小鼠脾 臟細胞樣本CD3分選后激活Marker CD69檢測結果,A為分選后Day0檢測結果,B為分選后用CD3/CD28單抗激活Day3檢測結果應用場景多,助力科學研究免疫學研究腫瘤學研究神經(jīng)生物學研究干細胞研究細胞治療四大特點,輕松獲取目標細胞1、可獲得高純度,高活率,高得率的目的細胞2、獲得細胞可直接用于細胞培養(yǎng),測序等下游實驗3、溫和,低刺激,不改變細胞原本生物學特性4、高效便捷,操作簡單新品上市開啟免費試 用活動小鼠CD3+/ CD4+/ CD8+三種細胞分選試劑盒按需任選,助您更好地細胞分選識別下方二維碼,快來申請免費試 用
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2023-05-29 09:51:53數(shù)據(jù)可視化,分析自動化
Chromeleon CDS隨著工業(yè)4.0的發(fā)展,各行各業(yè)都面臨著數(shù)字化轉型、智能化生產(chǎn)的挑戰(zhàn)和機遇,尋求建立更加靈活的數(shù)字化產(chǎn)品與服務的生產(chǎn)模式,打破傳統(tǒng)行業(yè)界限,實現(xiàn)多領域合作和發(fā)展。而在以色譜儀器為主導的實驗室中,色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)(CDS)作為關鍵的軟件工具同樣被寄予了更高的期望。Chromeleon CDS作為業(yè)界領先的色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng),從儀器控制、數(shù)據(jù)采集到分析處理、報告,提供了多樣化的智能工具,不僅幫助使用者優(yōu)化操作流程,還可以直接通過圖形化功能實現(xiàn)數(shù)據(jù)和信息的可視化深度挖掘。(點擊查看大圖) 一鍵生成實驗數(shù)據(jù)分析圖表日常實驗過程中,在Chromeleon的處理方法和報告中可一鍵生成實驗數(shù)據(jù)的分析圖表,例如,進樣間組分的保留時間變化,峰面積、含量差異等,或者直接調(diào)用軟件中分析測試模版,如含量均勻度,包含數(shù)據(jù)分析圖的報告。圖表顯示的數(shù)據(jù)范圍、格式均可根據(jù)需要進行自定義設置,比如僅顯示序列中測試樣品的結果。同時,可以自動計算統(tǒng)計值結果,包括:偏差σ上下限度、平均值、線性趨勢以及線性函數(shù)方程等。基于Chromeleon動態(tài)鏈接的特點,分析圖中的數(shù)據(jù)點和對應的數(shù)據(jù)對象及結果自動關聯(lián),聯(lián)動查看,幫助操作者更加直觀準確的分析數(shù)據(jù)?;瑒硬榭锤?nbsp;歷史數(shù)據(jù)的趨勢分析和回顧分析對于歷史數(shù)據(jù)的趨勢分析和回顧分析能為實驗工作提供可靠的數(shù)據(jù)支持。通過Chromeleon數(shù)據(jù)查詢結合圖表分析功能,可以實現(xiàn)在大量數(shù)據(jù)中進行快速分析。首先,基于Chromeleon內(nèi)置的搜索編輯器,設置全變量范圍的搜索條件,以及多條件間“and”或“or”的邏輯組合,結合比較運算符的選擇可實現(xiàn)精確或模糊查找,將符合條件的進樣全部羅列顯示,這些數(shù)據(jù)可能來自于不同的測試時間,不同的路徑或不同的操作者,但都可以一鍵整合到虛擬序列中進行共性差異化分析,自動生成趨勢分析圖,根據(jù)需要選擇圖表顯示內(nèi)容。并且軟件中提供了多樣化圖表類型的選擇,滿足不同實驗室的查看需求?;瑒硬榭锤?nbsp;進一步擴展實驗室工作效率統(tǒng)計在Chromeleon中,圖形化分析不僅應用于實驗數(shù)據(jù),還能進一步擴展到實驗室工作效率統(tǒng)計,同樣通過查詢先鎖定需要統(tǒng)計的數(shù)據(jù)范圍,再結合靈活的報告編輯對目標數(shù)據(jù)進行自動計算,生成統(tǒng)計表格,基于統(tǒng)計結果一鍵生成圖表。查詢創(chuàng)建后可隨時啟用執(zhí)行,隨著數(shù)據(jù)的更新,查詢結果以及所關聯(lián)的統(tǒng)計結果會自動更新,從而實現(xiàn)了工作效率的實時統(tǒng)計。內(nèi)容基于自定義編輯可包括但不限于:儀器使用(占用)率、人員工作量、環(huán)比周期間對比等;在色譜軟件內(nèi)輕松實現(xiàn)實驗室信息 Dashboard 的靈活運用,幫助管理者實時把控實驗室運營狀態(tài),及時合理調(diào)配資源?;瑒硬榭锤?nbsp; 總  結 自動化圖表作為Chromeleon CDS軟件內(nèi)置的標準功能,直接將原始數(shù)據(jù)和結果轉化至圖形化分析,避免了使用者借助額外的程序所帶來的數(shù)據(jù)一致性風險。同時結合軟件的數(shù)據(jù)查詢和靈活的報告編輯,將圖形化分析從數(shù)據(jù)擴展到實驗室管理,滿足各行業(yè)實驗室自動化分析的多樣化需求,迎合法規(guī)趨勢,進一步確保實驗室數(shù)據(jù)流的及時jingzhun交付,為實驗室數(shù)字化轉型和智能化發(fā)展奠定基礎。
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2023-04-12 15:12:46數(shù)據(jù)可視化,分析自動化
隨著工業(yè)4.0的發(fā)展,各行各業(yè)都面臨著數(shù)字化轉型、智能化生產(chǎn)的挑戰(zhàn)和機遇,尋求建立更加靈活的數(shù)字化產(chǎn)品與服務的生產(chǎn)模式,打破傳統(tǒng)行業(yè)界限,實現(xiàn)多領域合作和發(fā)展。而在以色譜儀器為主導的實驗室中,色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)(CDS)作為關鍵的軟件工具同樣被寄予了更高的期望。Chromeleon CDS作為業(yè)界領先的色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng),從儀器控制、數(shù)據(jù)采集到分析處理、報告,提供了多樣化的智能工具,不僅幫助使用者優(yōu)化操作流程,還可以直接通過圖形化功能實現(xiàn)數(shù)據(jù)和信息的可視化深度挖掘。一鍵生成實驗數(shù)據(jù)分析圖表日常實驗過程中,在Chromeleon的處理方法和報告中可一鍵生成實驗數(shù)據(jù)的分析圖表,例如,進樣間組分的保留時間變化,峰面積、含量差異等,或者直接調(diào)用軟件中分析測試模版,如含量均勻度,包含數(shù)據(jù)分析圖的報告。圖表顯示的數(shù)據(jù)范圍、格式均可根據(jù)需要進行自定義設置,比如僅顯示序列中測試樣品的結果。同時,可以自動計算統(tǒng)計值結果,包括:偏差σ上下限度、平均值、線性趨勢以及線性函數(shù)方程等。基于Chromeleon動態(tài)鏈接的特點,分析圖中的數(shù)據(jù)點和對應的數(shù)據(jù)對象及結果自動關聯(lián),聯(lián)動查看,幫助操作者更加直觀準確的分析數(shù)據(jù)。進一步擴展實驗室工作效率統(tǒng)計在Chromeleon中,圖形化分析不僅應用于實驗數(shù)據(jù),還能進一步擴展到實驗室工作效率統(tǒng)計,同樣通過查詢先鎖定需要統(tǒng)計的數(shù)據(jù)范圍,再結合靈活的報告編輯對目標數(shù)據(jù)進行自動計算,生成統(tǒng)計表格,基于統(tǒng)計結果一鍵生成圖表。查詢創(chuàng)建后可隨時啟用執(zhí)行,隨著數(shù)據(jù)的更新,查詢結果以及所關聯(lián)的統(tǒng)計結果會自動更新,從而實現(xiàn)了工作效率的實時統(tǒng)計。內(nèi)容基于自定義編輯可包括但不限于:儀器使用(占用)率、人員工作量、環(huán)比周期間對比等;在色譜軟件內(nèi)輕松實現(xiàn)實驗室信息 Dashboard 的靈活運用,幫助管理者實時把控實驗室運營狀態(tài),及時合理調(diào)配資源???nbsp; 結 自動化圖表作為Chromeleon CDS軟件內(nèi)置的標準功能,直接將原始數(shù)據(jù)和結果轉化至圖形化分析,避免了使用者借助額外的程序所帶來的數(shù)據(jù)一致性風險。同時結合軟件的數(shù)據(jù)查詢和靈活的報告編輯,將圖形化分析從數(shù)據(jù)擴展到實驗室管理,滿足各行業(yè)實驗室自動化分析的多樣化需求,迎合法規(guī)趨勢,進一步確保實驗室數(shù)據(jù)流的及時精 準交付,為實驗室數(shù)字化轉型和智能化發(fā)展奠定基礎。
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2022-12-25 11:02:19脊柱手術中的高級可視化
近年來脊柱手術取得了有意義的進展。微創(chuàng)脊柱手術(MISS)技術具有顯著的優(yōu)勢,有助于大限度地減少手術創(chuàng)傷,改善患者結果,并縮短術后恢復時間。手術顯微鏡,為脊柱手術的可視化質量設定了新的標準。手術顯微鏡提供了優(yōu)質的光學器件和照明,以及反應靈敏且穩(wěn)定的落地支架。手術顯微鏡可以為狹窄的腔體深處提供明亮的全聚焦視場。主要經(jīng)驗醫(yī)生在進行后路腰椎融合術時手術顯微鏡的優(yōu)點:幫助醫(yī)生使手術創(chuàng)傷更小。手術顯微鏡的主要特點:簡單易用、連通性、全面可視化、景深大、最 佳照明、圖像質量高和符合人體工學的操作體位。關于手術顯微鏡手術顯微鏡為支持微創(chuàng)脊柱手術(MISS)和諸如后路腰椎融合術、后路腰椎椎體間融合術等手術提供了獨特的優(yōu)勢。手術顯微鏡具有出色的光學性能和大景深,讓醫(yī)生看到所需的細節(jié)。無需反復尋找重要細節(jié)或不斷重新聚焦。手術顯微鏡的支架采用輕量化設計且功能豐富多樣,可快速設置,能提高手術室的工作效率。在脊柱手術中使用手術顯微鏡給醫(yī)生留下了什么印象?手術顯微鏡是一個非常好的設備,易于使用,易于操作。對于手術室中的操作人員來說,該機器的設計使其簡單易用。例如,觸摸屏非常方便,簡單易用,也可以將它輕松連接到手術室的上方屏幕。在使用手術顯微鏡的過程中,醫(yī)生體會到了哪些優(yōu)勢?醫(yī)生使用手術顯微鏡時可以清楚地看到受損側的退化神經(jīng)根,可以擁有很好的視野,在手術側非常深入地聚焦??梢栽诮馄蕦涌吹角宄膮^(qū)別??梢钥吹近S色韌帶,神經(jīng)根,硬膜囊,鞘囊,可以在使用焦距和放大倍數(shù)的同時清晰地區(qū)分它們。手術顯微鏡的哪一點最吸引醫(yī)生?對醫(yī)生來說手術顯微鏡主要的好處是,醫(yī)生可以將光線很好地、深入的帶入手術視野中,可以在不改變生理位置的情況下改變顯微鏡的位置,這樣可以更加輕松地對患者進行手術。使得手術創(chuàng)傷更小,所以對患者更有益處。手術顯微鏡的其它優(yōu)勢手術顯微鏡進入手術室也非常人性化,側屏幕,新的平板屏幕,具有非常高的圖像質量,讓手術室里的每個人都可以觀看手術。
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2023-06-09 11:41:52人人都是流式高手:Tumor-infiltrating lymphocytes(TILs) 分選秘籍
Tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) 是指浸潤腫瘤組織的淋巴細胞。淋巴細胞是免疫系統(tǒng)中的重要組成部分,負責識別和攻擊異常細胞,包括癌細胞。流式細胞術對TILs的分選提供了一個重要的工具,用于表征、純化和研究浸潤腫瘤的免疫細胞群。它有助于研究人員了解TILs的組成、功能和潛在的治 療相關性,推動我們對腫瘤與免疫相互作用的理解。我們使用流式細胞術來分選TILs主要應用場景如下:01、鑒定和表征:流式細胞術允許我們根據(jù)TILs表面標記物的特征來鑒定和表征不同的亞群。通過使用針對CD3、CD4、CD8和其他免疫細胞標記物的特異性抗體來標記細胞,我們可以區(qū)分和定量TILs中的各種T細胞亞群。這有助于我們了解腫瘤微環(huán)境中TILs的組成和多樣性。02、特定TIL亞群的純化:流式細胞術分選使我們能夠分離和純化感興趣的特定TIL亞群。通過基于表面標記物的表達,對細胞進行分選和篩選,我們可以收集純凈的TIL亞群用于進一步的下游應用。這使研究人員能夠研究特定的TIL亞群,并研究其功能特性或基因表達譜。03、功能分析:分選后的TILs可用于功能性分析,以評估其免疫活性和功能。例如,可以測試分選后的TILs的增殖能力、細胞因子產(chǎn)生、對腫瘤細胞的細胞毒性或其他功能性實驗。這些分析提供了有關TIL亞群功能能力和潛在抗腫瘤免疫反應的見解。04、基因組學或蛋白質組學分析:流式細胞術分選可以獲得純凈的TIL細胞群,進而進行基因組學或蛋白質組學分析。通過分析分選TILs的基因表達或蛋白質譜,研究人員可以更深入地了解與TILs在腫瘤免疫中相關的分子機制和信號通路。然而不同于外周血、脾 臟中的淋巴細胞,TILs的流式檢測存在更多的不確定性,需要有效優(yōu)化包括樣本處理、配色方案、上樣條件以及分析方法等實驗設計的各個方面,才能實現(xiàn)更為準確、真實的多色復雜樣本流式檢測。圖1為外周血來源樣本淋巴細胞分型的流式檢測數(shù)據(jù),由圖可見,淋巴細胞群體T、B細胞分群明顯,T細胞亞群也可清晰區(qū)分。另外,我們也可以看到,該數(shù)據(jù)以FSC通道設定閾值,其閾值設定值較低,導致碎片及噪音信號干擾明顯,不過由于血液樣本碎片較少,與細胞分群明顯,故而對最 終結果的影響并不大。圖1 血液樣本淋巴細胞免疫分型流式數(shù)據(jù)然而,當我們使用同樣的模板檢測腫瘤組織樣本時,數(shù)據(jù)就出現(xiàn)了明顯問題。實體瘤組織細胞構成復雜,并且在將組織樣本制備成單細胞樣本的過程中會產(chǎn)生大量的細胞碎片,這些雜質細胞及碎片會對流式檢測造成顯著的干擾。如圖2所示,T細胞中出現(xiàn)了大量CD19和CD3雙陽性細胞,不符合已有文獻報道的結果。這些雙陽性細胞主要是由于雜質細胞及碎片的非特異干擾導致的。這些干擾對于流式檢測及流式分選的準確性有很大影響,甚至會導致得出錯誤的結論。圖2 浸潤腫瘤組織的淋巴細胞免疫分型流式數(shù)據(jù)那么,基于以上數(shù)據(jù),我們應該如何優(yōu)化實驗設計以提高浸潤腫瘤組織的淋巴細胞分選的準確性呢?這里給大家以下幾點建議:01、增加Pan-Marker檢測:這里的Pan-Marker是指目標細胞群均表達,但其他細胞群體及碎片不表達的表面標記。CD45廣泛表達于免疫系統(tǒng)的各個細胞亞群上,但在非免疫細胞上沒有表達或表達很低。因此,在檢測淋巴細胞等免疫細胞時,可通過檢測CD45是否表達來區(qū)分免疫細胞及非免疫細胞,以達到排除雜質細胞干擾的目的。02、優(yōu)化樣本制備方案:對復雜樣本來講,樣本制備方案是否合適決定了流式實驗的成功率。可根據(jù)文獻報道并通過預實驗來選擇最 佳的消化酶配方和消化時間,在確保細胞得率的同時盡量減少雜質干擾并最 大限度的保存細胞活性及功能。此外,選擇合適的細胞分離手段進行目的細胞的富集。例如,若針對淋巴細胞檢測,利用Ficoll或Percoll密度梯度離心法富集單個核細胞,可有效去除脂肪、碎片及雜質細胞的干擾。03、進行Fc封閉:組織浸潤的多種細胞,特別是單核/巨噬細胞以及DC細胞高表達抗體Fc端的受體。這些細胞在進行流式抗體標記時,即使不表達相關抗原,也可通過Fc受體非特異性的結合流式抗體的Fc端,從而導致非特異信號。要解決這一問題,可購買商業(yè)化Fc封閉試劑,在標記流式抗體前進行Fc封閉即可。04、合理設定閾值:閾值的設定與實驗目的息息相關。在流式分析實驗中,應當設定閾值去除絕大部分噪音及碎片信號,僅保留少量碎片信號即可。在流式分選實驗中,若分選所得細胞用于培養(yǎng),同樣應當設定閾值去除絕大部分噪音及碎片信號,僅保留少量碎片信號,這樣做可以有效提高分選效率及回收率;但若分選所得細胞用于qPCR、測序,特別是單細胞測序等基因組學應用,由于碎片中含有一定量的核酸片段乃至細胞核碎片,在分選過程中就需要將盡可能多的碎片與目的細胞區(qū)分,因此應當設定較低的閾值以暴露足量的碎片信號讓分選儀器檢測到,進而有效確保分選所得目的細胞不摻雜核酸碎片,以免影響后續(xù)實驗準確性。05、利用空白熒光通道排除非特異:什么是空白熒光通道呢?舉一個例子,我們設計一個3色實驗標記FITC、PE、PE-Cy7三種染料,沒有標記APC,在檢測時APC通道就是空白通道,是不應該有陽性信號的。復雜樣本中的部分雜質細胞有較強的非特異熒光信號,通常這些非特異的熒光信號在所有的流式熒光通道中均可檢測到?;谶@一原理,我們可在上樣時預留一到兩個空白熒光通道,樣本中的目的細胞沒有標記這些空通道的熒光素,在這些通道里面是陰性的,而雜質細胞的非特異信號在空白通道中通常也是陽性的,我們就可以通過設門選擇空白通道中的陰性細胞來達到去除非特異信號的目的。需要注意的是,利用這一方法時要充分考慮補償?shù)挠绊?,?好選擇與已用通道補償小或無補償?shù)耐ǖ雷鳛榭瞻淄ǖ馈?6、增加細胞死活染料:死細胞的非特異性地結合會增加假陽性。死細胞會產(chǎn)生自發(fā)熒光干擾特定信號的檢測。在TILs分選中去除死細胞??梢栽黾訑?shù)據(jù)準確性:死亡的細胞可能會釋放細胞碎片和細胞內(nèi)成分,這可能會干擾實驗結果,引入假陽性或假陰性結果。通過去除死細胞,可以提高分選結果的準確性和可靠性。并且為分選后TILs細胞活力提供保證:分選到活細胞可以保證后續(xù)實驗的有效性和可靠性。死亡細胞不具備正常的生物活性和功能,因此分選到活細胞可以確保后續(xù)實驗能夠反映真實的細胞生物學狀態(tài)。圖3 無死細胞排除處理的樣本分析比較圖4 有死細胞排除處理的樣本分析比較復蘇后的PBMC在免疫染色之前不添加(圖 3)或者添加ViaKrome 405可固定活性染料(55℃,10分鐘)(圖 4)。然后,使用Perfix-nc細胞染色試劑盒(型號 B10825)處理細胞,并用Granzyme B-FITC、CD19-PE、CD14-ECD、CD79a-PC5.5、CD3-PC7 和 CD45- Krome Orange 進行染色。 數(shù)據(jù)統(tǒng)計信息顯示:兩個不同條件下,門內(nèi)細胞在上一門級百分比也不一樣,充分展示了消除死細胞以后的數(shù)據(jù)效果。
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