核酸蛋白檢測(cè)儀又稱(chēng)紫外檢測(cè)儀,是液相色譜中的一種紫外裝置,核酸蛋白檢測(cè)儀配上層析柱,恒流泵,部分收集器等,即組成一套完整的液相色譜分離分析系統(tǒng)。核酸蛋白檢測(cè)儀是現(xiàn)代生物學(xué)研究,藥物測(cè)定、農(nóng)業(yè)科研、化工、食品及YL單位對(duì)具有紫外吸收的樣品作定性,半定量分析不可或缺的設(shè)備之一。
近年來(lái),市場(chǎng)上相繼出現(xiàn)了可代替記錄儀的“電腦采集器”、“電腦核酸蛋白檢測(cè)儀”、“雙波長(zhǎng)電腦核酸蛋白檢測(cè)儀”、“層析-電導(dǎo)聯(lián)用系統(tǒng)”等產(chǎn)品,迅速應(yīng)用到教學(xué)實(shí)驗(yàn)、科學(xué)研究和藥物生產(chǎn)領(lǐng)域。
核酸蛋白檢測(cè)儀主要元器件性能穩(wěn)定、靈敏度高等。核酸蛋白檢測(cè)儀的數(shù)字顯示分為固定光吸收A顯示記錄儀,和可變量程光吸收A顯示記錄儀用兩種模式,這樣不但方便讀數(shù)而且還可以依據(jù)科研需要進(jìn)行可變量程的高靈敏度讀數(shù),有利于對(duì)低濃度樣品檢測(cè)。

所有紫外吸收檢測(cè)器工作原理都是基于光的吸收定律——朗伯-比耳定律。光源經(jīng)220nm、254nm、280nm、340nm等干涉濾色片提供單色光作為檢測(cè)核酸、蛋白、酶、多肽的光源。具體工作原理正如該定律指出,當(dāng)一束單色光(λ)輻射通過(guò)稀濃度物質(zhì)溶液時(shí),如果溶劑不吸收光,則液體的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度和光經(jīng)過(guò)溶液的距離成正比。核酸蛋白檢測(cè)儀其關(guān)系式為:
A(λ)=a(λ)bc
A=-LgT=Lg1/T
核酸蛋白檢測(cè)儀使用某一波長(zhǎng)(280nm或254nm等)進(jìn)行定性檢測(cè)分離,用記錄儀描譜,長(zhǎng)期在高校實(shí)驗(yàn)室使用。
按描譜方式分有:記錄儀描譜和電腦描譜(外加采集分析器)。
按檢測(cè)波長(zhǎng)分有:?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)檢測(cè)和雙波長(zhǎng)(多波長(zhǎng))同步檢測(cè)。
按檢驗(yàn)器分有:核酸蛋白檢測(cè)和核酸蛋白檢測(cè)-電導(dǎo)檢測(cè)聯(lián)用。
傳統(tǒng)層析試驗(yàn)設(shè)備由單波長(zhǎng)核酸蛋白檢測(cè)儀(外加電腦采集器或?qū)㈦娔X采集器裝入檢測(cè)儀中也屬此類(lèi))、層析柱、恒流泵、部分收集器和記錄儀等部件構(gòu)成。用一種波長(zhǎng)(如280nm或254nm等)下對(duì)已知物質(zhì)(蛋白或核酸等)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè),高校實(shí)驗(yàn)室的層析實(shí)驗(yàn)裝置大多屬于此類(lèi)。特點(diǎn)如下:
1、檢測(cè)前必須選定一種波長(zhǎng)(280nm、254nm)進(jìn)行檢測(cè),利用物質(zhì)特征波長(zhǎng)分離已知組分。
2、要求在檢測(cè)前一定要先調(diào)整透過(guò)率為1**%,然后再調(diào)整吸光度為0。
3、傳統(tǒng)核酸蛋白檢測(cè)儀為保證測(cè)量讀數(shù)落在儀器有效測(cè)量范圍內(nèi),在分析儀器面板上都設(shè)有靈敏度選擇裝置(2.0a、1.0a、0.5a、0.2a、0.1a、0.05a等)。
?、贉y(cè)量前要選擇合適的靈敏度;②真正吸光度值是儀器顯示數(shù)與靈敏度的乘積;③測(cè)量中不要改變靈敏度,否則可能會(huì)帶來(lái)基線變化。
4、傳統(tǒng)核酸蛋白檢測(cè)儀在不同靈敏下的測(cè)量結(jié)果均為0-10mv直流信號(hào),將此信號(hào)輸出到記錄儀或電腦采集器。顯然,記錄紙或電腦屏上的吸光度也并非樣品實(shí)際的吸光度,也應(yīng)受到儀器靈敏度的調(diào)制。

以對(duì)蛋白、核酸、肽等生物大分子物質(zhì)的檢測(cè)、分離和純化為目的,新型層析實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的電腦核酸蛋白檢測(cè)系統(tǒng)具有以下特點(diǎn):
1、系統(tǒng)智能調(diào)整吸光度到0.000,透光率到1**%。并在測(cè)量范圍內(nèi)的吸光度和透過(guò)率嚴(yán)格符合a=lg(1/T)。
2、單波長(zhǎng)檢測(cè)或雙波長(zhǎng)同步檢測(cè)。
3、系統(tǒng)自帶數(shù)據(jù)采集工作站,檢測(cè)、采集、軟件工作站一體化系統(tǒng)集成。分析軟件具有實(shí)時(shí)描譜、分析參數(shù)、圖譜保存、圖譜打印、圖譜編輯等功能,提供峰高、峰寬、峰面積、歸一化、保留時(shí)間、半峰寬、峰底寬、面積含量、純度、層析柱分辯率等參數(shù)。
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