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本研究參照《IFCC 在 37 °C 酶催化活性濃度測(cè)量的原級(jí)參考方法第 4 部分:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶催化濃度測(cè)定參考方法》[1],使用 Agilent Cary 3500 紫外-可見分光光度計(jì)對(duì)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 (ALT) 的催化活性濃度進(jìn)行監(jiān)測(cè)。該方法中的基本原理是:在 37 °C 的恒溫條件下,L-丙氨酸與 2-酮戊二酸在 ALT 的催化下生成丙酮酸和 L-谷氨酸,丙酮酸與煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH) 在乳酸脫氫酶的作用下生成乳酸和 NAD+(如以下反應(yīng)方程式所示);然后通過監(jiān)測(cè) 339 nm 下 NADH 的氧化速率(即吸光度的下降速率)來測(cè)定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的催化活性濃度,二者呈正比關(guān)系。
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