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2025-01-10 10:53:49細(xì)胞的檢測
細(xì)胞的檢測是一種生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，主要用于觀察和研究細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能及生理狀態(tài)。它涵蓋多種檢測方法，如顯微鏡觀察、流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué)分析等。通過顯微鏡觀察，可以直接看到細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)；流式細(xì)胞術(shù)則能對細(xì)胞進(jìn)行定量分析，如細(xì)胞數(shù)量、大小、DNA含量等；細(xì)胞培養(yǎng)可模擬體內(nèi)環(huán)境，研究細(xì)胞的生長、分裂及分化；分子生物學(xué)分析則能深入探究細(xì)胞的基因表達(dá)和調(diào)控機(jī)制。細(xì)胞的檢測在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)及科研等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。

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2025-02-18 14:30:11細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)如何操作？
細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)：革新生命科學(xué)研究的關(guān)鍵工具 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)是生命科學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)重要技術(shù)，它廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究以及藥物開發(fā)等多個(gè)領(lǐng)域。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的功能和精度也在不斷提升，使研究人員能夠更深入地觀察細(xì)胞內(nèi)部的動態(tài)變化、結(jié)構(gòu)特征以及各種生物學(xué)過程。這些系統(tǒng)不僅幫助科學(xué)家更好地理解細(xì)胞行為，還為疾病的早期診斷和方案的制定提供了強(qiáng)有力的支持。本文將詳細(xì)介紹細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的工作原理、應(yīng)用領(lǐng)域及其對生命科學(xué)研究的重要意義。 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的工作原理 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)通過使用顯微技術(shù)，結(jié)合先進(jìn)的成像設(shè)備，能夠捕捉到細(xì)胞內(nèi)部和表面的細(xì)節(jié)。常見的技術(shù)包括熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡和電子顯微鏡等。熒光成像技術(shù)利用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞中的特定分子或結(jié)構(gòu)，能夠清晰地顯示細(xì)胞的各種動態(tài)過程，如蛋白質(zhì)的表達(dá)、細(xì)胞的增殖與死亡等。共聚焦顯微鏡則通過激光掃描技術(shù)獲得高分辨率的細(xì)胞圖像，能夠在更高的放大倍率下獲得更細(xì)致的觀察結(jié)果。 通過這些成像技術(shù)，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)能夠?qū)崟r(shí)捕捉細(xì)胞在不同生理狀態(tài)下的變化。比如，研究人員可以通過成像觀察癌細(xì)胞如何在不同藥物作用下發(fā)生變化，從而幫助篩選出更具的藥物。隨著分辨率和成像速度的不斷提升，現(xiàn)代細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)能夠獲得更加精確的細(xì)胞圖像，甚至可以對活細(xì)胞進(jìn)行長時(shí)間的動態(tài)監(jiān)測。 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的應(yīng)用領(lǐng)域 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)在多個(gè)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，特別是在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中。它在細(xì)胞生物學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用。通過精確觀察細(xì)胞內(nèi)的分子活動，研究人員能夠揭示許多細(xì)胞內(nèi)在的生物學(xué)過程，包括蛋白質(zhì)的定位、細(xì)胞周期的調(diào)控以及細(xì)胞信號傳導(dǎo)等。通過這些研究，科學(xué)家能夠深入了解細(xì)胞的基本功能和機(jī)制。 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)在癌癥研究中的應(yīng)用也尤為突出。通過實(shí)時(shí)觀察腫瘤細(xì)胞的生長和擴(kuò)散過程，科學(xué)家能夠分析腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的差異，進(jìn)而尋找新的靶點(diǎn)進(jìn)行。細(xì)胞成像技術(shù)還在藥物篩選中得到了重要應(yīng)用，通過成像系統(tǒng)觀察藥物對細(xì)胞的影響，幫助篩選出更具和更安全的藥物。 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的未來發(fā)展 隨著技術(shù)的不斷創(chuàng)新，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)在未來將更加、高效。例如，隨著超分辨率成像技術(shù)的發(fā)展，研究人員將能夠觀察到比以往更細(xì)微的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，甚至可能突破傳統(tǒng)顯微技術(shù)的分辨率極限。自動化和人工智能技術(shù)的結(jié)合也將進(jìn)一步提高成像效率和分析準(zhǔn)確性，減少人工干預(yù)，使細(xì)胞成像檢測更加便捷。 在疾病診斷方面，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)的未來也充滿了無限潛力。通過結(jié)合生物標(biāo)志物和成像技術(shù)，研究人員可以實(shí)現(xiàn)更早期的疾病診斷，特別是癌癥、神經(jīng)退行性疾病等疾病的早期篩查，從而提高的成功率。 結(jié)論 細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)作為生命科學(xué)研究中不可或缺的工具，其在細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等領(lǐng)域的應(yīng)用具有重要意義。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，細(xì)胞成像系統(tǒng)的功能和應(yīng)用場景也將不斷擴(kuò)展，推動著生命科學(xué)的發(fā)展。對于未來的醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究，細(xì)胞成像檢測系統(tǒng)必將繼續(xù)發(fā)揮著關(guān)鍵作用，成為揭示生命奧秘的重要手段。
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2025-05-12 19:00:22干涉顯微鏡能看到活細(xì)胞嗎
干涉顯微鏡能看到活細(xì)胞嗎？這一問題在生物學(xué)和細(xì)胞學(xué)研究中有著廣泛的關(guān)注。干涉顯微鏡作為一種先進(jìn)的光學(xué)成像技術(shù)，其高分辨率和非侵入性特點(diǎn)使其在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。本文將探討干涉顯微鏡在觀察活細(xì)胞方面的能力，分析其工作原理、優(yōu)點(diǎn)與局限性，并討論該技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)研究中的實(shí)際應(yīng)用。通過對這一問題的深度解析，讀者將對干涉顯微鏡在活細(xì)胞觀察中的應(yīng)用有更清晰的理解。 什么是干涉顯微鏡？ 干涉顯微鏡是一種通過干涉效應(yīng)增強(qiáng)樣品對比度的顯微鏡。與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡不同，干涉顯微鏡利用相干光源生成干涉圖樣，從而能更清晰地呈現(xiàn)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其動態(tài)過程。它能夠在不使用染料和標(biāo)記物的情況下，通過相位對比增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)細(xì)微結(jié)構(gòu)的可視化效果。這種技術(shù)特別適合觀察生物樣品，尤其是活細(xì)胞，因?yàn)樗粫?xì)胞造成損傷。 干涉顯微鏡對活細(xì)胞的觀察能力 干涉顯微鏡的優(yōu)勢之一是能夠觀察到活細(xì)胞的微觀動態(tài)變化，而無需對細(xì)胞進(jìn)行染色或其他干擾性處理。這使得研究者可以更真實(shí)地捕捉到細(xì)胞在不同生理狀態(tài)下的行為。例如，通過干涉顯微鏡，科學(xué)家可以觀察到活細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器、細(xì)胞分裂、細(xì)胞遷移等過程，而這些在傳統(tǒng)顯微鏡下很難清晰呈現(xiàn)。 干涉顯微鏡的分辨率通?？梢赃_(dá)到納米級，能夠揭示細(xì)胞結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化，進(jìn)一步提高了活細(xì)胞成像的精確性。這對于細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究具有重要意義，尤其是在研究細(xì)胞疾病、細(xì)胞等領(lǐng)域時(shí)。 干涉顯微鏡的優(yōu)勢與局限性 干涉顯微鏡在活細(xì)胞觀察中的一個(gè)主要優(yōu)勢是其非侵入性。傳統(tǒng)的顯微鏡通常需要對細(xì)胞進(jìn)行染色處理，這可能會影響細(xì)胞的正常生理活動。而干涉顯微鏡通過不接觸樣品的方式，能夠?qū)崟r(shí)觀察細(xì)胞內(nèi)的變化而不會對細(xì)胞造成直接影響。因此，這項(xiàng)技術(shù)成為了觀察活細(xì)胞、追蹤細(xì)胞動態(tài)過程的理想工具。 干涉顯微鏡也存在一定的局限性。由于其依賴于光波干涉的原理，這就要求顯微鏡系統(tǒng)的精度非常高，尤其是對光源的控制要求十分苛刻。干涉顯微鏡更適用于透明或半透明的樣品，對于不透明或高度復(fù)雜的樣本，其成像效果可能受到一定限制。干涉顯微鏡的操作和數(shù)據(jù)分析相對復(fù)雜，要求研究者具有一定的技術(shù)背景和經(jīng)驗(yàn)。 干涉顯微鏡在生物學(xué)研究中的應(yīng)用 干涉顯微鏡在生命科學(xué)中有著廣泛的應(yīng)用。例如，在癌癥研究中，研究者利用干涉顯微鏡觀察癌細(xì)胞的動態(tài)變化，探索其與正常細(xì)胞的差異。在神經(jīng)科學(xué)中，干涉顯微鏡能夠幫助科學(xué)家實(shí)時(shí)觀察神經(jīng)元的活動和突觸的變化，為研究大腦功能和疾病提供重要線索。該技術(shù)還被廣泛用于藥物篩選、細(xì)胞藥理學(xué)研究和臨床醫(yī)學(xué)檢測等領(lǐng)域。 結(jié)論 干涉顯微鏡在觀察活細(xì)胞方面具備巨大的潛力和優(yōu)勢。它不僅能提供高分辨率的細(xì)胞圖像，而且不會對細(xì)胞產(chǎn)生任何干擾或損傷。盡管在操作上有一定的技術(shù)難度和局限性，但隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和改進(jìn)，干涉顯微鏡無疑將成為生命科學(xué)領(lǐng)域研究的核心工具之一。因此，干涉顯微鏡在活細(xì)胞觀察中的應(yīng)用前景廣闊，值得繼續(xù)深入探索與應(yīng)用。
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2025-01-13 17:45:14自動細(xì)胞接種儀使用方法有哪些？
自動細(xì)胞接種儀使用方法：提升實(shí)驗(yàn)效率與精確度 在現(xiàn)代生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室工作的核心之一。而自動細(xì)胞接種儀作為一種高效的實(shí)驗(yàn)工具，已被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)過程中，極大地提升了實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性。本篇文章將詳細(xì)介紹自動細(xì)胞接種儀的使用方法、注意事項(xiàng)以及其在實(shí)際應(yīng)用中的優(yōu)勢，幫助廣大科研人員更好地掌握其操作技巧，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。 一、自動細(xì)胞接種儀的基本原理 自動細(xì)胞接種儀通過機(jī)械化、自動化的方式來實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的接種。其原理是通過設(shè)定好細(xì)胞接種的時(shí)間、數(shù)量、培養(yǎng)皿規(guī)格等參數(shù)，儀器自動將細(xì)胞液均勻地分配到各個(gè)培養(yǎng)皿中。這一過程不僅大大節(jié)省了實(shí)驗(yàn)人員的時(shí)間，還能有效避免人為操作誤差，提高細(xì)胞接種的均勻性與重復(fù)性。自動細(xì)胞接種儀主要通過吸取細(xì)胞懸液、精確計(jì)量并將其精確分配到培養(yǎng)皿內(nèi)，確保每次接種的細(xì)胞數(shù)目和分布更加均勻。 二、自動細(xì)胞接種儀的使用步驟 準(zhǔn)備工作 在使用自動細(xì)胞接種儀之前，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)首先準(zhǔn)備好所需的培養(yǎng)皿、細(xì)胞懸液和培養(yǎng)基。確保儀器的各個(gè)部件清潔，避免交叉污染。還需檢查儀器的設(shè)置，確認(rèn)設(shè)備已連接電源并啟動。 設(shè)置參數(shù) 自動細(xì)胞接種儀的操作界面一般為觸摸屏，用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置細(xì)胞接種的相關(guān)參數(shù)。這些參數(shù)包括每個(gè)培養(yǎng)皿中的接種細(xì)胞數(shù)、接種的細(xì)胞量（通常以細(xì)胞數(shù)或細(xì)胞密度為單位）、每次接種的時(shí)間間隔等。 接種操作 設(shè)置完參數(shù)后，啟動儀器進(jìn)行接種操作。儀器會自動吸取細(xì)胞懸液，通過設(shè)定的吸管或分配裝置，將細(xì)胞均勻接種到各個(gè)培養(yǎng)皿中。在整個(gè)過程中，儀器會實(shí)時(shí)監(jiān)控接種的進(jìn)度，并根據(jù)設(shè)置的程序進(jìn)行調(diào)整。 結(jié)束與清潔 接種完成后，儀器會發(fā)出提示音，通知用戶操作結(jié)束。接著，用戶可以取出已接種的培養(yǎng)皿，放入適宜的培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)行孵育。儀器的各個(gè)部分需要按照規(guī)定進(jìn)行清潔和消毒，以避免細(xì)胞殘留物的堆積。 三、自動細(xì)胞接種儀的優(yōu)勢 提高實(shí)驗(yàn)效率 自動細(xì)胞接種儀能顯著減少人工操作時(shí)間，提高工作效率。尤其是在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，儀器能夠快速、地完成接種任務(wù)，節(jié)省大量的人工成本。 減少人為誤差 人為操作往往會導(dǎo)致細(xì)胞接種不均勻或細(xì)胞數(shù)量偏差。使用自動細(xì)胞接種儀后，接種過程可以嚴(yán)格按照設(shè)定的參數(shù)進(jìn)行，減少了操作中的不確定性和誤差，保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。 提高接種精度 自動細(xì)胞接種儀能夠精確控制細(xì)胞接種的數(shù)量和分布，尤其適用于需要高度精確的實(shí)驗(yàn)，如高通量篩選、藥物測試等領(lǐng)域。儀器的高精度控制確保每個(gè)培養(yǎng)皿中的細(xì)胞數(shù)目均勻，避免了因細(xì)胞數(shù)量不一致而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的情況。 四、使用自動細(xì)胞接種儀的注意事項(xiàng) 定期保養(yǎng)與維護(hù) 自動細(xì)胞接種儀的長期穩(wěn)定運(yùn)行需要定期進(jìn)行維護(hù)。用戶應(yīng)根據(jù)設(shè)備手冊的要求，對儀器進(jìn)行定期清潔、校準(zhǔn)和檢修，確保儀器的性與穩(wěn)定性。 注意環(huán)境控制 盡管自動細(xì)胞接種儀可以減少人為因素的干擾，但細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的控制依然至關(guān)重要。接種前，應(yīng)確保培養(yǎng)環(huán)境無污染，接種后及時(shí)將培養(yǎng)皿放入適宜的溫度、濕度和二氧化碳濃度環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。 操作人員培訓(xùn) 盡管自動細(xì)胞接種儀具有較高的自動化程度，但操作人員仍需接受專業(yè)培訓(xùn)，熟悉儀器的操作流程、參數(shù)設(shè)置及注意事項(xiàng)，以確保設(shè)備的高效運(yùn)轉(zhuǎn)和實(shí)驗(yàn)的成功。 結(jié)語 自動細(xì)胞接種儀為現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)提供了、高效的解決方案，已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究以及藥物開發(fā)中的重要工具。通過合理的參數(shù)設(shè)置和正確的操作方法，科研人員能夠更好地提升實(shí)驗(yàn)的效率與精度。掌握其使用方法，不僅能降低人工操作的風(fēng)險(xiǎn)，還能為細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)帶來更加可控和可靠的結(jié)果。
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2023-08-10 09:32:25倒置熒光顯微鏡下的免疫熒光細(xì)胞
倒置熒光顯微鏡下的免疫熒光細(xì)胞：探索微觀世界的奧秘顯微鏡觀察免疫熒光細(xì)胞是一種重要的實(shí)驗(yàn)方法，用于研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等成分的表達(dá)、功能和相互作用，目前，免疫熒光顯微鏡已經(jīng)成為生物學(xué)研究中不可或缺的工具之一。在倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞時(shí)，需要選擇合適的顯微鏡參數(shù)，以確保觀察的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。例如，光源的種類、顯微鏡的分辨率、物鏡放大倍數(shù)和熒光通過率等因素。此外，在進(jìn)行免疫熒光顯微鏡觀察細(xì)胞時(shí)，需要選擇合適的熒光強(qiáng)度和熒光顏色，以避免對觀察結(jié)果的干擾。倒置熒光顯微鏡MF52-N采用無限遠(yuǎn)光學(xué)設(shè)計(jì)和數(shù)顯LED熒光模塊，光路經(jīng)過深度優(yōu)化，能提供簡單易用的熒光激發(fā)和高質(zhì)量的相襯、熒光和明場成像，可選雙光路、一體供電、人走燈滅，廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物制藥、醫(yī)療檢測等領(lǐng)域。免責(zé)聲明本站無法鑒別所上傳圖片、字體或文字內(nèi)容的版權(quán)，如無意中侵犯了哪個(gè)權(quán)利人的知識產(chǎn)權(quán)，請來信或來電告之，本站將立即予以刪除，謝謝。 來源：https://www.mshot.com/article/1810.html
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2022-08-09 15:01:18ibidi實(shí)驗(yàn)方案|腫瘤細(xì)胞2D侵襲檢測方案
AnielloFederico*,JochenUtikalSkinCancerUnit,GermanCancerResearchCenter(DKFZ),69120Heidelberg,Germany.*Correspondingauthor.E-mailaddress:a.federico@dkfz-heidelberg.de為了研究腫瘤微環(huán)境影響下腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動性和侵襲特性，建立了體外2D侵襲方案。這種2D侵襲方案是一種共培養(yǎng)試驗(yàn)，在這種情況下，是由腫瘤和基質(zhì)細(xì)胞（例如成纖維細(xì)胞）組成的。一旦兩種細(xì)胞類型接觸，在不同的條件下評估侵襲成纖維細(xì)胞單層的腫瘤細(xì)胞的數(shù)量，在我們的研究中，我們在模擬實(shí)體腫瘤微環(huán)境中發(fā)現(xiàn)的條件，例如與基質(zhì)細(xì)胞（成纖維細(xì)胞）的相互作用以及成纖維細(xì)胞釋放的可溶性因子（Nnetu等，2012）。我們使用A375黑色素瘤細(xì)胞系和真pi成纖維細(xì)胞進(jìn)行了此測定。黑色素瘤細(xì)胞激活成纖維細(xì)胞，繼而維持腫瘤細(xì)胞的生長，惡性轉(zhuǎn)化和耐藥性（Flach等，2011）。然而，在刺激所測試的抗ai化合物后，我們發(fā)現(xiàn)與成纖維細(xì)胞直接接觸的黑素瘤細(xì)胞顯示出運(yùn)動能力受損并且未能侵襲成纖維細(xì)胞層。材料和試劑1. GFP-A375細(xì)胞系（ATCC）2. 番茄皮成纖維細(xì)胞（從健康患者中分離）3. MEF細(xì)胞培養(yǎng)基4.PBS（Sigma-Aldrich；D8537）5.胰蛋白酶-EDTA溶液（Sigma-Aldrich；T3924）6. 臺盼藍(lán)溶液（Sigma-Aldrich;93595）7.DMSO（CarlRoth;A994.2），在0.1％最終濃度下使用8.MithramycinA（BioTrend；10-2085-5mg），在300nm濃度下使用，用DMSO稀釋儀器設(shè)備1. 層流凈化罩2. 12/24孔多孔板（GreinerBio-One）3. 臺式離心機(jī)4. 細(xì)胞計(jì)數(shù)器5. 2孔插件（ibidi: 80209）/預(yù)置2孔插件培養(yǎng)皿（ibidi:81176）6.細(xì)胞培養(yǎng)管7. 渦旋8. 鑷子9. 光學(xué)顯微鏡10. 熒光顯微鏡11. NIS-Elements軟件ibidi:81176實(shí)驗(yàn)流程01. 將GFP-A375和番茄成纖維細(xì)胞系穩(wěn)定地保存在MEF培養(yǎng)基中，在37°C和5%C02加濕培養(yǎng)箱中。02. 當(dāng)細(xì)胞達(dá)到亞融合度（約80％融合度）時(shí)，在帶有PBS的通風(fēng)櫥中清洗它們，以去除死細(xì)胞和碎片。03. 在培養(yǎng)箱中用胰蛋白酶-EDTA溶液胰蛋白酶消化細(xì)胞約5分鐘，然后添加MEF培養(yǎng)基以阻止反應(yīng)。04. 將細(xì)胞懸浮液收集在15ml細(xì)胞培養(yǎng)管中，并用臺式離心機(jī)（1500xg,5′,RT）短暫離心。05. 將細(xì)胞重新懸浮在新鮮培養(yǎng)基中；將一體積的細(xì)胞懸液與另一體積的臺盼藍(lán)溶液混合，用細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)活細(xì)胞。06. 在MEF緩沖液中以4x105細(xì)胞/ml的濃度稀釋細(xì)胞。07. 在多孔板上，在每個(gè)孔的中間放置一個(gè)Culture-Insert2孔（2孔培養(yǎng)插件）。08. 用75μl（3x104細(xì)胞）FP-A375細(xì)胞填充插入物一側(cè)，并用番茄成纖維細(xì)胞填充另一側(cè)。用移液器上下混合插入物中的細(xì)胞，以確保細(xì)胞完全分布。09. 將多孔板放在培養(yǎng)箱中，放置過夜。10. 第二天，在鑷子的幫助下，小心地從每孔中取出培養(yǎng)基和插件，并用PBS清洗。11. 小心除去PBS，然后加入新鮮的MEF培養(yǎng)基。12. 用光學(xué)顯微鏡檢查GPF-A375與Tomto成纖維細(xì)胞之間產(chǎn)生的間隙的閉合狀態(tài)。13. 一旦每個(gè)孔中的間隙完全閉合，請使用熒光顯微鏡和成像軟件獲取熒光圖像。確保腫瘤細(xì)胞尚未侵入成纖維細(xì)胞單層。14. 小心地除去培養(yǎng)基，并在控制組孔中添加培養(yǎng)基+0.1％PBS，在處理組孔中添加培養(yǎng)基+300nM絲裂霉素A。將板放在培養(yǎng)箱中24小時(shí)（處理孵育時(shí)間）。24小時(shí)后，在熒光顯微鏡下重新采集共培養(yǎng)孔，以評估治療組與對照組（綠色熒光細(xì)胞散布在紅色標(biāo)記層上）的腫瘤細(xì)胞侵襲行為的任何變化（圖2）。圖1：2D侵襲系統(tǒng)的示意圖圖2：2D侵襲檢測的熒光圖像將黑素瘤細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)，然后暴露于300nmMithramycinA（或DMSO）。24小時(shí)后，評估侵襲成纖維細(xì)胞層的腫瘤細(xì)胞的數(shù)目。A375細(xì)胞顯示出大規(guī)模的侵襲行為，受到MithramycinA治療的損害。比例尺：500μm。備注：1.此處描述了MEF培養(yǎng)基組成（參考文獻(xiàn)1）。2.此文僅供參考。3.此實(shí)驗(yàn)方案來自ibidi的實(shí)際用戶，更多詳情可聯(lián)系本文作者。參考文獻(xiàn)：1.MithramycinAandmithralogEC-8042inhibitSETDB1expressionanditsoncogenicactivityinmalignantmelanoma. FedericoA,SteinfassT,LarribèreL,NovakD,MorísF,Nú?ezLE,UmanskyV,UtikalJ.MolelucarTherapy-Oncolytics2020;doi: https://doi.org/10.1016/j.omto.2020.06.001 (Methoddescribedinthisprotocolwasincludedinthispublishedarticle).2.Theimpactofjammingonboundariesofcollectivelymovingweak-interactingcells. NnetuKD,KnorrM,K?sJ,ZinkM.NewJournalofPhysics2012;doi:https://doi.org/10.1088%2F1367-2630%2F14%2F11%2F1150123.Fibroblastscontributetomelanomatumorgrowthanddrugresistance. FlachEH,RebeccaVW,HerlynM,SmalleyKS,AndersonAR.Molecular pharmaceutics2011;doi:10.1021/mp200421k
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