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膜片鉗

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膜片鉗的技術原理

更新時間:2025-10-21 05:26:50 類型:膜片鉗的工作原理 閱讀量:2541
導讀:膜片鉗技術是通過微玻管電極接觸細胞膜,用千兆歐姆以上的阻抗使之封接,在電學上分隔和電極尖開口處相接的細胞膜的小區(qū)域以及其周圍,在此基礎上固定點位,對這膜片上的離子通道的離子電流進行監(jiān)測記錄的方法。

1976年德國馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創(chuàng)建了膜片鉗技術(patch clamp recording technique)。這是一種根據(jù)記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的或多個的離子通道分子活動的技術。生命科學研究因為它和基因克隆技術,獲得了巨大的前進動力。


技術原理

膜片鉗技術是以玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜利用負壓吸引封接起來,因為電極與細胞膜的高阻封接,使得從電學上隔離了電極籠罩下的那片膜與膜的其他部分,所以這片膜內開放所產生的電流流進玻璃吸管,以一個極為敏感的電流監(jiān)視器(膜片鉗放大器)測量此電流強度,就得到單一離子通道電流。

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膜片鉗技術的建立,對生物學科學特別是神經科學的變革產生了巨大的意義。這種技術是根據(jù)記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的(或多個)的離子通道分子活動。自然將細胞水平和分子水平的生理學研究因為這種技術的出現(xiàn)聯(lián)系在了一起,與此同時,又融匯了神經科學的不同分,使得以前各個分野互不聯(lián)系、互不滲透,阻礙人們全面認識能力的弊端的到改變。


常規(guī)與全自動膜片鉗技術對比

膜片鉗技術是研究離子通道的Z重要的技術,被叫做研究離子通道的“金標準”。如今膜片鉗技術已由常規(guī)膜片鉗技術(Conventional patch clamp technique)發(fā)展到全自動膜片鉗技術(Automated patch clamp technique)。

傳統(tǒng)膜片鉗技術每次僅能記錄一個細胞(或一對細胞),實驗人員勞動強度大,勞動時間長。對于藥物開發(fā)初期和中期對于大量化合物的

篩選和記錄大量細胞的基礎實驗研究非常不適用。全自動膜片鉗技術對于這些問題很好的解決了。它不但通量高,能夠一次記錄幾個甚至幾十個細胞,而且從找細胞、形成封接、破膜等整個實驗操作實現(xiàn)了自動化,避免了實驗人員操作的復雜與困難。膜片鉗技術的工作效率因為全自動膜片鉗技術的這兩個優(yōu)點大大地提高了。由于全自動膜片鉗技術的這些優(yōu)點,,如今它已經在藥物篩選方面被廣泛地使用了。

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