引言

氨基酸作為多肽與蛋白質的基本構成單元，在醫(yī)藥研發(fā)、食品質控、生物科研、飼料檢測等領域應用廣泛且關鍵。然而其兼具酸堿性基團、極性強、沸點高、紫外末端吸收弱的固有特性，使其成為常規(guī)液相/氣相分析中的技術難點。實現(xiàn)氨基酸的精準定量、組成解析及雜質篩查，是現(xiàn)代實驗室分析工作的核心目標。安捷倫深耕分析技術，推出氨基酸全方位分析解決方案，覆蓋反相在線柱前衍生、HILIC、手性拆分、衍生化氣相色譜等多元技術，全方位滿足不同檢測需求。本文將聚焦三大核心液相分析方案，為您深度剖析技術精髓。

反相在線柱前衍生方案

原理

利用 Agilent 1260/1290 自動進樣器的程序進樣功能，分別吸取樣品和衍生試劑（OPA 和 FMOC），在定量環(huán)中進行自動化衍生操作，生成具有疏水性和紫外或熒光吸收的氨基酸衍生產(chǎn)物，再通過AdvanceBio AAA 色譜柱進行反相分離（中國藥典 2025 四部通則 9120），常用 VWD，DAD 或 FLD 檢測器。

特點和優(yōu)勢

在線自動衍生，減少手動操作誤差，重現(xiàn)性好

操作簡便，可實現(xiàn)批量分析，提高分析效率

良好的分離度，峰形和高靈敏度，方法耐用

從標準品，衍生試劑，到色譜柱和應用支持的完善單一供應商解決方案

應用

廣泛應用于氨基酸原料、復方氨基酸制劑、生物樣品、多肽或蛋白質水解產(chǎn)物、細胞培養(yǎng)基等樣品中的氨基酸組成和/或含量分析。符合中國藥典 2025 四部 9120（柱前 OPA 和 FMOC 衍生氨基酸測定法）。

典型譜圖

圖 1. 使用氨基酸分析方法和具有不同內(nèi)徑的 Agilent AdvanceBio AAA 色譜柱分離 AA 標準品

色譜柱和試劑盒配置

直接進樣分析 - HILIC 方案

原理

氨基酸化合物極性強，在 HILIC 模式下有良好的保留。兩性離子型的 Poroshell HILIC-Z 色譜柱對氨基酸有良好分離和峰形。氨基柱也可以用于氨基酸分析，屬于 HILIC 分離模式。

檢測器

MSD 、ELSD、 VWD、 DAD 等

特點和優(yōu)勢

無需衍生操作，直接進樣進行分析；具有與傳統(tǒng)反相液相色譜類似的工作流程；尤其使用 HILIC-Z 色譜柱時，兼容所有的檢測器。

應用

氨基酸含量和有關物質分析、復雜基質中的氨基酸（如門冬氨酸鳥氨酸）分析（如細胞培養(yǎng)或發(fā)酵過程監(jiān)測，白酒，飼料，植物基質中的氨基酸檢測）。

典型譜圖

色譜柱推薦

DL 氨基酸手性分析方案

原理

使用糖肽類抗生素（替考拉寧或萬古霉素）鍵合硅膠進行 DL 氨基酸分離

檢測器

ELSD、 MSD、 CAD、 VWD、 DAD 等

特點和優(yōu)勢

方法簡單，對保護氨基酸也有良好分離能力

應用

氨基酸和保護氨基酸的 DL 雜質分析

典型譜圖

色譜柱推薦

Poroshel Chiral T 和 V 柱也適合做多肽（GLP-1）的 DL 消旋體分析。

掃碼獲取氨基酸分析色譜柱選擇卡

標簽：安捷倫