核酸蛋白檢測(cè)儀又稱紫外檢測(cè)儀,是根據(jù)生命科學(xué)的發(fā)展對(duì)于現(xiàn)代色譜儀器的要求而改進(jìn)設(shè)計(jì)的一種新型紫外檢測(cè)儀。以對(duì)蛋白、核酸、肽等生物大分子物質(zhì)的檢測(cè)、分離和純化為目的。
核酸蛋白檢測(cè)儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測(cè)儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(tǒng)(根據(jù)需要選配)和電腦打印設(shè)備即構(gòu)成一套完整的核酸蛋白檢測(cè)儀分離層析系統(tǒng)。
核酸蛋白檢測(cè)儀是當(dāng)今從事生命科學(xué)研究、藥物測(cè)定、化工、食品科學(xué)及醫(yī)學(xué)研究等行業(yè)的現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)儀器。核酸蛋白檢測(cè)儀分析系統(tǒng)廣泛用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、科研和大專院校的科學(xué)研究和教學(xué)實(shí)驗(yàn)。
核酸蛋白檢測(cè)儀其原理是根據(jù)物質(zhì)(樣品)對(duì)紫外光有明顯吸收的特征,實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品成份含量比對(duì)分析,以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識(shí)別檢測(cè)和含量測(cè)定。在生化分析、環(huán)??茖W(xué)、食品研究、毒理研究、新藥開發(fā)等領(lǐng)域中對(duì)核酸、蛋白檢測(cè)、純化和提取提供了一種獨(dú)特的分析手段。
紫外檢測(cè)原理基于被測(cè)組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同,當(dāng)被檢測(cè)組分通過檢測(cè)窗時(shí),吸光度發(fā)生變化服從朗伯-比爾定律,即在一定的實(shí)驗(yàn)條件下,吸光度與被測(cè)組分的濃度成正比。
紫外分析儀用于核酸蛋白檢測(cè)
首先,核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是核苷酸。核苷酸由一個(gè)含氮堿基,一個(gè)戊糖和一個(gè)或幾個(gè)磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵,因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區(qū)別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于測(cè)定核酸。根據(jù)260nm與280nm的吸收光度可判斷核酸純度。
再談蛋白質(zhì),構(gòu)成它的組成是氨基酸,其中的種類包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸,這幾種芳香族氨基酸的苯環(huán)含有共軛雙鍵,使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處,其吸光度(即光密度值)與蛋白質(zhì)含量成正比。所以,紫外吸收法是280nm的光吸收法,含有核酸的蛋白質(zhì)溶液使用280和260nm的吸收差法較好。蛋白質(zhì)的稀溶液采用215與225nm的吸收差法。
此外,蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長(zhǎng)下,蛋白質(zhì)溶液的光吸收值與蛋白質(zhì)濃度的正比關(guān)系,可以進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。紫外吸收法簡(jiǎn)便、靈敏、快速,不消耗樣品,測(cè)定后仍能回收使用。
還有一些測(cè)定蛋白質(zhì)的方法,是通過蛋白質(zhì)與一些物質(zhì)的作用產(chǎn)生顏色,然后在此有色光光譜內(nèi)測(cè)定吸光度。將已知濃度的蛋白質(zhì)溶液稀釋幾個(gè)倍數(shù),與物質(zhì)作用后作為標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)定吸光度做出一條曲線,然后未知溶液的濃度就可通過吸光度來(lái)得出。這些方法包括,凱氏定氮法,考馬斯亮藍(lán)法,F(xiàn)olin-酚試劑法和BCA法。
1、系統(tǒng)智能調(diào)整吸光度到0.000,透光率到1**%。,并在測(cè)量范圍內(nèi)的吸光度和透過率嚴(yán)格符合A=Lg(1/T)。
2、核酸蛋白檢測(cè)儀具有單波長(zhǎng)檢測(cè)或雙波長(zhǎng)同步檢測(cè)。
3、核酸蛋白檢測(cè)儀具有數(shù)據(jù)采集工作站,檢測(cè)、采集、軟件工作站一體化系統(tǒng)集成。分析軟件具有實(shí)時(shí)描譜、分析參數(shù)、圖譜保存、圖譜打印、圖譜編輯等功能,提供峰高、峰寬、峰面積、歸一化、保留時(shí)間、半峰寬、峰底寬、面積含量、純度、層析柱分辯率等參數(shù)。
4、核酸蛋白檢測(cè)儀除了具有10mV記錄儀輸出信號(hào)外,還同時(shí)有適合于計(jì)算機(jī)積分儀的輸出接口,這樣很方便于構(gòu)成色譜工作站系統(tǒng)。
5、核酸蛋白檢測(cè)儀的數(shù)字顯示設(shè)計(jì)為固定光吸收A顯示和可變量程光吸收A顯示兩種可選模式,這樣可方便于規(guī)范化讀數(shù),同時(shí)亦可根據(jù)科研需要進(jìn)行可變量程的高靈敏度讀數(shù),這樣可方便于對(duì)低濃度樣品檢測(cè)。
6、核酸蛋白檢測(cè)儀使用光電倍增管和改進(jìn)型電路結(jié)構(gòu),應(yīng)用數(shù)字顯示2個(gè)OD值表,可直接讀出光密度A值,從而使核酸蛋白檢測(cè)儀具有靈敏度高、峰值重復(fù)性好、漂移低、性能穩(wěn)定、質(zhì)量可靠、使用方便等優(yōu)點(diǎn)。
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