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應(yīng)用方案

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茶氨酸 (L-Theanine) 是茶葉中特有的游離氨基酸。茶氨酸在化學(xué)構(gòu)造上與腦內(nèi)活性物質(zhì)谷酰胺、谷氨酸相似,是茶葉中生津潤(rùn)甜的主要成份。茶氨酸含量因茶的品種、部位而變動(dòng),在干茶中占重量的1%-2%。

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 23193-2017中規(guī)定了用GX液相色譜法測(cè)定茶葉中茶氨酸含量的方法。

本應(yīng)用參照上述國(guó)標(biāo),采用C18柱TSKgel ODS-100V (4.6mmI.D.×25cm, 5μm) 對(duì)茶氨酸進(jìn)行了定量分析,并作標(biāo)準(zhǔn)曲線,其線性關(guān)系良好,可滿足GB/T 23193-2017中的要求。

溶液配制

① 色譜流動(dòng)相配制:水, 100%乙腈

② 標(biāo)準(zhǔn)曲線配制:稱取少量L-茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品, 用水溶解并稀釋至0.01 mg/mL, 0.02 mg/mL, 0.5 mg/mL, 0.1 mg/mL, 0.15 mg/mL, 0.2 mg/mL。

③ 待測(cè)樣品配制:稱取0.1 g左右茶葉, 加入10 mL水, 100 ℃水浴浸提30 min, 經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣。

分析條件

儀器:Thermo Ultimate 3000  

色譜柱:TSKgel ODS-100V (4.6 mm I.D.×25 cm, 5 μm)

流速:0.8 mL/min

柱溫:35 ℃

樣品盤溫度:10 ℃

進(jìn)樣量:20 μL

檢測(cè)器:UV@210 nm

梯度:

20210427-1570934454.png

分析結(jié)果

圖1. 茶氨酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線.png

圖1. 茶氨酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2. 茶葉提取液的色譜圖.png

圖2. 茶葉提取液的色譜圖

20210427-1600428140.png

茶葉實(shí)際稱重0.1054 g,加水10.6023 g,根據(jù)提取液中峰面積數(shù)值,計(jì)算得提取液中茶氨酸的濃度為0.1212 mg/mL,則茶葉中茶氨酸的含量為1.219%。

標(biāo)簽:高效液相色譜法茶氨酸C18柱

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