瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對(duì)于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。

瓊脂糖凝膠電泳步驟

1.緩沖液的制備

（1）TAE或者TBE為常用的緩沖液，PH值在6-9之間。

（2）不管是TAE或者TBE均含有EDTA，其能夠?qū)⒍r(jià)金屬離子去除。

2.瓊脂糖膠板的制備

（1）在三角瓶中放入一定量的瓊脂糖，將電泳緩沖液加入其中，使一定濃度的瓊脂糖溶液（PCR產(chǎn)物：1.2％；基因組DNA：0.8％）配制完成。

（2）在制膠架上插上選好的梳子，在制膠架中放入選好的凝膠盤(pán)。

（3）將溶液加熱煮沸澄清，冷卻到60攝氏度將10毫克/毫升EB加入其中，搖勻后往制膠架中倒入。

（4）放置在室溫環(huán)境中30-40min等到凝膠聚合后，將梳子輕輕拔掉（注意：先拔一側(cè)，不然垂直拔除產(chǎn)生真空造成部分凝膠帶出）。

3.將電泳緩沖液加入到兩邊的槽中，使得凝膠被全部浸沒(méi)，液面應(yīng)該比膠面高1毫米。

4.在梳井內(nèi)加樣，注意預(yù)防氣泡被引入。

5.將上蓋蓋好，將電泳儀接通。

6.電壓需要按照實(shí)際情況來(lái)選擇比較合適的。長(zhǎng)膠需要比較高的電壓，然而高電壓會(huì)縮短電泳的時(shí)間，發(fā)熱高，分辨率低，其對(duì)于樣品的篩選或者樣品純度的檢查很適合。相反，電壓低，發(fā)熱少，分辨率比較高，然而耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)。

7.在完成電泳實(shí)驗(yàn)后，應(yīng)當(dāng)首先將電泳儀關(guān)閉，然后將電源線(xiàn)拔除，再將電泳槽上蓋打開(kāi)，將凝膠托盤(pán)取出來(lái)。