毛細(xì)管電泳: 將高壓直流電場(chǎng)當(dāng)作驅(qū)動(dòng)力,將彈性石英毛細(xì)管當(dāng)作分離通道,以樣品中各組分的淌度(單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的遷移速度)和分配行為的不同作為依據(jù)來分離各組分的方法。
注意事項(xiàng)
在對(duì)CE 系統(tǒng)進(jìn)行搭建時(shí),需要仔細(xì)考慮以下幾個(gè)關(guān)鍵部位:
1. 進(jìn)樣系統(tǒng):
電遷移進(jìn)樣以及流體動(dòng)力學(xué)進(jìn)樣為其比較常用的幾種兩種主要方式。動(dòng)力和計(jì)時(shí)控制部件、毛細(xì)管和樣品瓶及緩沖液瓶的位置變換控制部件等共同構(gòu)成該進(jìn)樣系統(tǒng)。
2. 毛細(xì)管清洗裝置和緩沖液填充系統(tǒng):
酸堿活化毛細(xì)管能夠使CE 分離結(jié)果得到保證,另外,其中一個(gè)必須進(jìn)行的步驟便是填充緩沖液。通常通過正壓或負(fù)壓來實(shí)現(xiàn)毛細(xì)管清洗或緩沖液,對(duì)于系統(tǒng)的密閉性有一定的要求。商品化的儀器的壓力控制機(jī)構(gòu)由毛細(xì)管清洗過程與進(jìn)樣過程共用,然而進(jìn)樣精度會(huì)受到計(jì)時(shí)以分鐘為單位的影響。

3. 毛細(xì)管及其溫控系統(tǒng):
CE 分析實(shí)驗(yàn)過程中,焦耳熱效應(yīng)會(huì)使得分離效率降低,并且在一定程度上會(huì)對(duì)分析結(jié)果的重復(fù)性產(chǎn)生影響。所以為了焦耳熱效應(yīng)同時(shí)對(duì)外界溫度變化對(duì)毛細(xì)管分離結(jié)果造成的影響有所規(guī)避,需要設(shè)計(jì)一個(gè)溫度可調(diào)的恒溫環(huán)境。比較常用的溫控方式為風(fēng)冷和液冷兩種。風(fēng)冷是通過控制空氣對(duì)流實(shí)現(xiàn)控溫,然而效果不理想。液冷控溫是在恒溫液體中放入毛細(xì)管置,冷卻介質(zhì)通常是水,冷卻或恒溫由專門的制冷系統(tǒng)進(jìn)行并經(jīng)由流路進(jìn)行循環(huán)。液冷控溫具有非常良好的效果,因此,液冷控溫方式較為常用。
4. 檢測(cè)系統(tǒng):
CE 使用Z廣泛的檢測(cè)器微紫外檢測(cè)器,其采用柱上檢測(cè)方式,操作方便,結(jié)構(gòu)簡單,使用之前需要在適當(dāng)位置剝離毛細(xì)管外壁涂層的彈性保護(hù)層聚酰亞胺膜,將透明部分對(duì)準(zhǔn)光路。實(shí)現(xiàn)涂層剝離的方法包括燒、硫酸腐蝕或者刀片刮除等。
對(duì)儀器的一般要求
對(duì)于所有采用毛細(xì)管電泳法測(cè)定的品種,分析模式、檢測(cè)方法(如紫外光吸收或熒光檢測(cè)器的波長、電化學(xué)檢測(cè)器的外加電位等)應(yīng)該嚴(yán)格遵守該品種項(xiàng)下的規(guī)定,其他如毛細(xì)管內(nèi)徑、長度、緩沖液的pH值、濃度、改性劑添加量、運(yùn)行電壓或電流的大小、運(yùn)行的時(shí)間長短、毛細(xì)管的溫度等的測(cè)定參數(shù)都可以對(duì)該品種項(xiàng)下規(guī)定的數(shù)據(jù)進(jìn)行參考,以所用儀器的條件和預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果為依據(jù)進(jìn)行必要的調(diào)整。
緩沖液為電極槽和毛細(xì)管內(nèi)的溶液,能夠?qū)⒂袡C(jī)溶劑加入成為改性劑,和將表面活性劑加入,叫做運(yùn)行緩沖液。在使用運(yùn)行緩沖液之前應(yīng)該脫氣。遷移時(shí)間是指電泳譜中各成分的出峰時(shí)間。膠束之于膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜如同固定相之于液相色譜。然而其隨電滲流在毛細(xì)管內(nèi)遷,因此隨膠束的流出,容量因子為無窮大的成分也終會(huì)流出,其他各種參數(shù)均和液相色譜所用的一致。
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