簡(jiǎn)單的說(shuō)，PCR就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù)，可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍。下面就讓小編帶你了解一下PCR的常見(jiàn)問(wèn)題和常見(jiàn)故障。

常見(jiàn)問(wèn)題

1.為什么在不同型號(hào)的PCR儀上擴(kuò)增出的條帶亮度有差異？

答：不同的PCR儀有不一樣的優(yōu)化的升降溫策略，因此當(dāng)向另一類PCR儀轉(zhuǎn)移這類CR儀上使用的PCR步驟參數(shù)上時(shí)，需要進(jìn)行試驗(yàn)優(yōu)化。

2.在PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)束后我的樣品可以一直放在PCR儀中低溫保存嗎？

答：Z好不要，建議在程序運(yùn)行結(jié)束之后，應(yīng)當(dāng)將樣品從PCR儀中及時(shí)取出。當(dāng)?shù)蜏乇４鏁r(shí)，盡量設(shè)定比較高的溫度，能夠使得儀器的使用壽命延長(zhǎng)。

3.模擬管和樣品臺(tái)控溫模式有什么差別？

若采用樣品臺(tái)控溫模式，當(dāng)將樣品臺(tái)升降溫到目標(biāo)溫度時(shí)，因?yàn)閭鳠嵫舆t，樣品管內(nèi)樣品達(dá)到目標(biāo)溫度仍需要較長(zhǎng)的時(shí)間，因此，當(dāng)步驟時(shí)間在30s以下時(shí)，Z好使用模擬管控，若要使用樣品臺(tái)控溫模式，那么Z好延長(zhǎng)一倍步驟時(shí)間。

4.反應(yīng)后反應(yīng)管壁出現(xiàn)液滴？

可能原因1：在程序運(yùn)行前，熱蓋加熱功能沒(méi)有被開(kāi)啟。

方法：將熱蓋加熱功能開(kāi)啟。

可能原因2：在反應(yīng)結(jié)束后，過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的低溫保存。

方法：在結(jié)束運(yùn)行后，熱蓋將自動(dòng)關(guān)閉，因此會(huì)出現(xiàn)冷凝，這不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，在離心機(jī)上放置反應(yīng)管，瞬時(shí)離心使液滴回到管子底部就行。

5.使用的微孔板，反應(yīng)后反應(yīng)液有明顯蒸發(fā)？

方法：（1）保證使用的微孔板質(zhì)量很好，在反應(yīng)之前，要密封嚴(yán)格。（2）保證熱蓋蓋緊，將熱蓋的溫度適當(dāng)提高。（3）將反應(yīng)體積增大。

6.使用PCR管，反應(yīng)后部分PCR管內(nèi)反應(yīng)液有明顯蒸發(fā)？

方法：（1）確保使用的PCR管質(zhì)量很高。（2）將四個(gè)同樣的空PCR管分別置于樣品臺(tái)的四角，從而使證熱蓋壓在各PCR管上的壓力均勻得到保證。

常見(jiàn)故障

1.加熱或者冷卻速度緩慢

出現(xiàn)這樣的情況，原因可能是控制器或機(jī)械故障，需要運(yùn)行診斷測(cè)試并記錄加熱速率。

2.開(kāi)機(jī)時(shí)，出現(xiàn)錯(cuò)誤信息

這種情況有可能是儀器某一系統(tǒng)啟動(dòng)失敗或者電壓太低造成的。確保同一電路中沒(méi)有使用其他電器，不要在已有用電器電路上增設(shè)線路。

3.打開(kāi)電源然而儀器不響應(yīng)

出現(xiàn)這種情況，很可能是因?yàn)椴遄鶝](méi)有插緊或者電源線脫落，只要重新插入電源就行。

4.屏幕不顯示并且馬達(dá)和風(fēng)扇不啟動(dòng)

出現(xiàn)這種情況，很有可能是總保險(xiǎn)絲被熔斷，只要將保險(xiǎn)絲更換就能使故障排除。

5.插上電源屏幕空白或，按下某鍵屏幕不顯示相應(yīng)畫(huà)面

出現(xiàn)這樣的情況，很可能是邏輯電路或者電源的保險(xiǎn)絲被熔斷，也有可能是因?yàn)榭刂破?，?duì)保險(xiǎn)絲進(jìn)行更換，如果不能恢復(fù)正常，那么就咨詢維修工程師。