利用流式衰老抗體染色特定組織細(xì)胞，隨后根據(jù)發(fā)射光的熒光強(qiáng)度和波長(zhǎng)將不同類型衰老細(xì)胞分選出來(lái)，進(jìn)一步研究衰老細(xì)胞理化性質(zhì)。

應(yīng)用原理

• 流式細(xì)胞術(shù)分選衰老細(xì)胞的原理

衰老相關(guān)-β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）在正常人體細(xì)胞主要表達(dá)在溶酶體，*適 pH 是 4~4.5；而在衰老細(xì)胞中，SA-β-gal 不僅大量積累，*適 pH 還偏移至 6，因此人為給予 β-gal 作用底物 X-gal 和 pH 6 的環(huán)境，衰老細(xì)胞可以在 β-gal 的作用下，將底物轉(zhuǎn)變?yōu)樯钏{(lán)色，利用熒光標(biāo)記的 β-半乳糖苷酶底物即可利用流式將衰老細(xì)胞分選出來(lái)。

• 衰老細(xì)胞的特征

DNA不穩(wěn)定、端粒損耗、表觀遺傳改變、蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)喪失、營(yíng)養(yǎng)感應(yīng)失調(diào)、線粒體功能障礙、細(xì)胞衰老、干細(xì)胞耗竭和細(xì)胞間通訊改變。

使用流式細(xì)胞術(shù)分選衰老細(xì)胞分選的特點(diǎn)

1、只要樣本制備成單個(gè)細(xì)胞或生物顆粒懸液均可以分析。

2、測(cè)量速度快，每秒中可以測(cè)量數(shù)千個(gè)乃至數(shù)萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。

3、同時(shí)測(cè)量每個(gè)細(xì)胞的多參數(shù)特征。

4、在進(jìn)行細(xì)胞特征分析的同時(shí)可以把指定特征的細(xì)胞分離出來(lái)，以便對(duì)特定細(xì)胞做進(jìn)一步培養(yǎng)、克隆化、觀察或進(jìn)行某些實(shí)驗(yàn)，這就是分選技術(shù)。

流式細(xì)胞術(shù)分選衰老細(xì)胞的步驟

1、首先，制備單細(xì)胞懸液，經(jīng)過(guò)特異性熒光染料標(biāo)記抗體進(jìn)行染色，在恒定氣體的壓力下進(jìn)入檢測(cè)區(qū)域。

2、其次，流式細(xì)胞儀的激光激發(fā)細(xì)胞或微粒上的熒光染料，使其產(chǎn)生熒光。之后收集單細(xì)胞上的熒光信號(hào)。

3、統(tǒng)計(jì)收集到熒光信號(hào)情況（所測(cè)細(xì)胞膜表面抗原強(qiáng)度或細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的濃度會(huì)導(dǎo)致熒光強(qiáng)度出現(xiàn)變化）。

4、根據(jù)所測(cè)定的各個(gè)參數(shù)將指定的細(xì)胞從細(xì)胞群體中分離出來(lái)。