資料庫
大鼠 IV型膠原 (Co IV) ELISA 檢測試劑盒
-
本文由 上海滬峰化工有限公司 整理匯編
2018-09-19 10:01 449閱讀次數(shù)
文檔僅可預(yù)覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIV抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
登錄或新用戶注冊
請用手機微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機電腦聯(lián)動
更多資料
-
大鼠 IV型膠原 (Co IV) ELISA 檢測試劑盒
- 試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIV抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。[詳細]
-
2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠(Rat)IV型膠原(Co IV)ELISA試劑盒英文說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4Goatanti-RatCollagenTypeIVCollectSampleserumorbloodplasmaStorage:2-8°CPackagesize:96determinationsPRINCIPLEOFTHEMETHODTheCoIVkitisasolidphasephasesandwichenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA).Samples,includingstandardsofknownCoIVconcentrationsandunknownsarepipettedintothesewells.Duringthefirstincubation,theCoIVantigenandabiotinylatedmonoclonalantibodyspecificforCoIVaresimultaneouslyincubated.Afterwashing,theenzyme(streptavidin-peroxydase)isadded.Afterincubationandwashingtoremovealltheunboundenzyme,asubstratesolutionwhichisactingontheboundenzymeisaddedtoinduceacolouredreactionproduct.TheintensityofthiscolouredproductisdirectlyproportionaltotheconcentrationofCoIVpresentinthesamples.REAGENTSPROVIDEDANDRECONSTTTUTIONREAGENTS(Storeat2-8℃)1×96WELLS0.5×96WELLSRECONSTTTUTION96/48-wellsmicrotiterplates10.5Ready-to-usePlastivcover21Ready-to-useStandard:800ng/ml1Vials(0.6ml)0.5Vials(0.3ml)Seereagentspreparationonpage3Blankcontrol1Vials(1.0ml)1Vials(0.5ml)Ready-to-useStandardDiluent1Vials(5ml)1Vials(2.5ml)Ready-to-useBiotinylatedanti-CoIV1Vials(6ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useStreptavidin-HRP1Vials(10ml)1Vials(5.0ml)Ready-to-useWashingBuffer1Vials(20ml)1Vials(10ml)50×concentrateSubstrateA1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useSubstrateB1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useStoppingSolution1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useSampleDiluent1Vials(12ml)1Vials(6.0ml)Ready-to-useMATERIALREQUIREDBUTNOTPROVIDEDlDistilledwaterlPipettes:10ul、50ul、100ul、200ul、1000ul。lVortexmixerandmagneticstirrer.SAFETYlForresearchuseonlylAvoidanyskincontactwithH2SO4andTMB.Incaseofcontact,washthoroughlywater.lDonoteat,drink,smokeorapplycosmeticswherekitreagentsareused.lDonotpipettebymouth.PROCEDURALNOTES/LAB.QUALITYCONTROLlWhennotinuse,kitcomponents首ldbestoredrefrigeratedorfrozenasindicatedonvialsorbottles.Allreagents首ldbewarmedtoroomtemperaturebeforeuse.Lyophilizedstandards首ldbediscardedafteruse.lOncethedesirednumberofstripshasbeenremoved,immediatelyresealthebagtoprotecttheremainingstripsfromedterioration.lCoverorcapallreagentswhennotinuse.lDonotmisorinterchangereagentsbetweendifferentlots.lDonotusereagentsbeyondtheexpirationdateofthekit.lUseacleandisposableplasticpipettetipforeachreagent,standard,orspecimenadditioninordertoavoidcross-contamination,forthedispensingofH2SO4andsubstratesolution,avoidpipetteswithmetalparts.lUseacleanplasticcontainertopreparethewashingsolution.lThoroughlymixthereagentsandsamplesbeforeusebyagitationorswir領(lǐng).lAllresidualwashingliquidmustbedrainedfromthewellsbyefficientaspirationorbydecantationfollowedbytappingtheplateforcefullyonabsorbentpaper.Neverinsertabsorbentpaperdirectlyintothewells.lTheTMBsolutionislightsensitive.Avoidprolongedexposuretolight,also,avoidcontactoftheTMBsolutionwithmetaltopreventcolourdevelopment.WarningTMBistoxicavoiddirectcontactwithhands.Disposeoffproperly.Ifadarkbluecolourdevelopswithinafewminutesafterpreparation,thisindicatesthattheTMBsolutionhasbeencontaminatedandmustbediscarede.Readabsorbanceswithin1houraftercompletionoftheassay.lWhenpipettingreagents,maintainaconsistentorderofadditionfromwell-to-well.Thiswillensureequalincubationtimesforallwells.lRespectincubationtimesdescribedintheassayprocedure.SPECIMENCOLLECTION\PROCESSINGANDSTORAGElSerum---Avoidanyinintentionalstimulationofthecellsbytheprocedure.Usepyrogen\endotoxinfreecollectingtubes.Serum首ldberemovedrapidlyandcarefullyfromtheredcellsafterclothing.Forthat,afterclothing,centrifugeatapproximately1000×gfor10minandremoveserum.lPlasma---EDTA\citrateandheparinplasmacanbeassayed.Spinsamplesat1000×gfor30minremoveparticulates.Harvestplasma.lCellculturesupernatants---Removeparticulatesandaggregatesbyspinningatapproximately1000×gfor10min.lStorage---Ifnotanalyzedshortlyaftercollection,samples首ldbealiquoted(250-500ul)toavoidfreeze-thawcyclesandstoredfrozenat-70℃.Avoidmultiplefreeze-thawcyclesoffrozenspecimens.Whenpossible,avoiduseofbadlyhemolyzedorlipemicsera.Iflargeamountsofparticlesarepresent,this首ldberemovedpriortoassaybycentrifugationorfiltration.lRecommendation---Donotthawbyheatingat37℃or56℃.Thawatroomtemperatureandmakesurethatsampleiscompletelythawedandhomogenousbeforeassaying.PREPARATIONOFREAGENTSlStandards:Standardhavetobereconstituledwiththevolumeofstandardbufferdiluentindicatedonthevial.Thisreconstitutionproducesastocksolutionof800ng/mlCoIV.Allowstandardtostandfor5lminuteswithgentleswir領(lǐng)priortomakingdilutions.Serialdilutionsofstandardmustbemadebeforeeachassysandcannotbestored.800ng/ml(6Standard)Originaldensity50ul。400ng/ml(5Standard)100ul6Standard+100uldiludent200ng/ml(4Standard)100ul5Standard+100uldiludent100ng/ml(3Standard)100ul4Standard+100uldiludent50ng/ml(2Standard)100ul3Standard+100uldiludent25ng/ml(1Standard)100ul2Standard+100uldiludent0ng/mlBlankControl50ul。lWashingbuffer50×concentrate:Dilute50timesindistilledwater.ASSAYMETHODlBeforeuse,mixallreagentsthoroughlywithoutmakingfoam.lDeterminethenumberofmicrowellstripsrequiredtotestthedesirednumberofsamples,plusappropriatenumberofwellsneededforrunningblanksstandards.Eachsample,standardandblank首ldbeassayedinduplicate.Removesufficientmicrowellstripsfromthepouch.lAdd50ulofstandarddiluenttostandardwellsB1,B2,C1,C2,D1,D2,E1,E2,F1,F2.Reconstitutestandardvialwiththeappropriatevolumeasdescribedinthechapterreagentspreparation.Preparation.Pipet100ulofstandardintowellsA1andA2(seeplateschemebelow).Transfer50ulfromA1andA2toB1andB2wells.Mixthecontentsbyrepeatedaspirationsandejections.Takecarenottoscratchtheinnersurfaceofmicrowells.RepatthisprocedurefromthewellsB1,B2towellsC1,C2andfromwellsC1,C2toD1,D2andsooncreatingtwoparallelrowsofCoIVstandarddilutionsranging,Add50ulofstandarddiluenttotheblandwells.lDilutesamples1:1distribing50ulofsampleinto50ulofdilluent,Add50ulofdilutedsampletowells..lAdd50ulofdilutedbiotinylatedanti-CoIVtoallwells.lCoverwithaplatevoverandincubatefor1hourat37℃.lRemovethecoverandwashtheplateasfollows:⑴ aspiratetheliquidfromeachwell,⑵ dispensse0.3mlofwashingsolutionintoeachwell.⑶ Aspirateagainthecontetofeachwellafter0.5minute.⑷ Repeatsteps⑵and⑶threetimes.lDistribute80ulofstreptavidin-HRPsolutiontoallwells,includingblankwells.lCoverandincubate30minat37℃.lRemovethecoverandemptywells,Washmicrowellstripsaccordingtostep,Proceedimmediatelytothenextstep.lAdd50ulSubstrateAandSubstrateBtoeachwell。Incubatefor10minat37℃。lTheenzyme-substratereactionisstoppedbyquicklypipetting50ulofH2SO4.stopreagentintoeachwell,includingtheblankwells,tocompletelyanduniformlyinactivatetheenzyme.ResultsmustberedimmediatelyaftertheadditionofH2SO4.lReadabsorbanceofeachwellonaspectrophotometerusing450nmastheprimarywavelengthandoptionally620nm(610nmto650nmisacceptable)asthereferencewavelength.SUGGESTEDPLATESCHEMEStandardconcentrations(ng/ml)A800800samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleB400400samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleC200200samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleD100100samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleE5050samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleF2525samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleG00samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleHsamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleLIMITATIONSOFTHEPROCEDUREDonotextrapolatethestandardcurvebeyondthemaxstandardcurvepoint.Thedose-responseisnon-linearinthisregionandgoodaccruacyisdifficulttoobtain.CALCULATIONOFRESULTSTheminimumdetectableconcentrationinthisassayisestimatedtobe1.0ng/ml[詳細]
-
2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠IV型膠原(Collagen IV)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠IV型膠原(CollagenIV)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠CollagenIV單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CollagenIV與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠CollagenIV,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,CollagenIV濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CollagenIV濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CollagenIV含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CollagenIV檢測濃度小于10ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠CollagenIV。不與大鼠其它因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
-
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠 IV型膠原檢測試劑盒使用方法
- 大鼠IV型膠原檢測試劑盒使用方法本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIV抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。[詳細]
-
2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
小鼠IV型膠原(Collagen IV)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠IV型膠原(CollagenIV)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CollagenIV單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CollagenIV與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠CollagenIV,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫,在450nm處測OD值,CollagenIV濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CollagenIV濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CollagenIV含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CollagenIV檢測濃度小于10ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠CollagenIV。不與小鼠其它因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
-
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
人IV型膠原 ELISA檢測試劑盒的說明書
- 人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CoIV標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CoIV含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細]
-
2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人 (Human) IV型膠原(CoIV) ELISA 檢測試劑盒
- 人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:尿試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIV抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(ng/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CoIV標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CoIV含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人 (Human) IV型膠原(CoIV) ELISA 檢測試劑盒說明書
- 人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:尿試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIV抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(ng/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CoIV標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CoIV含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
現(xiàn)貨人IV型膠原ELISA檢測試劑盒的說明書
- 人IV型膠原ELISA檢測試劑盒試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項人IV型膠原ELISA檢測試劑盒試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人IV型膠原ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。人IV型膠原ELISA檢測試劑盒試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CoIV標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CoIV含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細]
-
2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠DPP-4單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DPP-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠DPP-4,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,DPP-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DPP-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1:5稀釋(取50ul,加標本稀釋液200ul,稀釋5倍)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)DPP-4含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DPP-4檢測濃度小于1.6ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠DPP-4。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
-
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人III型膠原 (Co III)ELISA檢測試劑盒
- 人III型膠原 (Co III)ELISA檢測試劑盒[詳細]
-
2024-09-11 17:56
其它
-
馬弗爐IV
- 馬弗爐IV[詳細]
-
2024-09-18 06:19
安裝說明
-
人 (Human) II型膠原 (Co II) ELISA 檢測試劑盒
- 人 (Human) II型膠原 (Co II) ELISA 檢測試劑盒[詳細]
-
2024-09-14 04:32
安裝說明
-
人 (Human) III型膠原 (Co III)ELISA檢測試劑盒
- 人 (Human) III型膠原 (Co III)ELISA檢測試劑盒[詳細]
-
2024-09-11 18:00
報價單
-
再生基因蛋白IV(REG-4)檢測試劑盒
- 再生基因蛋白IV(REG-4)檢測試劑盒[詳細]
-
2015-08-07 00:00
選購指南
-
大鼠Ⅱ型膠原 (ColⅡ)定量檢測試劑盒(ELISA)
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)定量檢測試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中Ⅱ型膠原(ColⅡ)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)單克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標準品0.6mL8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說明書1份5標準品稀釋液6mL11封板膜2張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:8、4、2、1、0.5、0.25μg/L【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱標準規(guī)格酶標儀精密移液器及一次性吸頭蒸餾水一次性試管吸水紙【操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)?!緲颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。【注意事項】1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。6、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。7、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。8、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下?!静僮鞒绦蚩偨Y(jié)】準備試劑,樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】0.25μg/L-8μg/L【規(guī)格】96T/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6個月[詳細]
-
2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
太陽電池IV測試儀
- 太陽電池IV測試儀[詳細]
-
2012-12-10 00:00
安裝說明
-
人 (Human) III型膠原 (Co III) ELISA 檢測試劑盒說明書
- 人(Human)III型膠原(CoIII)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:CoIII試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIII濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIII和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIII的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIII抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(ng/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CoIII標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CoIII含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細]
-
2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠型膠原(Col )ELISA試劑盒
- 大鼠型膠原(Col )ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-11 00:00
選購指南
-
大鼠型膠原(Col )ELISA試劑盒
- 大鼠型膠原(Col )ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-11 00:00
安裝說明
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權(quán) , 頁面內(nèi)容不得以任何形式進行復(fù)制
參與評論
登錄后參與評論