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應(yīng)用方案

儀器網(wǎng)/ 應(yīng)用方案/ 采用TSKgel G4000SWXL尺寸排阻色譜柱分離口蹄疫滅活疫苗146S抗原

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概述

口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease, FMD)是一種感染牛、羊和豬等偶蹄動物的具有高度傳染性的動物疫病??谔阋卟《九囵B(yǎng)物可以分離出不同密度的粒子,主要有四種:完全病毒粒子(146S)、空衣殼(75S)、12S蛋白質(zhì)亞單位(12S)、病毒相關(guān)感染成分(VIA抗原4.5S)。146S抗原含量是決定口蹄疫疫苗質(zhì)量和免疫效力的關(guān)鍵因素。

本篇應(yīng)用是采用凝膠色譜柱TSKgel G4000SWXL對口蹄疫滅活疫苗146S抗原,進行GX尺寸排阻色譜 (HPSEC) 的分離檢測。


01 樣品的制備

口蹄疫滅活疫苗146S抗原參考方法[1]制備。


02 分析條件

色譜柱:TSKgel G4000SWXL (7.8 mm I.D.×30 cm, 8 μm)

保護柱:TSKgel guardcolumnSWXL (6.0 mm I.D.×4 cm)

流動相:50 mM PB+0.1 mM Na2SO4(pH 7.2)

流速:0.6 mL/min

進樣體積:100 μL

柱溫:室溫

檢測器參數(shù):UV @259 nm


03 分析結(jié)果


型)146S抗原純化樣品色譜圖.png

口蹄疫滅活病毒(O型)146S抗原純化樣品色譜圖


04 結(jié)果與討論

實驗結(jié)果表明:使用凝膠色譜柱TSKgel G4000SWXL可對口蹄疫滅活病毒146S抗原進行GX分離檢測,線性范圍0.56-67.42 μg/mL,相關(guān)系數(shù)R2大于0.99(n=10)。


參考文獻:

1. 徐嫄等. 應(yīng)用體積排阻色譜法測定口蹄疫滅活疫苗中的146S抗原含量,生物工程學(xué)報,2018,34(5):676-684.

標(biāo)簽:凝膠色譜柱

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