對(duì)于廣大實(shí)驗(yàn)科研工作者來(lái)說(shuō)大家在做PCR凝膠成像實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意以下幾個(gè)問(wèn)題:
1.EB染料的安全使用
EB(Ethidium bromide):即溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,廣泛用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的核酸大分子 在302nm 紫外光激發(fā)下溴化乙錠能夠放射出橙紅色熒光信號(hào),用Polaroid 底片或有CCD 成像頭的凝膠成像處理系統(tǒng)可以捕捉拍攝這種信號(hào)因此EB染料廣泛用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
但目前認(rèn)為EB染料是一種強(qiáng)誘變劑,具有高致癌性因此在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一定要注意安全實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要對(duì)EB染料凈化處理,以免危害人身安全及污染環(huán)境對(duì)于含有EB染料的溶液可做如下處理:
EB含量超過(guò)0.5mg/ml:首先用水將其濃度稀釋至0.5mg/ml以下;然后加入一倍體積的0.5mol/L KMnO4,混勻,再加入等量的25mol/L HCl,混勻,置室溫下數(shù)小時(shí);Z后加入一倍體積的2.5mol/L NaOH,混勻并廢棄
EB含量小于0.5mg/ml:首先按1mg/ml的量加入活性炭,輕搖混勻后置室溫下1小時(shí);然后用濾紙過(guò)濾溶液,并將活性碳與濾紙密封廢棄
2.對(duì)于紫外線(xiàn)的防護(hù)
雖然適量紫外線(xiàn)對(duì)人體具有一定的保健作用,但對(duì)于科學(xué)工作者來(lái)說(shuō)往往要接觸大量的紫外輻射,因此正確的防護(hù)尤為重要
過(guò)量過(guò)強(qiáng)紫外線(xiàn)作用于皮膚時(shí),易引起皮膚出現(xiàn)紅斑,水皰甚至水腫,嚴(yán)重的還可引起皮膚癌等作用于眼睛可引起眼痛,流淚等進(jìn)而引起各種炎癥反應(yīng),嚴(yán)重的還可能誘發(fā)白內(nèi)障過(guò)量強(qiáng)紫外線(xiàn)作用于神經(jīng)系統(tǒng),可引發(fā)頭痛頭暈體溫升高等不適癥狀 領(lǐng)成TCT5梯度型PCR儀(科研及教學(xué)專(zhuān)用)
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