培養(yǎng)基不僅是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境，而且還是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)。通常，在配制培養(yǎng)基完成后對(duì)PH進(jìn)行測(cè)試與調(diào)節(jié)，以及對(duì)其進(jìn)行滅菌。配制好的培養(yǎng)基不應(yīng)該久置，現(xiàn)配現(xiàn)用為好。因?yàn)榕囵B(yǎng)基所需的配置原料以及使用的要求的不一樣，貯存保管方面也稍有差異。通常，培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，容易受到細(xì)菌的污染或者變質(zhì)分解。所以培養(yǎng)基必須保管在防潮、避光、陰涼的地方。下面就讓小編帶你了解一下配制培養(yǎng)基的操作規(guī)程。

操作規(guī)程

一、配制培養(yǎng)基

1.按照配方要求，使用量筒或移液管將所需的用量分別從每種母液中取出，置入同一燒杯中，并且使用粗天平對(duì)蔗糖、瓊脂進(jìn)行稱(chēng)取，然后置于旁邊備用。

2.將300～400mL蒸餾水加入步驟1中稱(chēng)量好的瓊脂中，加熱并且不斷攪拌，一直到瓊脂煮沸溶解呈透明狀，再停止加熱。

3.向煮好的瓊脂中添加步驟1中所取的各種物質(zhì)(包括蔗糖)，然后向里面加入1000mL水，攪拌均勻，配制成培養(yǎng)基。

4.像步驟3中的培養(yǎng)基內(nèi)滴入1N(克當(dāng)量濃度)的HCL或NaOH，一次僅滴幾滴，然后攪拌均勻，并且使用pH試紙對(duì)pH值進(jìn)行測(cè)定，一直到培養(yǎng)基的pH值被調(diào)節(jié)到5.8為止。

5.使用漏斗向三角瓶(或試管)中分裝配好的培養(yǎng)基，并且用棉塞塞緊瓶口，將號(hào)碼寫(xiě)在瓶壁上。瓶中培養(yǎng)基的量大約是總?cè)萘康?/4或1/5。

可以準(zhǔn)備一份寫(xiě)清楚培養(yǎng)基的全部成分和用量的配制培養(yǎng)基的成分單，以便因?yàn)榕囵B(yǎng)基比較復(fù)雜的成分，從而導(dǎo)致配制時(shí)忙亂漏掉一些成分。在配置的時(shí)候，根據(jù)表列內(nèi)容順序，按項(xiàng)按量稱(chēng)取，，就不會(huì)有差錯(cuò)出現(xiàn)。

二、滅菌保存

在培養(yǎng)基配制完成后，應(yīng)當(dāng)立刻對(duì)其進(jìn)行滅菌。一般應(yīng)將培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，在汽相120℃條件下，進(jìn)行20min的滅菌。若無(wú)高壓蒸汽滅菌鍋，，則也可以采用間歇滅菌法進(jìn)行滅菌，就是將培養(yǎng)基煮沸維持10min，24h后再次煮沸20min。像這樣連續(xù)三次滅菌，就能夠使得完全滅菌的目標(biāo)達(dá)成。

滅菌之后的培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)保持于10攝氏度以下，保存在4～5℃低溫下效果更佳。如果培養(yǎng)基中含有吲哚乙酸或赤霉素，那么，此培養(yǎng)基需要在配置完畢后的一個(gè)星期之內(nèi)用完，其他的培養(yǎng)基也必須在一個(gè)月以?xún)?nèi)用完。在通常情況下，Z好不要超過(guò)兩周。