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Zxin小鼠血管內皮生長因子試劑盒操作手冊

本文由 上海滬鼎生物科技有限公司 整理匯編

2024-10-01 21:24 445閱讀次數(shù)

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Zxin小鼠血管內皮生長因子試劑盒操作手冊--上海滬鼎生物一、實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠血管內皮生長因子(VEGF)水平。用純化的小鼠血管內皮生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內皮生長因子(VEGF),再與HRP標記的血管內皮生長因子(VEGF)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內皮生長因子(VEGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠血管內皮生長因子(VEGF)濃度。二、標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。標本收集:1.收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標本。3.標本應清澈透明,懸浮物應離心去除。4.標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內,避免反復凍融,3-6月內檢測。在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,**-70℃凍存?zhèn)溆?。標本應避免反復凍融。三、“小鼠血管內皮生長因子試劑盒"操作示意圖操作指南:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果四、注意事項1.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。2.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。3.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。產品說明:本試劑盒僅供研究使用。

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