一核酸分子雜交概念及原理 概念：核酸分子雜交是根據(jù)堿基互補(bǔ)原理，應(yīng)用已知序列的分子探針檢測待測單鏈核酸片段堿基序列的分子生物學(xué)技術(shù)，目前廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)生物化學(xué)病毒檢測疾病診斷基因工程等學(xué)科領(lǐng)域中 原理：核酸的Walson-Crick堿基互補(bǔ)配對原則（即A=T,GC） 二核酸分子雜交技術(shù)的分類 核酸分子雜交技術(shù)可按雜交環(huán)境分為固相雜交和液相雜交兩大類 1固相雜交 固相雜交即先將待測單鏈核酸樣品結(jié)合到支持物（常用有硝酸纖維素濾膜尼龍膜化學(xué)活化膜等）上，然后與溶液中的已知序列的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交 固相雜交的特點(diǎn)：固相雜交后，未雜交的游離片段易除去，從而使膜上留下的雜交分子較易檢測，并可有效避免靶DNA自我復(fù)性故固相雜交技術(shù)Z為常用 常用的固相雜交類型有：菌落原位雜交斑點(diǎn)雜交狹縫雜交Southern印跡雜交Northern印跡雜交組織原位雜交和夾心雜交等 2液相雜交 液相雜交是指待測核酸和探針都存在于雜交液中，探針于待測核酸在液體環(huán)境中按照堿基互補(bǔ)配對形成雜交分子的過程液相雜交是研究Z早的雜交類型，但應(yīng)用的普遍程度較固相雜交為低 液相雜交的特點(diǎn)：無需支持物待測核酸分子不用固定在支持物上其弊端是由于雜交后過量的未雜交探針存在于溶液中，在已有雜交結(jié)合物檢測水平條件下檢測誤差較高故液相雜交在過去較少應(yīng)用近年來由于雜交檢測技術(shù)的不斷進(jìn)步，商業(yè)檢測試劑盒的開發(fā)等液相雜交技術(shù)得到了迅速發(fā)展 常用的液相雜交類型有：吸附雜交發(fā)光液相雜交液相夾心雜交復(fù)性速率液相分子雜交 附：原位分子雜交簡單介紹 原位分子雜交實(shí)際上是固相雜交中的一種形式，雜交過程中待測DNA處于未經(jīng)抽提的染色體之上，并在原位置上被變性成單鏈，與探針進(jìn)行分子雜交 原位分子雜交與其他雜交技術(shù)主要區(qū)別在于待測堿基序列位于染色體上其主要特點(diǎn)是可以準(zhǔn)確定位目的DNA在染色體上的位置因此在分子遺傳學(xué)研究癌基因定位遺傳性疾病臨床診斷方面具有重要而廣泛應(yīng)用 領(lǐng)成TC-4YY dna分子雜交儀 分子雜交箱 技術(shù)參數(shù)