紫外可見分光光度計是一種應用很廣泛的分析儀器。它的應用涉及制藥、yi療衛(wèi)生、化學化工、環(huán)保、地質、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學、農業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領域中的科研、教學，以及生產中的質量控制，原材料和產品檢驗等各個方面。紫外-可見分光光度計可以用于定性分析、純度檢查、結構分析、絡合物組成分析、穩(wěn)定常數的測定、反應動力學研究等。

根據日常使用經驗，提出了紫外可見分光光度計使用中應注意的幾個問題，測量結果準確與否，不僅與樣品及儀器的使用有關，而且與儀器的保養(yǎng)與維護直接相關。嚴格執(zhí)行儀器的日保養(yǎng)、周保養(yǎng)，月保養(yǎng)，可以減少問題的發(fā)生，為計量工作提供及時、準確、可靠的檢測結果。

紫外分光光度計正確操作流程：

1.接通電源，打開分光光度計開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。

2.將靈敏度開關調至“1”檔(若零點調節(jié)器調不到“0”時，需選用較gao檔。)

3.根據所需波長轉動波長選擇鈕。

4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使空白管對準光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調節(jié)零點調節(jié)器，使讀數盤指針指向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋，調節(jié)“100”調節(jié)器，使空白管的t=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7.比色完畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

紫外可見分光光度計的日常操作經驗

1、幾乎所有的光譜分析儀器(如紫外可見分光光度計、原子吸收分光光度計、一些儀器光度檢測器)都是依據的朗伯-比耳定律。

2、很多藥品要求相對誤差在1%以內。

3、若石英比色皿QC的配對誤差為0.1%T，則給使用者帶來的分析誤差(△A/A)為0.5%。若QC的配對誤差為0.5%，則分析誤差為3%。

4、檢驗石英比色皿QC的配對誤差時，QC中應裝滿蒸餾水或溶劑。

5、用超聲波清洗比色皿時，一般用20W的清洗玻璃儀器的超聲波清洗30分鐘，就能解決題目，但盡不能用大功率超聲波來清洗比色皿，會損壞比色皿，特別是對那些用黏結方法制作的比色皿。

6、分析測試時，注進比色皿的溶液不要太滿，一般到比色皿高度的2/3即可。

7、一般的光電檢測器如硅光電池、光電管、光電倍增管有疲憊效應，應避免長時間照射、預熱時，打開樣品室蓋，防止光電檢測器受光疲憊。

8、A.owen在1988年指出：“吸光度丈量的正確度，取決于儀器的SBW與試樣的自然帶寬NBW的比率。SBW/NBW≤0.1時,吸光度正確度可高達99.5%。NBW≥20nm時，2nm的SBW對于吸光度的正確度測試是足夠的，可滿足大約99%的日常應用?！?/p>

9、我國藥典規(guī)定，用于藥檢的紫外可見分光光度計的SBW一定要求≤2nm。

10、光譜帶寬以nm計，狹縫寬度以mm計。

11、波長正確度在某種程度上，決定光度正確度。

12、噪聲限制紫外可見分光光度計對樣品分析濃度的下限，并直接影響儀器的信噪比。雜散光直接限制被分析測試樣品濃度的上限。

13、雜散光對參比光束和樣品光束的影響是相同的。

14、在要求較高的分析測試工作中，紫外可見分光光度計的雜散光應優(yōu)于0.05%，這樣可保證儀器有較寬的線性動態(tài)范圍。

15、W.slavin以為，雜散光通常在紫外區(qū)。實際測試時，應檢測整個光譜區(qū)的兩個端點的雜散光。

16、紫外可見分光光度計的光度噪聲與掃描速度有很大關系。一般來講，掃描速度快的紫外可見分光光度計的噪聲也大。

17、紫外可見分光光度計的基線平直度是指每個波長上的光速噪聲。測基線平直度時，掃描速度用慢速。

18、紫外可見分光光度計的線性動態(tài)范圍取決于儀器的雜散光與噪聲。

19、在常規(guī)分析中，對大多數試樣濃度大多取10～100ug/ml，相當0.3～0.7Abs左右Z佳。在試樣量答應時，試樣應選擇靠近Z佳吸光度值(0.434Abs)的濃度。

20、為了得到更好的光度正確度，在分析過程中，特別要留意選擇試樣的Zda吸收峰處的波長作為測試波長。

21、選擇光譜帶寬的原則是，在一定的實驗條件下，測試吸光度隨光譜帶寬的變換，以獲得Zda吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。

22、判定被測試樣是否有光解現象，首先要看測試數據的變化規(guī)律，對同一個試樣多次丈量，看其吸光度值是否都是向同一個方向變化，假如是，就可能有光解現象。

紫外可見分光光度計使用注意事項

開機前注意事項

(1)儀器應安裝在太陽不能直接照射到的地方，室內陽光太強會影響儀器的使用壽命。

(2)保證有適當的實驗環(huán)境，恒溫20℃，相對濕度20%～80%，這是儀器正確使用和維護的前提。

(3)電源與儀器、儀器與計算機、計算機與打印機要連接完好，避免通電時對儀器造成損傷。

(4)確保樣品室內沒有以前遺留的測量樣品。

開機后注意事項

(1)測量工作開始前，首先應開啟計算機，待計算機完全啟動后，打開儀器，進入測量工作程序。儀器自動校準。預熱20min以上方可開始測量工作，否則儀器不穩(wěn)定。測量過程中零點有0.02nm的變動就會影響測量結果的準確。

(2)儀器預熱完畢，開始測量前，檢查儀器波長656.10nm點，測量結果偏差應在±0.08nm內，若超出此范圍，需重新校正儀器。儀器完全由相應的軟件控制(即由計算機控制)，點擊相應的程序，可自動校正。