由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成,為微生物、植物或動(dòng)物(或組織)的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),被稱為培養(yǎng)基。通常,碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)都屬于培養(yǎng)基的成分。6.因?yàn)榕囵B(yǎng)基所需的配置原料以及使用的要求的不一樣,貯存保管方面也稍有差異。通常,培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,容易受到細(xì)菌的污染或者變質(zhì)分解。所以培養(yǎng)基必須保管在防潮、避光、陰涼的地方。下面讓小編帶你了解一下細(xì)胞培養(yǎng)基的基本介紹。
合成培養(yǎng)基
1951年,供動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基(MEM)被厄爾開(kāi)發(fā)出來(lái)了,合成培養(yǎng)基具有相當(dāng)多的種類,合成培養(yǎng)基成分已知,方便控制實(shí)驗(yàn)的條件。然而尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代天然培養(yǎng)基的未知成分,所以,細(xì)胞培養(yǎng)中,還必須將一定量的天然培養(yǎng)基成分加入到使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基內(nèi),從而使合成培養(yǎng)基的不足得到彌補(bǔ)。將小牛血清加入是Z普遍的做法。

動(dòng)物血清有著非常復(fù)雜的成分,各種生物大小分子混合在一起,至今尚未搞清楚,有些成分,血清有利于細(xì)胞生長(zhǎng),然而會(huì)為后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)帶來(lái)麻煩。除此以外,高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限,成本昂貴,對(duì)它的大量使用起到了限制的作用。無(wú)血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清,將細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子,激素等加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需的溶液
抗生素溶液:1)制霉菌素:濃度25U/ml,小瓶分裝,每瓶一次用完。2)青、鏈霉素,每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。3)卡那霉素:終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。
細(xì)胞消化液:膠原酶溶液、EDTA溶液、胰蛋白酶溶液。
PH調(diào)整液:HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)與7.4%、5.6%、3.7%的NaHCO3溶液。
平衡鹽水(BSS):常用的BSS基礎(chǔ)溶液為Earle液與Hanks液。
細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分是氨基酸,有12種氨基酸是細(xì)胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。這些氨基酸包括類胰島素生長(zhǎng)因子(IGFl、IGF2)、增殖刺激因子(MSA)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等多種生長(zhǎng)因子、生長(zhǎng)激素以及有胰島素等。
另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分是膠原與水解乳蛋白。膠原是從動(dòng)物中提取的,其能夠?qū)?xì)胞表面特性有所改善從而對(duì)其附著生長(zhǎng)具有促進(jìn)的作用。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物,富含氨基酸。通常配制成0.5%溶液,微酸性。
牛血清和馬血清是Z常使用的動(dòng)物血清,牛血清又包括犢牛血清與胎牛血清,其中胎牛血清來(lái)源少,價(jià)格昂貴。犢牛血清要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛,因?yàn)椴溉楹蟮男∨Q逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分。蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等為血清中已知的主要成分。
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