糖基化和PEGYlated是蛋白質變型Z流行的形式前者是接上糖,后者接上聚乙二醇絞合線作須晶,以增加蛋白質的半衰期并使其不大可能從血液中水解或被排除本應用簡報證實對于PEGYlated蛋白質由一次15分鐘色譜實驗可以得到巨大數(shù)量的信息圖示完全說明miniDAWN與HPLC系統(tǒng)連接的結合能力由SEC/MALLS分析得出Z重要的結論是:
1. 蛋白質-聚乙二醇-蛋白質連接
因為已知蛋白質僅含8個可能的部位與PEG連接,蛋白質與聚乙二醇結合的Zda摩爾質量為56K;蛋白質加聚乙二醇(8 x 5K)為16K但是,ASTRA軟件測定該復合物摩爾質量高達100K,這表明存在蛋白質-聚乙二醇-蛋白質復合物這些出乎預料的復合物可能對該樣品的藥理性質發(fā)生引入注目的影響
2. PEGYlated的程度
因為miniDAWN的摩爾質量是值,不須做PEG-蛋白質產品構象的假設即可測定PEGYlation程度
3. 聚集物檢測
低濃度但非常粘稠的(Rg<10nm)非常高摩爾質量(--500K)的物質在大約8ml洗脫顯然,這些聚集物與任何其它范圍樣品相比散射更多的光由于FDA涉及周圍聚集物,在患者中可能產生緩慢響應,在臨床試驗之前這些聚集物已被清除用miniDAWN監(jiān)測蛋白質聚集的減少對蛋白質改型工藝是有幫助的
4.反應程度
根據(jù)未反應PEG的濃度,可以測定PEGYlation反應的程度這一信息可用于改進反應過程,改善產品配方效果
參與評論
登錄后參與評論