核酸蛋白檢測(cè)儀又紫外檢測(cè)儀,是液相色譜實(shí)驗(yàn)中的一種紫外檢測(cè)儀,和層析柱、恒流泵、自動(dòng)部份收集器和液相色譜數(shù)據(jù)工作站等相互配備就使得一套完整的分離層析系統(tǒng)組成了。
其作為是生物化學(xué)、分子生物學(xué)、基因工程、制藥、化工、農(nóng)業(yè)、食品以及醫(yī)院等有關(guān)科研部門和生產(chǎn)單位在分離分析工作中的工具不可或缺。
波長(zhǎng)含義
1、A230nm
A230nm為碳水化合物Z高吸收峰的吸收波長(zhǎng),核酸樣品純度能夠通過比值進(jìn)行評(píng)估。2.5為純DNA和RNA的A260/A230比值。如果比值小于2.0,那么表示樣品受到了碳水化合物(糖類)、鹽類或有機(jī)溶劑的污染,需要對(duì)樣品進(jìn)行純化。因?yàn)樵诤艿虳NA濃度的溶液中受到一些其他成分的干擾,是導(dǎo)致A230產(chǎn)生負(fù)值的主要原因。在下一個(gè)測(cè)定中,需要將樣品的稀釋度降低,就會(huì)校正A230的負(fù)值。

2.A320nm或A340nm
A320nm是檢測(cè)溶液樣品的濁度和其他干擾因子。該值應(yīng)當(dāng)和0.0接近。若沒有,則表示有懸浮物存在于溶液中,需要對(duì)樣品進(jìn)行純化,0通常為純樣品的A320的值。
3.A260/A280和A260/A230
A260/A280是核酸純度的指示值。純凈的RNA樣品比值應(yīng)當(dāng)>2.0,純凈的DNA樣品比值應(yīng)當(dāng)>1.8,在pH7-8.5下純度好的DNA或RNAA260/A280的比值應(yīng)該在2.0或2.5。若比值<1.8或者2.0,則說明受到了酚類物質(zhì)或者蛋白質(zhì)的影響。A230表明有一些如碳水化合物、鹽(胍鹽)等污染物存在于樣品中。比較純凈的核酸A260/A230的比值一般>2.0。
4.A260nm
是核酸Z高吸收峰的吸收波長(zhǎng)即,0.1-1.0為其Z佳測(cè)量值的范圍,如果不包括在Z佳測(cè)量值的范圍內(nèi),對(duì)樣品進(jìn)行稀釋或濃縮,使其處于該范圍內(nèi);如果吸光度<0.05,那么可能受到了樣品內(nèi)有懸浮物、移液不準(zhǔn)確等操作因素的影響。由于樣品中的雜質(zhì)和顆粒一般會(huì)對(duì)光有一定的吸收,因此,想要吸光度值可靠,核酸的吸光度必須大于0.1。
5.A280nm,A270nm
A280nm是蛋白Z高吸收峰的吸收波長(zhǎng),核酸樣品純度能夠通過比值進(jìn)行評(píng)估,2.0為純RNA的比值,1.8為純DNA的A260/A280的比值。若比值偏低,說明受到蛋白(芳香族)或酚類物質(zhì)的污染,需要對(duì)樣品進(jìn)行純化。50%蛋白質(zhì)/DNA溶液比值相當(dāng)于1.5,270nm為酚的Z大吸收峰。
應(yīng)用
記錄儀(色譜工作站)、自動(dòng)部分收集器、恒流泵、上層析柱等均配備于該儀器上,從而使得一套完整的液相色譜分離層析儀(系統(tǒng))組合成功。
其在現(xiàn)代生物學(xué)研究、藥物測(cè)定、農(nóng)業(yè)科研、化工、食品受到廣泛的應(yīng)用,尤其是用于YL科研單位對(duì)具有紫外吸收的生物樣品的定性、定量分析。其能夠連續(xù)地對(duì)微量樣品池進(jìn)行檢測(cè),使得分離生物大分子的目的Z終達(dá)到。
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