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儀器網/ 應用方案/ 上海通微UM3000ELSD檢測未衍生20種氨基酸的檢測方法

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GX液相色譜-UM3000蒸發(fā)光散射檢測器聯(lián)用檢測未衍生氨基酸 1.試劑與材料 1.1甲醇:色譜純 1.2七氟丁酸:純度98% 1.3三氟乙酸:純度99% 1.40.2% 七氟丁酸(含0.1% TFA)溶液:精密吸取七氟丁酸1.00 mL,三氟乙酸0.50 mL溶于500 mL水,即得 1.5 標準品:甘氨酸絲氨酸天冬氨酸谷氨酰胺蘇氨酸丙氨酸谷氨酸半胱氨酸胱氨酸脯氨酸賴氨酸組氨酸纈氨酸精氨酸甲硫氨酸酪氨酸異亮氨酸亮氨酸苯丙氨酸色氨酸,純度均大于等于98%標準儲備液 2.樣品制備 極ng確吸取一定量氨基酸樣品溶液,極ng確至0.001 mL,用水定容,使其中各氨基酸濃度范圍在30 g/mL~300 g/mL之間取5 mL經0.22 m水系濾膜過濾后待測 3.GX液相色譜測定 10.1 推薦色譜條件 a)色譜柱:PrevailTM-C18,5 m,4.6 mm×250 mm(或相當型號色譜柱) b)流動相:溶劑A,七氟丁酸:三氟乙酸:水=1.0:0.5:500;溶劑B,甲醇 c)梯度洗脫:梯度條件見表1 d)流速:0.8 mL/min e)室溫:常溫(25) f)柱溫:35 g)漂移溫度:40 h)載氣流量:2.5 L/min(推薦使用氮氣) i)進樣體積:10 L UM5000蒸發(fā)光散射檢測器

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