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膜片鉗

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膜片鉗技術(shù)的發(fā)展

更新時(shí)間:2025-10-19 08:35:00 類型:膜片鉗的其他相關(guān)知識(shí) 閱讀量:1640
導(dǎo)讀:1976年德國(guó)馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創(chuàng)建了膜片鉗技術(shù)。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細(xì)胞膜單一的或多個(gè)的離子通道分子活動(dòng)的技術(shù)。

1976年德國(guó)馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創(chuàng)建了膜片鉗技術(shù)(patch clamp recording technique)。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細(xì)胞膜單一的或多個(gè)的離子通道分子活動(dòng)的技術(shù)。它和基因克隆技術(shù)(gene cloning)并架齊驅(qū),給生命科學(xué)研究帶來了巨大的前進(jìn)動(dòng)力。


膜片鉗技術(shù)因?yàn)槿詣?dòng)膜片鉗技術(shù)的出現(xiàn)已經(jīng)進(jìn)入了一個(gè)全新的階段。傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)一次只能記錄一個(gè)細(xì)胞,對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員來說,不僅會(huì)耗費(fèi)大量的時(shí)間,而且耗費(fèi)相當(dāng)大的精力。傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)不適合記錄大量細(xì)胞的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究,也不適合在藥物開發(fā)初期和中期的大量篩選化合物。全自動(dòng)膜片鉗技術(shù)通量高,一次能記錄幾十甚至幾百的細(xì)胞,而且能夠自動(dòng)化找細(xì)胞,形成封接,破膜等的實(shí)驗(yàn)過程。大大提高了實(shí)驗(yàn)人員的效率。全自動(dòng)膜片鉗技術(shù)技術(shù)不同,采用的原理也不相同。

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1.Population Patch Clamp技術(shù)

Population Patch Clamp技術(shù)不再采用玻璃電極,而是采用PatchPlate平面電極芯片。這個(gè)芯片包括很多小室,有很多1-2微米的封接孔在每一個(gè)小室內(nèi)。當(dāng)記錄的時(shí)候,每個(gè)小室內(nèi)封接成功的細(xì)胞數(shù)量很多,這些細(xì)胞通道電流的平均值就是獲得的記錄。所以,不同小室通道電流的變異系數(shù)很小,一致性非常好。


2.Flip-TIp翻轉(zhuǎn)技術(shù)

Flip-TIp翻轉(zhuǎn)技術(shù)是向玻璃電極中灌入一定密度的細(xì)胞懸液,在電極外施加一定的負(fù)壓使得在電極的單細(xì)胞和玻璃電極之間形成穩(wěn)定的高阻封接,使露在玻璃電極開口處的細(xì)胞膜破裂就形成全細(xì)胞記錄模式。這種技術(shù)的顯著特點(diǎn)是藥物施加微量快速,仍然使用玻璃作電極。


3.SealChip技術(shù)

Population Patch Clamp相同,SealChip技術(shù)完全不采用玻璃作為電極,而是采用SealChip平面電極芯片,往芯片上面灌入一定密度的細(xì)胞懸液,隨機(jī)下降到芯片1-2微米的孔上并通過自動(dòng)的負(fù)壓形成穩(wěn)定的高阻封接,使得孔下面的細(xì)胞膜破裂形成全細(xì)胞模式。


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