蛋白的生物活性測定方法
[活性計(jì)算]
活性單位定義:在上述測定條件下,以50%SW1990腫瘤細(xì)胞被殺傷時,為基因工程人腫瘤凋亡素的1個活性單位
1樣品的稀釋度取常用對數(shù)
2根據(jù)對應(yīng)的細(xì)胞毒活性(光密度值)與稀釋度的對數(shù),進(jìn)行線性回歸,得到計(jì)算公式y(tǒng)=ax+b,分析相關(guān)系數(shù)R值,符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求者進(jìn)行下一步分析
3代入50%殺傷時的光密度值(即第11排細(xì)胞光密度值的一半),計(jì)算出稀釋倍數(shù)的對數(shù),再求出稀釋倍數(shù)
4根據(jù)原樣品濃度及稀釋倍數(shù)計(jì)算出基因工程人腫瘤凋亡素對細(xì)胞50%殺傷時的濃度,再算出比活性
5其他細(xì)胞的檢測方法同上,計(jì)算時根據(jù)對SW1990標(biāo)定的基因工程人腫瘤凋亡素活性單位,先求出對細(xì)胞50%殺傷時的所需活性單位,再根據(jù)基因工程人腫瘤凋亡素對SW1990細(xì)胞殺傷的比活性算出相應(yīng)的量
[計(jì)算結(jié)果]
0304批原液:比活為:1.03×107活性單位/mg
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