鹽析曲線制作 如果要分離一種新的蛋白質(zhì)和酶，沒有文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可以借鑒，則應(yīng)先確定沉淀該物質(zhì)的硫酸銨飽和度 具體操作方法如下： 取已定量測定蛋白質(zhì)或酶的活性與濃度的待分離樣品溶液，冷至0～5，調(diào)至該蛋白質(zhì)穩(wěn)定的pH值，分6～10次分別加入不同量的硫酸銨，**次加硫酸銨至蛋白質(zhì)溶液剛開始出現(xiàn)沉淀時(shí)，記下所加硫酸銨的量，這是鹽析曲線的起點(diǎn)繼續(xù)加硫酸銨至溶液微微混濁時(shí)，靜止一段時(shí)間，離心得到**個(gè)沉淀級分，然后取上清再加至混濁，離心得到第二個(gè)級分，如此連續(xù)可得到6～10個(gè)級分，按照每次加入硫酸銨的量，查出相應(yīng)的硫酸銨飽和度將每一級分沉淀物分別溶解在一定體積的適宜的pH緩沖液中，測定其蛋白質(zhì)含量和酶活力以每個(gè)級分的蛋白質(zhì)含量和酶活力對硫酸銨飽和度作圖，即可得到鹽析曲線