- 2025-01-10 10:49:41純化制備色譜
- 純化制備色譜是一種高效的分離技術(shù),主要用于從復(fù)雜混合物中提純目標(biāo)化合物。它利用不同物質(zhì)在固定相和流動相之間的分配差異,通過色譜柱實現(xiàn)物質(zhì)的分離。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、化工、食品等領(lǐng)域,能夠制備高純度、高活性的產(chǎn)品。純化制備色譜具有分離效率高、操作簡便、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn),是現(xiàn)代實驗室和生產(chǎn)線上不可或缺的分析與制備工具。
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純化制備色譜問答
- 2023-06-28 17:17:04全自動酸蒸清洗/純化一體機(jī)——AC300
- 全自動酸蒸清洗/純化一體機(jī)——AC300酸蒸超凈清洗是一種自動、密閉、酸蒸汽清洗方法。通過內(nèi)置可控溫加熱系統(tǒng),利用酸蒸汽安全高效地對所 有可溶于酸中的任何痕量金屬污染物進(jìn)行超凈清洗,并將其留在液體酸中,絕不會接觸正在清洗的反應(yīng)容器。功能特點(diǎn):蒸汽單循環(huán)技術(shù)(OWV)——臟酸不回流,不污染凈酸確保洗過的臟酸直接排出系統(tǒng),而不會回流進(jìn)酸池造成污染。而傳統(tǒng)技術(shù)的臟酸要回流進(jìn)酸池,然后再次蒸發(fā)出來去清洗,不斷循環(huán),導(dǎo)致臟酸不斷污染凈酸,從而酸蒸汽也越來越臟,無法勝任稍高污染度的清洗。真實溫度控制技術(shù)(RTC)——確保蒸汽的高純度準(zhǔn)確測量,是控溫精確的前提。采用RTC真實溫度控制技術(shù),溫度探頭經(jīng)過特殊處理,具有與特氟龍一樣的抗酸能力,直接插進(jìn)酸液,監(jiān)控酸液的真實溫度,從而準(zhǔn)確控制溫度,確保酸蒸汽的純度,杜絕其他品牌只監(jiān)控加熱器溫度而無法準(zhǔn)確控溫,酸蒸汽純度低的問題。PTC半導(dǎo)體加熱器——最安全的加熱器,沒有之一!最適合長時間無人值守!加熱器具有自我溫度保護(hù)功能,在所有溫控系統(tǒng)都失靈的極端情況下,其 最高溫度也不會超過250℃,避免燒毀儀器甚至火災(zāi)。 清洗流程表:AC300讓您的酸循環(huán)起來!廢酸重復(fù)使用,節(jié)約資金,保護(hù)環(huán)境AC300不但完美勝任酸蒸清洗任務(wù),還具有自我酸純化功能,用戶只需在軟件中勾選酸純化選項,甚至不用更換酸瓶,AC300即自動抽取廢酸瓶中的廢酸進(jìn)行亞沸蒸餾純化,純化后的酸自動收集到純酸瓶,以備下次使用。隨后整個系統(tǒng)會自動被超純水潤洗和熱空氣干燥,以備下一輪的酸蒸清洗任務(wù)。廢酸純化流程圖:轉(zhuǎn)載自:http://www.hzxpz.com/
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- 2020-07-22 16:55:03制備色譜純化中流速該如何設(shè)定?
- 在制備純化工藝中,想要準(zhǔn)確、合理的確定流動相的流速范圍,需要結(jié)合一定的理論基礎(chǔ)和實際的純化經(jīng)驗。Flash產(chǎn)品
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- 2023-06-09 11:39:07經(jīng)典磁珠一文解讀:AMPure XP純化實用技巧
- 基于SPRI技術(shù)的AMPure XP,采用超順磁磁珠幫助純化核酸片段,被廣泛應(yīng)用到NGS行業(yè),PCR體系、酶切、連接反應(yīng)體系的純化。作為行業(yè)的“金標(biāo)準(zhǔn)“試劑盒,AMPure XP有哪些高頻Q&A問題呢?AMPure XP怎么純化長片段?怎么提高我的樣本得率?產(chǎn)物純度有什么優(yōu)化的方向嗎?我可以選擇純化250 bp的那一條條帶嗎?小貝總結(jié)了10條AMPure XP Q&A問題實用技巧:1、乙醇比例乙醇溶液必須至少70%。當(dāng)將100%乙醇稀釋至70%時,請確保在配置溶液合并之前分別測量水和乙醇的體積。用水補(bǔ)齊乙醇的稀釋方式會導(dǎo)致濃度低于預(yù)期。請確保存儲的乙醇在不使用時保持瓶蓋擰緊。2、充分的混合在最 初磁珠與樣品結(jié)合和洗脫混合期間,徹底的混合至關(guān)重要??捎寐缘陀诳偪左w積的吸頭進(jìn)行混合。洗脫時,需要注意最 小洗脫體積(96孔規(guī)格為40 μL,384孔規(guī)格為15 μL),以確保磁珠充分重懸。還應(yīng)保持足夠的孵育時間,以確保核酸有足夠的時間與磁珠結(jié)合或解離。由于樣品的粘度,結(jié)合過程中的渦旋可能效率不高。3、大反應(yīng)體系大體積反應(yīng)可以采用更長的樣品&磁珠結(jié)合和磁分離時間??蓪inding結(jié)合時間增加到10分鐘,并確保在棄上清液之前所有的磁珠均被充分磁分離。4、避免實驗中磁珠損失如果在棄清液的過程中磁珠被吸入槍頭,結(jié)合在這些磁珠上的核酸則會在這個步驟損失掉。首輪移除上清時,緩慢輕柔地操作,盡可能多地移除清液,同時確保不會干擾磁珠在磁環(huán)/磁力架上的吸附。如果意外吸出磁珠,請將所有磁珠重新打回孔中,讓磁珠重新磁吸。隨后,再度移除上清,嘗試緩慢吸液或使用更細(xì)的槍頭。小體積樣品更容易受到磁珠損耗的影響,因為磁珠可能達(dá)不到孔中磁鐵的水平位置。5、大片段樣品的磁珠干燥10 kb以上的片段與磁珠結(jié)合非常緊密,如果樣品變干則難以洗脫。盡可能完全地棄掉最 后一次乙醇清洗液,立即加入洗脫緩沖液并充分混合。保持蓋子打開狀態(tài),乙醇在洗脫孵育期間將繼續(xù)從孔中蒸發(fā)。6、低洗脫體積洗脫體積小會導(dǎo)致回收率降低。這是因為會有少量洗脫緩沖液始終包覆在磁珠上。該體積取決于孔的形狀和孔中的磁珠量,因此較小的洗脫體積將導(dǎo)致相對較高比例的洗脫液殘留。7、當(dāng)你用紫外吸收法檢測回收率不只是PCR雙鏈產(chǎn)物,體系中過量的引物和核苷酸同樣產(chǎn)生吸收。因此測量未純化的PCR反應(yīng),可能獲得高于實際PCR產(chǎn)物濃度的吸光度值。對比純化前后的吸收值,則會導(dǎo)致回收率看起來比實際低。小貝建議:在瓊脂糖凝膠上運(yùn)行等量的未純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物與純化后的PCR反應(yīng)產(chǎn)物(例如1/4的未純化PCR產(chǎn)物和1/4的洗脫液)以便檢查回收情況,或使用基于特異性熒光染料的測定,例如PicoGreen。8、引物的殘留AMPure XP試劑與PCR反應(yīng)混合后的試劑最 終濃度決定了PCR產(chǎn)物與磁珠結(jié)合的片段大小。AMPure XP主要結(jié)合> 100 bp的PCR產(chǎn)物,并丟棄小于50個堿基的引物。較大的引物和引物二聚體可以與磁珠結(jié)合。請確保您的PCR產(chǎn)物在循環(huán)過程中沒有蒸發(fā)導(dǎo)致體積變小,并添加正確體積的試劑(見下表)。確保用乙醇沖洗在混合和結(jié)合過程中樣品有接觸到孔內(nèi)壁的任何地方。如果在純化體系中存在過量的引物,減少該P(yáng)CR反應(yīng)的引物量也可以是一個優(yōu)化的方向。9、下游酶反應(yīng)效果不佳如果您的下游酶反應(yīng)對痕量乙醇極其敏感,請?zhí)砑觾煞昼姷谋J馗稍锊襟E。請注意,大片段會與磁珠緊密結(jié)合,在磁珠完全干燥后可能難以洗脫。10、如何選擇性保留200-500 bp核酸片段AMPure XP是用于PCR產(chǎn)物純化的試劑盒。對于片段篩選的應(yīng)用,請考慮使用 SPRIselect試劑盒。有關(guān) SPRIselect 片篩的更多信息,請訪問經(jīng)典磁珠一文解讀:NGS片段篩選比例計算
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- 2023-05-31 13:01:17【ISCO Webinar】您有公斤級的樣品需要純化嗎?
- 您有公斤級的樣品需要純化嗎?加入我們,快速了解如何運(yùn)行我們的RediSep? 7.0 kg Silica和8.6 kg C18柱。困境:幾百克,甚至幾公斤的樣品需求。解決方案:RediSep 大型色譜柱將幫助您實現(xiàn)目標(biāo)!這些柱子適用于·公斤級的活性藥物成分(API)的純化·天然產(chǎn)品粗提物的初步純化·生產(chǎn)用于染料的熒光探針標(biāo)記、共軛和側(cè)向?qū)游龅膽?yīng)用·多步合成的初始化合物的純化這場 45 分鐘的網(wǎng)絡(luò)研討會由 Teledyne ISCO 應(yīng)用化學(xué)家和色譜專家 Jack Silver 主持,展示了反相和正相分離,加上互動問答,您將了解到:·如何為大型色譜柱開發(fā)方法·如何從小量純化中擴(kuò)大規(guī)?!と绾喂烙嬌V柱的裝填量·如何裝載樣品·如何在非 Teledyne ISCO 制造的系統(tǒng)上使用這些色譜柱無論是新手還是專家,本次網(wǎng)絡(luò)研討會都適合您。想要參加我們的會議,只需選擇您最方便的時間。我們到時見!會議參與時間與參與方式請識別下方二維碼,自行注冊參加:1.北京時間6月1日 20:002.北京時間6月2日 09:00
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- 2020-09-25 16:56:36【邀請函】ISCO制備色譜網(wǎng)絡(luò)研討會
- Teledyne ISCO 9月29日舉辦網(wǎng)絡(luò)研討會,色譜技術(shù)專家Jack Silver將討論如何及何時使用“全波長采集、基線校正和ESLD溫度設(shè)置”來解決困難的應(yīng)用;在45分鐘的內(nèi)容介紹和互動問答環(huán)節(jié)中,與會者將對檢測器設(shè)置的影響以及將其應(yīng)用于復(fù)雜的flash應(yīng)用程序的能力有了新的認(rèn)識。雖然培訓(xùn)內(nèi)容主要關(guān)注Teledyne ISCO快速色譜系統(tǒng)的檢測設(shè)置,但其他品牌的用戶也將會發(fā)現(xiàn)有用的信息。感興趣的同行朋友可選擇合適的時間注冊參加。會議內(nèi)容 調(diào)整檢測方法中幾個關(guān)鍵參數(shù),以提高色譜檢測結(jié)果。還可擴(kuò)大溶劑的選擇范圍,避免洗脫過程中化合物檢測吸收峰飽和情況,以及減少目標(biāo)化合物的損失。在這個先進(jìn)的網(wǎng)絡(luò)研討會這個媒介上,Jack Silver將討論如何以及何時使用“全波長采集、基線校正和ESLD溫度設(shè)置”來解決困難的應(yīng)用。紫外檢測方法波長的選擇,以提高方法的靈敏度基線校正和全波長采集技術(shù)使用全波長收集和基線校正來擴(kuò)大兼容溶劑的范圍提高洗脫的分離度在天然產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)更多未知化合物提高檢測紫外峰和收集化合物餾分對應(yīng)相關(guān)性蒸發(fā)光散射檢測使用溫度設(shè)置來改善化合物收集的技術(shù)不同溶劑的ELSD溫度設(shè)置噴霧室和漂移管設(shè)置,以提高ELSD靈敏度關(guān)于低熔點(diǎn)化合物的ELSD檢測的局限性會議時間及參與方式選擇北京時間9月29日晚20:00-21:00,請點(diǎn)擊下鏈接,自行注冊參加:https://teledyne.zoom.us/webinar/register/WN_hphAyaqjT8S8Zey7L_xJqA 選擇北京時間9月30日早上9:00-10:00,請點(diǎn)擊下鏈接,自行注冊參加:https://teledyne.zoom.us/webinar/register/WN_kxgDXkfYThKC45KvluhH0Q
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