在“2035 年遠(yuǎn)景目標(biāo)綱要”聚焦生物育種的政策東風(fēng)下,育種技術(shù)正朝著高精度、高通量、多組學(xué)融合的方向加速升級(jí)。
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在“2035 年遠(yuǎn)景目標(biāo)綱要”聚焦生物育種的政策東風(fēng)下,育種技術(shù)正朝著高精度、高通量、多組學(xué)融合的方向加速升級(jí)。安捷倫整合代謝組學(xué)、元素分析、細(xì)胞成像、核酸分析等核心技術(shù),打造覆蓋生物育種核心流程的多組學(xué)解決方案。

圖 1. 安捷倫多組學(xué)綜合解決方案
細(xì)胞作為性狀表達(dá)的基本單元,其代謝狀態(tài)、表型特征、功能差異直接決定育種方向。安捷倫整合實(shí)時(shí)細(xì)胞代謝分析、細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、微孔板檢測(cè)等核心技術(shù),打造覆蓋全鏈條細(xì)胞分析解決方案,加速優(yōu)質(zhì)品種培育進(jìn)程。

圖 2. 安捷倫細(xì)胞分析整體解決方案
一、實(shí)時(shí)細(xì)胞代謝分析:Seahorse 解鎖能量代謝密碼,預(yù)判育種潛力
作物抗逆性、畜禽產(chǎn)仔性能、種子萌發(fā)率等關(guān)鍵性狀,本質(zhì)上與細(xì)胞能量代謝密切相關(guān)。安捷倫 Seahorse 實(shí)時(shí)細(xì)胞代謝分析儀通過(guò)檢測(cè)氧消耗速率(OCR)和胞外酸化速率(ECAR),實(shí)時(shí)量化線(xiàn)粒體呼吸與糖酵解活性,為育種篩選提供 “能量維度” 的精準(zhǔn)依據(jù)。
在一項(xiàng)對(duì)模式植物擬南芥的生長(zhǎng)代謝研究中[1],發(fā)現(xiàn)琥珀酸脫氫酶裝配因子 2(SDHAF2)的缺失會(huì)導(dǎo)致線(xiàn)粒體復(fù)合物 II 活性下降,根伸長(zhǎng)受阻,明確其對(duì)植物生長(zhǎng)的關(guān)鍵作用;在砷脅迫實(shí)驗(yàn)中,谷氧還蛋白 S15 突變體的 OCR 顯著降低,證實(shí)其通過(guò)調(diào)控線(xiàn)粒體 Fe-S 簇轉(zhuǎn)移影響砷耐受性,為抗逆品種篩選提供代謝靶點(diǎn)。Seahorse 實(shí)時(shí)細(xì)胞代謝分析儀通過(guò)檢測(cè)氧消耗速率(OCR),量化了擬南芥根尖細(xì)胞的線(xiàn)粒體呼吸活性。

圖 3. SDHAF2 缺失突變體根尖細(xì)胞的線(xiàn)粒體呼吸活性檢測(cè)(OCR 分析)
實(shí)時(shí)細(xì)胞代謝分析在動(dòng)物育種研究中也起到重要作。如一項(xiàng)母豬產(chǎn)仔數(shù)關(guān)聯(lián)分析中[2],通過(guò)對(duì) 807 頭母豬的線(xiàn)粒體單倍型與代謝特征進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)高產(chǎn)單倍型對(duì)應(yīng)的細(xì)胞線(xiàn)粒體呼吸活性更高,證實(shí)線(xiàn)粒體單倍型可作為產(chǎn)仔性能選育的候選標(biāo)記,提前預(yù)判育種潛力。

圖 4. 具有不同線(xiàn)粒體單倍型的豬耳原代成纖維細(xì)胞(左圖)和胞質(zhì)雜種(右圖)的 OCR 水平
二、細(xì)胞成像:Cytation 可視化表型差異,精準(zhǔn)篩選優(yōu)良個(gè)體
傳統(tǒng)育種表型篩選依賴(lài)肉眼觀察和經(jīng)驗(yàn)判斷,主觀性強(qiáng)、效率低下。安捷倫 Cytation 系列細(xì)胞成像系統(tǒng)整合共聚焦、正倒置熒光、明場(chǎng)等 7 種成像模式,實(shí)現(xiàn)從細(xì)胞到組織的全方位可視化,讓表型差異 “數(shù)據(jù)化” 呈現(xiàn)。該平臺(tái)已經(jīng)積累了豐富的植物/動(dòng)物成像方案,如考種、根分生組織蛋白表達(dá)、根部鈣離子檢測(cè)、維管束縱切面、原生質(zhì)體蛋白/蛋白互作等。
在一項(xiàng)驗(yàn)證水稻雄性育性研究中[3],利用 Cytation 對(duì)水稻花粉進(jìn)行多維度染色成像,清晰觀察花粉外壁完整性、內(nèi)壁結(jié)構(gòu)、細(xì)胞核形態(tài)及 ROS 分布,驗(yàn)證了黃酮類(lèi)化合物對(duì)雄性可育的不可或缺性,快速淘汰育性缺陷株系。

圖 5. 水稻野生型 WT1 與 oschs1 純合突變體的花粉染色成像表型
在一項(xiàng)排卵機(jī)制研究中[4],利用 Cytation 實(shí)時(shí)記錄卵泡排卵過(guò)程,提出 “壁顆粒細(xì)胞層硬化” 新概念,清晰觀察到硬化的顆粒層可防止排卵后細(xì)胞逃逸,為優(yōu)化畜禽繁殖性能育種提供細(xì)胞學(xué)依據(jù)。

圖 6. 野生型(左圖)和突變體(右圖)的卵泡排卵過(guò)程
三、流式細(xì)胞術(shù):NovoCyte 高通量分選,精準(zhǔn)鎖定目標(biāo)細(xì)胞
在基因編輯篩選、倍體鑒定、細(xì)胞功能驗(yàn)證等場(chǎng)景中,流式細(xì)胞術(shù)的高通量?jī)?yōu)勢(shì)不可或缺。安捷倫 NovoCyte 系列流式細(xì)胞儀以多激光、多色檢測(cè)能力,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞層面的快速分析,覆蓋植物、動(dòng)物育種核心需求。
流式細(xì)胞儀的常見(jiàn)應(yīng)用場(chǎng)景是倍體的快速鑒定。如流式細(xì)胞術(shù)可在幾分鐘內(nèi)區(qū)分二倍體與四倍體連翹[5],通過(guò)熒光強(qiáng)度峰值差異直接判定倍性,適合大規(guī)模雜交后代篩選,避免倍性混雜導(dǎo)致的育種失敗。

圖 7. 二倍體和四倍體連翹流式鑒定
在動(dòng)物育種場(chǎng)景中,流式方法學(xué)可以用于評(píng)估精子質(zhì)量。如在在公羊育種研究中[6],通過(guò)熒光染料染色結(jié)合流式檢測(cè),同時(shí)分析精子質(zhì)膜完整性、頂體狀態(tài)、線(xiàn)粒體膜電位和 DNA 損傷程度,全面評(píng)估精子質(zhì)量,將人工授精成功率提升 30% 以上。

圖 8. 質(zhì)膜和頂體完整性及線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)
四、微孔板檢測(cè):Synergy 高通量生化分析,加速性狀篩選
育種過(guò)程中,抗逆酶活性、內(nèi)源激素含量、抗體水平等生化指標(biāo)是性狀篩選的核心依據(jù)。安捷倫 Synergy 系列多功能微孔板檢測(cè)系統(tǒng)支持吸收光、熒光、發(fā)光等多種檢測(cè)模式,實(shí)現(xiàn)高通量定量分析,大幅提升篩選效率。
在一項(xiàng)對(duì)紅麻耐鎘品種篩選的研究中[7],利用 Synergy H1 檢測(cè)幼苗 SOD、POD、CAT 三種抗氧化酶活性,發(fā)現(xiàn) NH4+-N 處理組的酶活性顯著高于其他氮源處理,從而明確該氮源可增強(qiáng)紅麻耐鎘能力,為耐重金屬品種培育提供快速篩選方法。

圖 9. 氮素對(duì)鎘脅迫下紅麻葉片中 SOD、POD、CAT 活性及脯氨酸含量的影響
在一項(xiàng)解析芷江鴨脂肪代謝的研究中[8],通過(guò) Synergy 2 配合 ELISA 試劑盒,檢測(cè)血清中胰島素樣生長(zhǎng)因子 1(IGF-1)和胰島素樣生長(zhǎng)因子 2(IGF-2)濃度,發(fā)現(xiàn)膽汁酸可通過(guò)上調(diào)這兩種因子的表達(dá),促進(jìn)脂肪代謝與骨骼肌發(fā)育,為優(yōu)質(zhì)肉鴨品種選育提供生化依據(jù)。

圖 10. 不同飲食處理下鴨子的骨骼肌發(fā)育指標(biāo)
結(jié)語(yǔ)
從作物抗逆與營(yíng)養(yǎng)改良,到畜禽品質(zhì)提升,安捷倫細(xì)胞分析技術(shù)以 “精準(zhǔn)量化、高通量篩選、全場(chǎng)景適配” 的核心優(yōu)勢(shì),成為生物育種的 “效率加速器”。未來(lái),安捷倫將持續(xù)深化多組學(xué)整合創(chuàng)新,用更先進(jìn)的細(xì)胞分析技術(shù),助力育種家攻克核心難點(diǎn)。
參考文獻(xiàn)
[1] https://doi.org/10.1111/tpj.12041
[2] https://doi.org/10.3389/fgene.2020.579382
[3] https://doi.org/10.1093/jxb/eraa204
[4] https://doi.org/10.1002/advs.202403640
[5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37562202
[6] https://www.mdpi.com/2076-2615/13/7/1200
[7] https://doi.org/10.3390/plants12234067
[8] https://doi.org/10.1016/j.psj.2025.105319
標(biāo)簽:安捷倫
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