法:把培養(yǎng)細胞置于4條件下6~12小時后,再于37溫箱繼續(xù)培養(yǎng)6~10小時處理(加秋水仙素)
3.采集分裂細胞:可利用分裂中期細胞體變圓與底物附著不牢特點,此時手持培養(yǎng)瓶,左右反復橫向水平搖動,令培養(yǎng)液在培養(yǎng)細胞表面反復沖刷應用此法可使90%的中期分裂細胞從瓶壁脫落,注意勿用力過猛,以防多量非分裂細胞脫落影響觀察
4.離心:收集培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5~10分鐘
5.低滲處理:吸除上清液加入預溫至37的0.075M KCl溶液,在溫箱中靜置20~30分鐘
6.預固定:向懸液中加新鮮1:3醋酸甲醇固定液1ml,用吸管吹打調(diào)勻,此措施能起到先使細胞表面 TXD3細胞涂片離心機
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