產品描述

 

9°N DNA Ligase為高溫連接酶，它能催化與同一互補靶DNA鏈雜交的兩條相鄰寡核苷酸鏈的5′-磷酸和3′-羥基之間形成磷酸二酯鍵。該催化反應只有當兩條寡核苷酸鏈與互補靶DNA完全配對，且兩條寡核苷酸鏈之間沒有間隙的條件下才會發(fā)生。因此可以用于檢測單堿基替換。該酶以ATP作為輔因子，在45-70℃區(qū)間內均有活性。

 

產品組分

 

組分編號	組分名稱	產品編號/規(guī)格
		14959ES84（2000 U）	14959ES92（10000 U）
14959-A	9°N DNA Ligase (40 U/μL)	50 μL	250 μL
14959-B	10× 9°N DNA Ligase Buffer	0.5 mL	1.5 mL

 

單位定義

 

在45℃條件下，孵育15 min能使50%的1 μg經(jīng)BstEII消化的λDNA片段（12 bp粘性末端）發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。

 

運輸與保存方法

 

冰袋運輸。-20℃保存，有效期2年。

 

注意事項

 

1.本產品可有效連接12 bp的互補片段，但無法連接4 bp的互補片段（典型限制酶消化產物）；

2. 酶使用時宜存放在冰盒內或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存；

3. 本產品僅做科研用途；

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

使用方法

 

1. 反應體系配制：

組分	用量
10× 9°N DNA Ligase Buffer	2 μL
底物：互補粘性末端>8 nt的DNA	100 ng-1 μg
9°N DNA Ligase (40 U/μL)	1-2 μL
ddH2O	To 20 μL

2. 反應條件：45-50℃連接15min。

HB220930