微流式細(xì)胞儀：以微毛細(xì)管技術(shù)為基礎(chǔ)的新一代高性能流式細(xì)胞儀。自1998年微毛細(xì)管技術(shù)用于流式細(xì)胞檢測的技術(shù)在美國獲得zhuan利以來，微流式技術(shù)以微樣本量、微操作量、微學(xué)習(xí)量、微負(fù)擔(dān)以及微體積，為腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、慢性疾病研究以及新藥研發(fā)和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域提供檢測方案。

應(yīng)用

哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Crawford博士提到：“微毛細(xì)管技術(shù)被引入流式細(xì)胞儀徹底改變了我們對實驗動物模型建立的思路。以前，當(dāng)我們需要臨床前藥物測試時，我們不得不在每一個時間點殺死一只小鼠以獲得足夠的全血樣本量。而現(xiàn)在，每次實驗只需要一滴血，因此就可以將同一只小鼠保留下來，檢測不同時間點的變化。從而使我們獲得了以前從來沒有的生物學(xué)信息：即在同一只小鼠上監(jiān)測疾病不同進(jìn)程下的免疫功能變化?！?/span>

休斯頓大學(xué)運(yùn)動醫(yī)學(xué)教授McFarlin博士在研究性論文中提到：“目前為止，很少有研究者對同一只小鼠進(jìn)行縱向的疾病進(jìn)程跟蹤研究，這是因為傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀無法支持超微樣本量的檢測。微毛細(xì)管細(xì)胞分析儀使得利用單核細(xì)胞對慢性免疫疾病發(fā)展進(jìn)行縱向跟蹤的實驗設(shè)計成為現(xiàn)實?！?/span>

以微毛細(xì)管為基礎(chǔ)的微流式對上樣樣品量的需求降低至傳統(tǒng)技術(shù)的十分之一。這也就為珍稀來源樣本的研究、新藥篩選、腫瘤研究、干細(xì)胞研究以及系統(tǒng)性疾病的研究提供了有力的檢測工具，開創(chuàng)了實驗動物模型檢測的新思路。

微流式檢測方案

以較為常見的T淋巴細(xì)胞亞群檢測為例

T淋巴細(xì)胞亞群在許多臨床疾病中可發(fā)生異常改變，特別是免疫功能受損的病人。測定T淋巴細(xì)胞亞群變化對了解疾病的發(fā)病機(jī)制、指導(dǎo)臨床治liao、控制疾病的發(fā)生fa展均有重要意義。根據(jù)不同的表面標(biāo)志物可以對T細(xì)胞進(jìn)行分群，其中CD3+/CD4+為輔助性T細(xì)胞，CD3+/CD8+為殺傷性T細(xì)胞。

使用流式細(xì)胞儀和熒光標(biāo)記抗體，可以對人全血標(biāo)本中T細(xì)胞CD3/CD4進(jìn)行分群和計數(shù)。

實驗流程：

1. 靜脈采血，肝素或EDTA抗凝；

2. 在試管中加入10ul CD8-FITC/CD4-PE/CD3-PECY5 抗體；

3. 向試管內(nèi)加入10ul抗凝全血（約1×10的5次方個細(xì)胞）混勻試劑和全血；

4. 室溫（18-25℃）避光孵育20min；

5. 加入180ul 1X 紅細(xì)胞裂解液；

6. 室溫（18-25℃）避光孵育15min；

7. 使用微流式細(xì)胞分析儀獲取結(jié)果