肽類(lèi)藥物憑借其特異性、選擇性和高效性，在治療多種疾病方面發(fā)揮著重要作用，如 GLP-1 RAs 在糖尿病治療和體重管理方面效果顯著，市場(chǎng)需求不斷攀升，從而推動(dòng)大規(guī)模合成肽生產(chǎn)。目前，合成肽主要通過(guò)固相肽合成（SPPS）或液相肽合成（LPPS），其中，F(xiàn)moc 保護(hù)的氨基酸是關(guān)鍵起始原料。為保證產(chǎn)品質(zhì)量和安全，使用前需對(duì)原料進(jìn)行身份驗(yàn)證。但傳統(tǒng)拉曼手持設(shè)備在驗(yàn)證時(shí)需打開(kāi)容器采樣，易污染原料、縮短保質(zhì)期，且不適用于對(duì)光和空氣敏感的 Fmoc 保護(hù)的氨基酸。

安捷倫 Vaya 手持拉曼采用空間位移拉曼光譜（SORS）技術(shù)，可穿透多種透明或不透明容器驗(yàn)證原料，無(wú)需開(kāi)封。本文實(shí)驗(yàn)證實(shí)了 Vaya 能夠穿透不同類(lèi)型的包裝對(duì)四種 Fmoc 保護(hù)的氨基酸進(jìn)行驗(yàn)證。

圖 1. Agilent Vaya 手持拉曼光譜儀用于驗(yàn)證 Fmoc 保護(hù)的氨基酸

實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)材料：

Fmoc 保護(hù)的氨基酸樣品由 Sigma-Aldrich 提供，分別裝在白色高密度聚乙烯（HDPE）瓶或琥珀瓶中。

實(shí)驗(yàn)方法：

在 Vaya 設(shè)備上針對(duì)四種 Fmoc 保護(hù)的氨基酸開(kāi)發(fā)方法，設(shè)備軟件可創(chuàng)建方法并確保模型可區(qū)分。開(kāi)發(fā)方法時(shí)，根據(jù)容器類(lèi)型選擇合適的容器扣除選項(xiàng)，如琥珀瓶選“玻璃”，白色 HDPE 瓶選“厚塑料”。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

創(chuàng)建并驗(yàn)證方法后，系統(tǒng)可在 40 秒內(nèi)通過(guò)琥珀瓶或白色 HDPE 瓶識(shí)別和區(qū)分 Fmoc 保護(hù)的氨基酸，并給出清晰的通過(guò)/不通過(guò)結(jié)果。

結(jié)果與討論

Fmoc 保護(hù)的氨基酸在琥珀瓶和白色 HDPE 瓶中均顯示出可區(qū)分的拉曼光譜。Vaya SORS 技術(shù)能快速區(qū)分和驗(yàn)證其身份。在拉曼光譜中，1481cm^-1處的特征峰歸因于帶 Fmoc 保護(hù)的基團(tuán)，這是 Fmoc 保護(hù)的氨基酸特有的。此外，1003cm^-1、1026cm^-1、1528cm^-1處的峰對(duì)應(yīng)芳香基團(tuán)，而 1675cm^-1和 1687cm^-1 處的峰可識(shí)別羰基基團(tuán)。

圖 2. 四種 Fmoc 保護(hù)的氨基酸原料及其包裝

隨著肽類(lèi)生物制劑（如 GLP-1 受體激動(dòng)劑）需求的持續(xù)增長(zhǎng)，其有望超過(guò)現(xiàn)有制造能力。安捷倫 Vaya 手持拉曼原料身份驗(yàn)證系統(tǒng)不僅提高了原料驗(yàn)證的效率，避免了傳統(tǒng)方法可能導(dǎo)致的污染問(wèn)題，還有助于滿(mǎn)足監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)藥品生產(chǎn)原料驗(yàn)證的嚴(yán)格要求。在肽類(lèi)生物制劑需求持續(xù)增長(zhǎng)、制造能力面臨挑戰(zhàn)的當(dāng)下，該系統(tǒng)為合成肽生產(chǎn)企業(yè)提供了高效、可靠的原料驗(yàn)證解決方案，有望推動(dòng)整個(gè)行業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。

標(biāo)簽：安捷倫