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膜片鉗

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膜片鉗技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)

更新時(shí)間:2025-10-22 23:11:32 類型:膜片鉗的特點(diǎn) 閱讀量:4031
導(dǎo)讀:膜片鉗技術(shù)是通過微玻管電極接觸細(xì)胞膜,用千兆歐姆以上的阻抗使之封接,在電學(xué)上分隔和電極尖開口處相接的細(xì)胞膜的小區(qū)域以及其周圍,在此基礎(chǔ)上固定點(diǎn)位,對(duì)這膜片上的離子通道的離子電流進(jìn)行監(jiān)測(cè)記錄的方法。

1976年德國馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創(chuàng)建了膜片鉗技術(shù)(patch clamp recording technique)。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細(xì)胞膜單一的或多個(gè)的離子通道分子活動(dòng)的技術(shù)。它和基因克隆技術(shù)(gene cloning)并架齊驅(qū),給生命科學(xué)研究帶來了巨大的前進(jìn)動(dòng)力。


傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)優(yōu)點(diǎn):

1.對(duì)細(xì)胞膜通道電流的記錄具有很高的分辨率,信息含量大。

2.靈活性好,既可以改變細(xì)胞膜電位,又能夠控制改變細(xì)胞內(nèi)外溶液的成分。

3.應(yīng)用廣泛:能夠分析檢測(cè)一切離子通道類型。

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4.可以記錄到pA級(jí)電流的變化以及單通道開關(guān)狀態(tài),所以具有非常高的靈敏性。

5.與熒光標(biāo)記與反射性標(biāo)記等手段相比具有更加高的精確性和權(quán)威性。


傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)缺點(diǎn):

1.僅可以對(duì)單通道進(jìn)行操作,通量低,不能夠?qū)?xì)胞之間的通信與細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行研究,難以方便的換取細(xì)胞內(nèi)液。

2.在檢測(cè)的過程中,因?yàn)橥ǖ辣磉_(dá)少而導(dǎo)致丟失數(shù)據(jù)點(diǎn)造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,需要大量的進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

3.要求操作者需要極高的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。


全自動(dòng)膜片鉗技術(shù)優(yōu)點(diǎn):

1.全自動(dòng)膜片鉗技術(shù)效率非常高,是傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)效率的20-300倍。

2.自動(dòng)化,可以節(jié)省實(shí)驗(yàn)人員的很多時(shí)間和精力。如尋找細(xì)胞,形成封接,破膜等整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作全都實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。

3.不再需要傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)所需的顯微鏡,微操縱器,微電極拉制儀,屏蔽網(wǎng),灌流、浴漕等等。

4.人為操作的誤差少,獲得的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高。

5.對(duì)于藥物的加樣設(shè)計(jì)表現(xiàn)優(yōu)異。


全自動(dòng)膜片鉗技術(shù)缺點(diǎn):

1.只能在懸浮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)使用。

2。僅能對(duì)全細(xì)胞模式、穿孔膜片鉗模式、細(xì)胞貼附式單通道模式進(jìn)行記錄,而不可以對(duì)其他模式進(jìn)行記錄。

3.和手動(dòng)膜片鉗相比,儀器及耗材價(jià)格更貴。


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