流式細胞儀通過檢測器接收激光照射液流內(nèi)的細胞或者顆粒產(chǎn)生光信號，經(jīng)過光電轉(zhuǎn)換和統(tǒng)計分析，從而反映細胞的物理化學特征和細胞的功能。下面就讓小編給你介紹一下流式細胞儀中熒光染色對照的設(shè)置。

一、陰性對照

空白對照

自發(fā)熒光，就是經(jīng)過光照而不是經(jīng)過熒光染色體細胞內(nèi)部的熒光分子發(fā)出的熒光。自發(fā)熒光信號是噪聲信號。通常，細胞中能夠產(chǎn)生自發(fā)熒光分子的含量越多，自發(fā)熒光越強，比如腫瘤細胞，粒細胞等。樣本死細胞的比例越高，自發(fā)熒光越強。

實驗樣本

特異熒光，就是抗體F（ab’）2段和細胞抗原特異結(jié)合的熒光染料經(jīng)光照發(fā)出的熒光。

非特異熒光，就是抗體Fc段和細胞表面的Fc受體非特異結(jié)合的熒光染料經(jīng)光照發(fā)出的熒光。

二、同型對照

和實驗染色的單克隆抗體特異性沒有關(guān)系的免疫球蛋白亞型（F（ab’）2段不一樣，F(xiàn)c段一樣）。

和染色的單克隆抗體

1）一樣的種類來源

2）一樣的免疫球蛋白亞型

3）一樣的熒光素標記

4）一樣的濃度和量

5）是用未免疫的的動物的血得到的

用來清除因為抗體非特異結(jié)合到細胞表面的Fc受體所產(chǎn)生的背景染色。

三、補償對照

熒光補償指的是在流式細胞多色分析中，調(diào)整熒光素發(fā)射光譜重疊的問題，就是從一個被檢測的熒光信號去除所有其他的干擾的熒光信號。

在雙色或者多色分析中，當熒光素發(fā)射光譜重疊時，使用單種熒光素標記的單克隆抗體與其他熒光素對應的同型對照抗體分別進行染色。