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大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解
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2018-10-23 10:30 372閱讀次數(shù)
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大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。用純化的大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的VEGF抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)濃度。大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解
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大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解
- 大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。用純化的大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的VEGF抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)濃度。大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。大鼠血管內(nèi)皮生長因子實驗方法講解[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊
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大鼠血管內(nèi)皮生長因子檢測試劑盒
- 大鼠血管內(nèi)皮生長因子檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2016-05-17 00:00
其它
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大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒
- 大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒廣銳生物-國內(nèi)高、優(yōu)Elisa試劑盒供應(yīng)商本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。用純化的大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的VEGF抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)濃度。大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為240ng/L,160ng/L,80ng/L,40ng/L,20ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊
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大鼠血管內(nèi)皮生長因子A ELISA檢測試劑盒說明書
- 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被血管內(nèi)皮生長因子A(VEGF-A)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子A(VEGF-A)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細(xì)]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠血管內(nèi)皮生長因子ELISA試劑盒使用說明書
- 大鼠血管內(nèi)皮生長因子ELISA試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2024-09-29 05:33
標(biāo)準(zhǔn)
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人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書
- 人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。[詳細(xì)]
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2024-09-05 13:32
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雞血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)試劑盒
- 雞血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)試劑盒[詳細(xì)]
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2016-09-03 00:00
專利
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血管內(nèi)皮生長因子說明書檢測說明
- 血管內(nèi)皮生長因子說明書檢測說明本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T30pg/ml-1200pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。用純化的人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(2400pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。1200pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液600pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液300pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液75pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒說明書
- 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2016-07-25 00:00
安裝說明
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人血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)酶聯(lián)免疫分析
- 人ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。用純化的人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(2400pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個人ELISA試劑盒標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)試劑盒說明書
- 人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T30pg/ml-1200pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。用純化的人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(2400pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止1200pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液600pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液300pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液75pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月elisa試劑盒價格48次1200元,96次2200元標(biāo)本收集方法:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。5.培養(yǎng)細(xì)胞檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。6.組織標(biāo)本切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。本公司試劑盒種類齊全,包括人、大鼠、小鼠、兔、羊、馬、牛、豚鼠、猴、魚、植物、食品等,近千種試劑盒已經(jīng)投入市場,為廣大科研工作者所使用,備受客戶的青睞本公司聯(lián)系方式:技術(shù)部13636351217銷售部021-60520498歡迎各位老師前來咨詢訂購。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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犬血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
- 犬血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。[詳細(xì)]
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2023-08-18 11:43
應(yīng)用文章
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血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒說明
- 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒說明[詳細(xì)]
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2024-09-29 04:23
操作手冊
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Zxin小鼠血管內(nèi)皮生長因子試劑盒操作手冊
- Zxin小鼠血管內(nèi)皮生長因子試劑盒操作手冊--上海滬鼎生物一、實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。用純化的小鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)濃度。二、標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。標(biāo)本收集:1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。4.標(biāo)本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,3-6月內(nèi)檢測。在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,**-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。三、“小鼠血管內(nèi)皮生長因子試劑盒"操作示意圖操作指南:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果四、注意事項1.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。產(chǎn)品說明:本試劑盒僅供研究使用。[詳細(xì)]
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2024-10-01 21:24
產(chǎn)品樣冊
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人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-10-13 00:00
其它
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人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析
- ELATS試劑盒實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)水平。用純化的人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(480pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個ELATS試劑盒標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。ELATS試劑盒操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。E-(Hu)(03)-04402人柯薩奇病毒(CoxV)抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Coxsackievirus(CoxV)antibody(IgG)ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04403人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶(tTG)抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgG)ELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04404人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶(tTG)抗體(IgA)elisa試劑盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgA)ELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04405人抗著絲點抗體(ACA)elisa試劑盒,英文名:Anti-centromereAntibody,ACAELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04406人抗轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgGELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04407人抗轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶抗體(IgA)elisa試劑盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04408人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)IgMelisa試劑盒,英文名:anti-neutrophilcytoplasmicantibody,cANCAIgMELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04409人抗中性粒/ZX體抗體(ACA)elisa試劑盒,英文名:anti-centrolandcentrosomeantibody,ACAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04410人抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)抗體elisa試劑盒,英文名:proliferatingcellnuclearantigen(PCNA)antibodyELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04411人抗YZ素B抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:anti-InhibinBantibodyIgGElisakit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04412人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)elisa試劑盒,英文名:anti-hnRNP-ab/anti-RA33-abELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04413人抗胰島素受體抗體(AIRA)elisa試劑盒,英文名:anti-insulinreceptorantibody,AIRAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04414人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgM,PA-IgMELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04415人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgG(PA-IgG)ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04416人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgA,PA-IgAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04417人抗血小板抗體(anti-PAAb)elisa試劑盒(半定量),英文名:anti-PAAbELISAKit(Semi-quantitative),規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04418人抗血小板抗體(anti-PAAb)elisa試劑盒,英文名:anti-plateletantibody,anti-PAAbELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04419人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)elisa試劑盒,英文名:anti-thymocyteglobulin,ATGELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04420人抗信號識別顆粒54kDa蛋白(SRP54)抗體elisa試劑盒,英文名:antisignalrecognitionparticle54kDaprotein(SRP54)antibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04421人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體elisa試劑盒,英文名:myocardialβ1receptor(MB1R)autoantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04422人抗小鼠抗體(HAMA)elisa試劑盒,英文名:anti-mouseantibody,HAMAELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04423人抗小腦(CE)自身抗體elisa試劑盒,英文名:anticerebellum(CE)autoantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04424人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體elisa試劑盒,英文名:smallnuclearribonucleoprotein(snRNP/Sm)antibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04425人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)elisa試劑盒,英文名:anti-mitochondrialantibodyM2subtype,AMA-M2ELISAkit,規(guī)格:48T/96T[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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猴血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- www.biokanu.com猴血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定猴血清,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中猴血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF))水平。用純化的猴血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)抗原,再與HRP標(biāo)記的VEGF抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的VEGF呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中猴血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)抗原濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:1350pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為900pg/ml,600pg/ml,300pg/ml,150pg/ml,75pg/ml)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測范圍:30pg/ml-1000pg/ml保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)elisa試劑盒
- 人血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)elisa試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-11 17:49
其它
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人血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-10-13 00:00
其它
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人血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)ELISA試劑盒使用說明書
- 人血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)ELISA試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2015-04-20 00:00
實驗操作
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