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大鼠二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒說明書
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2018-09-13 10:00 234閱讀次數(shù)
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電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠DPP-4單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DPP-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠DPP-4,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,DPP-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DPP-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:5稀釋(取50ul,加標本稀釋液200ul,稀釋5倍)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應DPP-4含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DPP-4檢測濃度小于1.6ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠DPP-4。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
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大鼠二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠DPP-4單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DPP-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠DPP-4,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,DPP-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DPP-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:5稀釋(取50ul,加標本稀釋液200ul,稀釋5倍)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應DPP-4含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DPP-4檢測濃度小于1.6ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠DPP-4。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒說明書
- 人二肽基肽酶IV(DPP-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人DPP-4單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DPP-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人DPP-4,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,DPP-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DPP-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:5稀釋(取50ul,加標本稀釋液200ul,稀釋5倍)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應DPP-4含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DPP-4檢測濃度小于1.6ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人DPP-4。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠二肽基肽酶(DPP)ELISA試劑盒
- 大鼠二肽基肽酶(DPP)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-29 13:51
期刊論文
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小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠DPP4單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DPP4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠DPP4,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,DPP4濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DPP4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液至少作1:20稀釋(取10ul,加標本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應DPP4含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DPP4檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠DPP4。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒說明書
- 二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒操作注意事項1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。二肽基肽酶3(DPP3)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlCCL24人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin2規(guī)格:48T/96TCCL11人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1規(guī)格:48T/96TCyPB人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B規(guī)格:48T/96TCyPA人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A規(guī)格:48T/96TCgA人嗜鉻蛋白A規(guī)格:48T/96TpRB人視網(wǎng)膜母細胞瘤YZ蛋白規(guī)格:48T/96TRLR人視黃酸誘導基因/RIG-1樣受體規(guī)格:48T/96TRBP-4人視黃醇結(jié)合蛋白4規(guī)格:48T/96TRBP人視黃醇結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TOXR人食欲素受體規(guī)格:48T/96TOX-B人食欲素/阿立新B規(guī)格:48T/96THGH人生長因子規(guī)格:48T/96TSS人生長抑素規(guī)格:48T/96TGAP-43人生長相關(guān)蛋白43規(guī)格:48T/96TGAP-43人生長相關(guān)蛋白43規(guī)格:48T/96TGH-RF人生長激素釋放因子規(guī)格:48T/96TGHRP-Ghrelin人生長激素釋放肽ghrelin規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2018-10-09 10:00
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小鼠二肽基肽酶(DPP)ELISA試劑盒
- 小鼠二肽基肽酶(DPP)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
產(chǎn)品樣冊
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免費代測人二肽基肽酶-ⅣELISA檢測試劑盒半價
- 本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:DPP-Ⅳ試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).人二肽基肽酶-ⅣELISA檢測試劑盒已知DPP-Ⅳ濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將DPP-Ⅳ和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中DPP-Ⅳ的濃度呈比例關(guān)系。自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:人二肽基肽酶-ⅣELISA檢測試劑盒蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的DPP-Ⅳ標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的DPP-Ⅳ含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-400ng/ml4、敏感度:1.0ng/mlE-(Hu)(02)-05561人幽門螺桿菌細胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)Elisa試劑盒人幽門螺桿菌細胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)Elisa試劑盒Helicobacterpyloricytotoxin-associatedgeneAproteinIgG,HP-CagA-IgGELISAKit,規(guī)格:96T/48TE-(Hu)(02)-05562人粘蛋白/粘液素7(MUC7)Elisa試劑盒人粘蛋白/粘液素7(MUC8)Elisa試劑盒人二肽基肽酶-ⅣELISA檢測試劑盒Mucin-7,MUC7ELISAKit,規(guī)格:96T/48TE-(Hu)(02)-05563人粘蛋白/粘液素C(MUCC)Elisa試劑盒人粘蛋白/粘液素C(MUC6AC)Elisa試劑盒Mucin-5subtypeAC,MUCCELISAKit,規(guī)格:96T/48TE-(Hu)(02)-05564人丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)Elisa試劑盒人丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)Elisa試劑盒AlanineAminotransferase,ALT/GPTELISAKit,規(guī)格:96T/48T[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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半價促銷人二肽基肽酶-Ⅳ酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 本試劑盒僅供研究使用。人二肽基肽酶-Ⅳ酶聯(lián)免疫分析試劑盒檢測范圍:96T62U/L-2500U/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中二肽基肽酶-Ⅳ(DPPⅣ)活性。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人二肽基肽酶-Ⅳ(DPPⅣ)水平。用純化的人二肽基肽酶-Ⅳ(DPPⅣ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入二肽基肽酶-Ⅳ(DPPⅣ),再與HRP標記的二肽基肽酶-Ⅳ(DPPⅣ)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的二肽基肽酶-Ⅳ(DPPⅣ)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人二肽基肽酶-Ⅳ(DPPⅣ)活性濃度。試劑盒組成人二肽基肽酶-Ⅳ酶聯(lián)免疫分析試劑盒標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。人二肽基肽酶-Ⅳ酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠IV型膠原(Collagen IV)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠IV型膠原(CollagenIV)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠CollagenIV單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CollagenIV與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠CollagenIV,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,CollagenIV濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CollagenIV濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應CollagenIV含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CollagenIV檢測濃度小于10ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠CollagenIV。不與大鼠其它因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠(Rat)IV型膠原(Co IV)ELISA試劑盒英文說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4Goatanti-RatCollagenTypeIVCollectSampleserumorbloodplasmaStorage:2-8°CPackagesize:96determinationsPRINCIPLEOFTHEMETHODTheCoIVkitisasolidphasephasesandwichenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA).Samples,includingstandardsofknownCoIVconcentrationsandunknownsarepipettedintothesewells.Duringthefirstincubation,theCoIVantigenandabiotinylatedmonoclonalantibodyspecificforCoIVaresimultaneouslyincubated.Afterwashing,theenzyme(streptavidin-peroxydase)isadded.Afterincubationandwashingtoremovealltheunboundenzyme,asubstratesolutionwhichisactingontheboundenzymeisaddedtoinduceacolouredreactionproduct.TheintensityofthiscolouredproductisdirectlyproportionaltotheconcentrationofCoIVpresentinthesamples.REAGENTSPROVIDEDANDRECONSTTTUTIONREAGENTS(Storeat2-8℃)1×96WELLS0.5×96WELLSRECONSTTTUTION96/48-wellsmicrotiterplates10.5Ready-to-usePlastivcover21Ready-to-useStandard:800ng/ml1Vials(0.6ml)0.5Vials(0.3ml)Seereagentspreparationonpage3Blankcontrol1Vials(1.0ml)1Vials(0.5ml)Ready-to-useStandardDiluent1Vials(5ml)1Vials(2.5ml)Ready-to-useBiotinylatedanti-CoIV1Vials(6ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useStreptavidin-HRP1Vials(10ml)1Vials(5.0ml)Ready-to-useWashingBuffer1Vials(20ml)1Vials(10ml)50×concentrateSubstrateA1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useSubstrateB1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useStoppingSolution1Vials(6.0ml)1Vials(3.0ml)Ready-to-useSampleDiluent1Vials(12ml)1Vials(6.0ml)Ready-to-useMATERIALREQUIREDBUTNOTPROVIDEDlDistilledwaterlPipettes:10ul、50ul、100ul、200ul、1000ul。lVortexmixerandmagneticstirrer.SAFETYlForresearchuseonlylAvoidanyskincontactwithH2SO4andTMB.Incaseofcontact,washthoroughlywater.lDonoteat,drink,smokeorapplycosmeticswherekitreagentsareused.lDonotpipettebymouth.PROCEDURALNOTES/LAB.QUALITYCONTROLlWhennotinuse,kitcomponents首ldbestoredrefrigeratedorfrozenasindicatedonvialsorbottles.Allreagents首ldbewarmedtoroomtemperaturebeforeuse.Lyophilizedstandards首ldbediscardedafteruse.lOncethedesirednumberofstripshasbeenremoved,immediatelyresealthebagtoprotecttheremainingstripsfromedterioration.lCoverorcapallreagentswhennotinuse.lDonotmisorinterchangereagentsbetweendifferentlots.lDonotusereagentsbeyondtheexpirationdateofthekit.lUseacleandisposableplasticpipettetipforeachreagent,standard,orspecimenadditioninordertoavoidcross-contamination,forthedispensingofH2SO4andsubstratesolution,avoidpipetteswithmetalparts.lUseacleanplasticcontainertopreparethewashingsolution.lThoroughlymixthereagentsandsamplesbeforeusebyagitationorswir領(lǐng).lAllresidualwashingliquidmustbedrainedfromthewellsbyefficientaspirationorbydecantationfollowedbytappingtheplateforcefullyonabsorbentpaper.Neverinsertabsorbentpaperdirectlyintothewells.lTheTMBsolutionislightsensitive.Avoidprolongedexposuretolight,also,avoidcontactoftheTMBsolutionwithmetaltopreventcolourdevelopment.WarningTMBistoxicavoiddirectcontactwithhands.Disposeoffproperly.Ifadarkbluecolourdevelopswithinafewminutesafterpreparation,thisindicatesthattheTMBsolutionhasbeencontaminatedandmustbediscarede.Readabsorbanceswithin1houraftercompletionoftheassay.lWhenpipettingreagents,maintainaconsistentorderofadditionfromwell-to-well.Thiswillensureequalincubationtimesforallwells.lRespectincubationtimesdescribedintheassayprocedure.SPECIMENCOLLECTION\PROCESSINGANDSTORAGElSerum---Avoidanyinintentionalstimulationofthecellsbytheprocedure.Usepyrogen\endotoxinfreecollectingtubes.Serum首ldberemovedrapidlyandcarefullyfromtheredcellsafterclothing.Forthat,afterclothing,centrifugeatapproximately1000×gfor10minandremoveserum.lPlasma---EDTA\citrateandheparinplasmacanbeassayed.Spinsamplesat1000×gfor30minremoveparticulates.Harvestplasma.lCellculturesupernatants---Removeparticulatesandaggregatesbyspinningatapproximately1000×gfor10min.lStorage---Ifnotanalyzedshortlyaftercollection,samples首ldbealiquoted(250-500ul)toavoidfreeze-thawcyclesandstoredfrozenat-70℃.Avoidmultiplefreeze-thawcyclesoffrozenspecimens.Whenpossible,avoiduseofbadlyhemolyzedorlipemicsera.Iflargeamountsofparticlesarepresent,this首ldberemovedpriortoassaybycentrifugationorfiltration.lRecommendation---Donotthawbyheatingat37℃or56℃.Thawatroomtemperatureandmakesurethatsampleiscompletelythawedandhomogenousbeforeassaying.PREPARATIONOFREAGENTSlStandards:Standardhavetobereconstituledwiththevolumeofstandardbufferdiluentindicatedonthevial.Thisreconstitutionproducesastocksolutionof800ng/mlCoIV.Allowstandardtostandfor5lminuteswithgentleswir領(lǐng)priortomakingdilutions.Serialdilutionsofstandardmustbemadebeforeeachassysandcannotbestored.800ng/ml(6Standard)Originaldensity50ul。400ng/ml(5Standard)100ul6Standard+100uldiludent200ng/ml(4Standard)100ul5Standard+100uldiludent100ng/ml(3Standard)100ul4Standard+100uldiludent50ng/ml(2Standard)100ul3Standard+100uldiludent25ng/ml(1Standard)100ul2Standard+100uldiludent0ng/mlBlankControl50ul。lWashingbuffer50×concentrate:Dilute50timesindistilledwater.ASSAYMETHODlBeforeuse,mixallreagentsthoroughlywithoutmakingfoam.lDeterminethenumberofmicrowellstripsrequiredtotestthedesirednumberofsamples,plusappropriatenumberofwellsneededforrunningblanksstandards.Eachsample,standardandblank首ldbeassayedinduplicate.Removesufficientmicrowellstripsfromthepouch.lAdd50ulofstandarddiluenttostandardwellsB1,B2,C1,C2,D1,D2,E1,E2,F1,F2.Reconstitutestandardvialwiththeappropriatevolumeasdescribedinthechapterreagentspreparation.Preparation.Pipet100ulofstandardintowellsA1andA2(seeplateschemebelow).Transfer50ulfromA1andA2toB1andB2wells.Mixthecontentsbyrepeatedaspirationsandejections.Takecarenottoscratchtheinnersurfaceofmicrowells.RepatthisprocedurefromthewellsB1,B2towellsC1,C2andfromwellsC1,C2toD1,D2andsooncreatingtwoparallelrowsofCoIVstandarddilutionsranging,Add50ulofstandarddiluenttotheblandwells.lDilutesamples1:1distribing50ulofsampleinto50ulofdilluent,Add50ulofdilutedsampletowells..lAdd50ulofdilutedbiotinylatedanti-CoIVtoallwells.lCoverwithaplatevoverandincubatefor1hourat37℃.lRemovethecoverandwashtheplateasfollows:⑴ aspiratetheliquidfromeachwell,⑵ dispensse0.3mlofwashingsolutionintoeachwell.⑶ Aspirateagainthecontetofeachwellafter0.5minute.⑷ Repeatsteps⑵and⑶threetimes.lDistribute80ulofstreptavidin-HRPsolutiontoallwells,includingblankwells.lCoverandincubate30minat37℃.lRemovethecoverandemptywells,Washmicrowellstripsaccordingtostep,Proceedimmediatelytothenextstep.lAdd50ulSubstrateAandSubstrateBtoeachwell。Incubatefor10minat37℃。lTheenzyme-substratereactionisstoppedbyquicklypipetting50ulofH2SO4.stopreagentintoeachwell,includingtheblankwells,tocompletelyanduniformlyinactivatetheenzyme.ResultsmustberedimmediatelyaftertheadditionofH2SO4.lReadabsorbanceofeachwellonaspectrophotometerusing450nmastheprimarywavelengthandoptionally620nm(610nmto650nmisacceptable)asthereferencewavelength.SUGGESTEDPLATESCHEMEStandardconcentrations(ng/ml)A800800samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleB400400samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleC200200samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleD100100samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleE5050samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleF2525samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleG00samplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleHsamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesamplesampleLIMITATIONSOFTHEPROCEDUREDonotextrapolatethestandardcurvebeyondthemaxstandardcurvepoint.Thedose-responseisnon-linearinthisregionandgoodaccruacyisdifficulttoobtain.CALCULATIONOFRESULTSTheminimumdetectableconcentrationinthisassayisestimatedtobe1.0ng/ml[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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大鼠 IV型膠原 (Co IV) ELISA 檢測試劑盒
- 試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIV抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。[詳細]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
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小鼠IV型膠原(Collagen IV)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠IV型膠原(CollagenIV)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CollagenIV單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CollagenIV與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠CollagenIV,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫,在450nm處測OD值,CollagenIV濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CollagenIV濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入2000ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應CollagenIV含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CollagenIV檢測濃度小于10ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠CollagenIV。不與小鼠其它因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠DAO單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DAO與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠DAO,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,DAO濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DAO濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2U/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000U/L的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2000U/L的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0U/L為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應DAO含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DAO檢測濃度小于2U/L。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠DAO。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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肺炎新生兒血清二肽基肽酶水平的檢測及免疫評價價值的探
- 肺炎新生兒血清二肽基肽酶水平的檢測及免疫評價價值的探[詳細]
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2013-11-02 00:00
產(chǎn)品樣冊
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人HtrA絲氨酸肽酶1 (Htra1)ELISA試劑盒說明書
- 人HtrA絲氨酸肽酶1(Htra1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Htra1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的Htra1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Htra1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,Htra1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中Htra1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):24ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液作1:20稀釋(取10ul,加標本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.3ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入80ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Htra1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Htra1檢測濃度小于0.3ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Htra1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒
- 大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-30 14:15
課件
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大鼠 IV型膠原檢測試劑盒使用方法
- 大鼠IV型膠原檢測試劑盒使用方法本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗CoIV抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。[詳細]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊
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皮膚衍生肽酶YZ因子3(PI3)ELISA試劑盒說明書
- 皮膚衍生肽酶YZ因子3(PI3)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液皮膚衍生肽酶YZ因子3(PI3)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。皮膚衍生肽酶YZ因子3(PI3)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。皮膚衍生肽酶YZ因子3(PI3)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml人chemerinELISAKit,48T/96T人chemerinELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T人c-fosELISAKit,48T/96T人c-fosELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T人c-fosELISAKit,48T/96T人c-fosELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96TCCR-7人CC趨化因子受體7規(guī)格:48T/96TCCR1人CC趨化因子受體1規(guī)格:48T/96TC/EBPε人CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε規(guī)格:48T/96TC/EBPδ人CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ規(guī)格:48T/96TC/EBPβ人CCAAT增強子結(jié)合蛋白β規(guī)格:48T/96TC/EBPα人CCAAT增強子結(jié)合蛋白α規(guī)格:48T/96TCREB人cAMP反應元件結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TCREB人cAMP反應元件結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TBF人B因子規(guī)格:48T/96TBCR人B細胞受體規(guī)格:48T/96TBCGF人B細胞生長因子規(guī)格:48T/96TBcl-2人B細胞淋巴瘤因子2規(guī)格:48T/96TBLNK人B細胞連接蛋白規(guī)格:48T/96TBAFF-R人B細胞活化因子受體規(guī)格:48T/96TBCDF人B細胞分化因子規(guī)格:48T/96TBLC-1/CXCL13人B-淋巴細胞趨化因子1規(guī)格:48T/96TBid人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白規(guī)格:48T/96TBAX人Bcl-2相關(guān)X蛋白規(guī)格:48T/96TASP人A組鏈球菌菌壁多糖抗體規(guī)格:48T/96TAP12人apelin12規(guī)格:48T/96TAGRP人Agouti相關(guān)蛋白規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人REG-4單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的REG-4與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人REG-4,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,REG-4濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中REG-4濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):5ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應REG-4含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的REG-4檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人REG-4。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.2%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人IV型膠原 ELISA檢測試劑盒的說明書
- 人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒試驗原理:CoIV試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CoIV濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CoIV和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CoIV的濃度呈比例關(guān)系。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人(Human)IV型膠原(CoIV)ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的CoIV標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的CoIV含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細]
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2018-09-14 10:00
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