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Agilent Chem Elut S 固相支持液液萃取 (Chem Elut S) 使用合成填料,比傳統(tǒng)硅藻土具有更出色的一致性和更高的持水容量。本研究展示了采用 Chem Elut S 2 mL 96 孔板對人血清中的一組共 15 種內(nèi)源性類固醇進(jìn)行 LC/MS/MS 定量測定。使用固相支持液液萃取 (SLE) 對血清樣品進(jìn)行前處理,以提取目標(biāo)分析物,并去除基質(zhì)干擾物質(zhì),如鹽、蛋白質(zhì)和部分磷脂。整個樣品處理在 96 孔板中作為一個批處理進(jìn)行,首先將水溶液樣品加載到 SLE 吸附劑上,然后使用與水不混溶的溶劑進(jìn)行重力洗脫。與傳統(tǒng)的液液萃取 (LLE) 相比,Chem Elut S 的板內(nèi)工作流程可大大節(jié)省時間和人力。針對血清中目標(biāo)類固醇濃度為 5–10000 pg/mL 的寬校準(zhǔn)范圍(雌二醇和睪酮的校準(zhǔn)范圍為 10–10000 pg/mL,氫化可的松、17-羥基孕烯醇酮和孕酮的校準(zhǔn)范圍為 20–10000 pg/mL),對建立的 SLE 方法進(jìn)行驗(yàn)證,該方法表現(xiàn)出優(yōu)異的方法分析物準(zhǔn)確度 (80%–120%) 和重現(xiàn)性 (RSD < 15%)。還對方法選擇性和交叉污染進(jìn)行了評估,五種分析物定量限 (LOQ) 升高歸因于方法在血清基質(zhì)中的選擇性。此外,在給定的樣品萃取溶劑下,合成的 SLE 吸附劑與基于硅藻土的 SLE 以及傳統(tǒng) LLE 相比,能夠更好地去除生物體液基質(zhì)中的磷脂。
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