暗視野顯微鏡是光學(xué)顯微鏡的一種，也叫超顯微鏡。暗視野顯微鏡的聚光鏡ZY有擋光片，使照明光線不直接進(jìn)人物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。

　　1、有足夠的照明，標(biāo)本不可見

　　暗視野顯微鏡燈電壓可以被設(shè)置得太低，或燈泡可能沒有足夠的強(qiáng)度照射試樣。將電壓升高到大約12伏或更換光源。如果不解決這個問題，檢查暗視野顯微鏡的聚光器，以確保它正確的位置用適當(dāng)大小的視場光闌。此外，還要檢查顏色和中性密度濾光片，偏光板，相位差板，或其他可能會降低光照強(qiáng)度的光路。

　　2、視場的ZX降低光照強(qiáng)度，有一個暗點(diǎn)

　　可能是暗視野顯微鏡臺下聚光器位置不正確或暗視野顯微鏡的物鏡是錯誤的大小。將暗視野顯微鏡物鏡向上和向下，同時在視場中觀察試樣。檢查做出一定的物鏡孔徑和視場光闌設(shè)置敞開位置。如果這并不影響照明，改變視場光闌尺寸使其稍大或稍小，然后重新檢查照明。

　　偶爾出現(xiàn)此問題可能是，使用過厚(大于標(biāo)準(zhǔn)一毫米)載玻片。如果載玻片太厚，要么改變到正確厚度的載玻片或檢查物鏡，以確定它是否可以調(diào)整，以補(bǔ)償不同厚度的載玻片。

　　3、燈泡內(nèi)部有涂層的黑色蒸發(fā)的鎢燒結(jié)

　　在過高的電壓長時間工作，這肯定會影響其壽命的燈泡已使用。更換暗視野顯微鏡燈泡，在燈電壓降低后觀察試樣的顯微攝影。

　　4、圖像具有明視野周邊帶

　　這由于暗視野顯微鏡臺下聚光器錯誤地居中或視場光闌太小了?；謴?fù)到明視場，并重新建立科勒照明條件，再重復(fù)暗場的過程，確保聚光器的ZX。如果這沒有作用，則增加視場光闌的大小，直到適當(dāng)?shù)陌祱鰲l件成立。

　　當(dāng)暗視野顯微鏡的暗場聚光鏡具有太高的數(shù)值孔徑，也可能出現(xiàn)這個問題。如果是在目標(biāo)內(nèi)部的可變光闌，降低光圈孔徑的大小，以確定是否太多的斜光進(jìn)入物鏡鏡頭前面。此外，它可能有助于增加視場光闌的大小。

　　5、外圍視場只有一側(cè)是光明的

　　檢查物鏡轉(zhuǎn)換器，以確保物鏡正確地定位在暗視野顯微鏡的光軸上。如果視場光闌不能正確居中，問題也可能發(fā)生。卸下目鏡，然后使用定心螺絲正確對齊視場光闌。

　　6、試樣圖像不清晰

　　暗視野顯微鏡標(biāo)本可能不適合。許多染色標(biāo)本沒有足夠的散射光，暗場條件下能清楚成像。試樣的厚度也可能是一個問題，因?yàn)榉浅１〉臉悠吠怀上瘛?/p>

　　7、具有明亮區(qū)域，妨礙觀看暗場標(biāo)本

　　這可能是由于灰塵，頭發(fā)，纖維，或聚光鏡上方某處的污染。徹底清潔試樣，可以使用光學(xué)級紙巾或棉球。有時候，這個問題的產(chǎn)生是由于在物鏡前透鏡的污染。小心松開物鏡，慢慢轉(zhuǎn)動，同時通過目鏡觀察樣品。如果阻塞一起旋轉(zhuǎn)的目標(biāo)，那么它可能是由于前透鏡上的灰塵。取出的目標(biāo)和滋潤鏡頭前輕輕呼氣，然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長木桿。更換的目標(biāo)并檢查。

　　8、背景不是完全黑暗

　　卸下暗視野顯微鏡目鏡，查看后焦面的光路中樣本的情況。整個背部焦平面應(yīng)該是黑暗，沒有任何出現(xiàn)的四周邊緣，明亮的光線。如果在物鏡的后焦平面上觀察到的光的弧或圓，則改變到一個稍大的視場光闌。此外，降低視場光闌的大小，將有助于YZ眩光和烏黑背景。

　　9、顏色顯示在背景中

　　關(guān)閉視場光闌以及旋轉(zhuǎn)試樣，找到Z好的方向，然后確定問題是否已得到糾正。試樣可以被重新安裝在較薄的裝置或安裝介質(zhì)，可能需要進(jìn)行過濾。用柔軟的鏡頭紙或棉簽清潔暗視野顯微鏡的載玻片和蓋玻片。

　　10、通過10x物鏡觀看試樣的視場的ZX有一個長圓形的光點(diǎn)

　　暗視野顯微鏡聚光鏡可能被錯誤地聚焦或擴(kuò)散，過濾器可能丟失，導(dǎo)致圖像出現(xiàn)在視場的ZX有一個長圓形的光點(diǎn)。重新聚焦，并在光路中擴(kuò)散濾波。

　　11、視場有亮點(diǎn)，標(biāo)本不能實(shí)現(xiàn)清晰對焦

　　可能有小氣泡被困在聚光鏡的頂部和底部的顯微鏡載玻片之間的油里。取出目鏡，觀察后焦平面上的物鏡，其中的氣泡將是可見的。為了彌補(bǔ)，斷油接觸，并用棉簽除去殘留的氣泡。清潔聚光鏡的前鏡頭與暗視野顯微鏡玻片上多余的油，然后換一個干凈的滴油的鏡頭。如果問題仍然存在，徹底清潔所有的光學(xué)表面，然后再重新滴油。

　　12、在高放大倍率，膠體粒子顯示不完全的牛頓環(huán)

　　聚光鏡可能是偏離ZX。切換到低功耗的物鏡和ZX聚光鏡，仔細(xì)檢查，以確定更高的功率物鏡是否具有不同的ZX，若有，校準(zhǔn)暗視野顯微鏡光軸ZX的物鏡。