本文由 沈陽佳士科商貿(mào)有限公司 整理匯編

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  引言山羊絨是毛紡工業(yè)的原料，素有“軟黃金”之稱。我國羊絨產(chǎn)量居世界首位，生產(chǎn)大約75%的山羊絨，是羊絨生產(chǎn)與加工大國，在國際羊絨產(chǎn)業(yè)占據(jù)著重要地位。近年來山羊絨逐漸產(chǎn)生了變異分為羊毛纖維、兩型毛纖維、二細(xì)毛纖維、以及羊絨纖維。山羊絨變異后特別是代表優(yōu)質(zhì)山羊絨的特性指標(biāo)-細(xì)度增加，為洗毛、分梳、染色等加工工藝帶來了困難，這些問題已經(jīng)影響到了山羊絨制品質(zhì)量，影響到了山羊絨的加工性能和制品的出口，給我國山羊絨產(chǎn)業(yè)帶來了嚴(yán)重的負(fù)面影響。山羊絨變異后表面與內(nèi)部結(jié)構(gòu)均發(fā)生改變，化學(xué)性質(zhì)也有所不同，為更GX、準(zhǔn)確地區(qū)分毛與絨，不僅需要從纖維的粗細(xì)、質(zhì)量的輕重、表面鱗片、手感等方面綜合分析變異山羊絨纖維的結(jié)構(gòu)，還需要對表面與內(nèi)部的物質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入研究。在結(jié)構(gòu)表征方面，從20世紀(jì)70年代就有蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)表征方面的研究報(bào)道，但實(shí)現(xiàn)定量分析仍具有一定難度，這就需要采用新的表征手段。本公司采用拉曼光譜分析技術(shù)探究四種變異山羊絨纖維的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)，具有高分辨率、高靈敏度、無損傷、不接觸樣品等性能，以及樣品用量少、無需樣本處理、測試時(shí)間短等優(yōu)勢，已經(jīng)成為新一代表征分子結(jié)構(gòu)的技術(shù)手段。技術(shù)優(yōu)勢拉曼光譜分析技術(shù)是依據(jù)散射光來獲得物質(zhì)信息的分子光譜技術(shù)，是由于晶格振動、電荷密度起伏、自旋密度起伏、電子躍遷以及它們的耦合等因素引起的。當(dāng)一束單色光照射到樣品上后，分子可以使入射光發(fā)生散射。大部分光只是改變方向發(fā)生散射，而光的頻率仍與激發(fā)光的頻率相同，這種散射稱為瑞利散射；少部分光不僅改變了光的傳播方向，而且散射光的頻率也改變了，不同于激發(fā)光的頻率，稱為拉曼散射。散射光與入射光之間的頻率差v稱為拉曼位移，拉曼位移與入射光頻率無關(guān)，它只與散射分子本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)。拉曼散射是由于分子極化率的改變而產(chǎn)生的。拉曼位移取決于分子振動能及的變化，不同化學(xué)鍵或基團(tuán)有特征的分子振動，ΔE反映了指定能級的變化，因此與之對應(yīng)的拉曼位移也是特征的。這是拉曼光譜可以作為分子結(jié)構(gòu)定性分析的依據(jù)。激光顯微拉曼光譜儀是集光譜學(xué)、化學(xué)計(jì)量學(xué)、探測技術(shù)以及計(jì)算機(jī)技術(shù)為一體的高新技術(shù)，具有樣品用量少、無樣本處理、無損傷、無接觸、測試時(shí)間短、重復(fù)性好等優(yōu)良性能，可以對絕大多數(shù)的有機(jī)、無機(jī)化合物進(jìn)行無損表征。變異山羊絨纖維屬于蛋白質(zhì)纖維，激光顯微拉曼光譜技術(shù)在研究變異山羊絨纖維具有以下優(yōu)勢:1）無損傷檢測，不破壞纖維結(jié)構(gòu)；2）靈敏度高，譜峰信息豐富；3）拉曼光譜可以表征蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)，如，胱氨酸、肽鍵中的酞胺Ⅰ帶和酞胺Ⅲ帶等信息；4）變異山羊絨纖維具有非極性功能基團(tuán)、芳香族氨基酸的強(qiáng)譜帶。實(shí)驗(yàn)儀器樣品：4種變異山羊絨纖維試驗(yàn)設(shè)備：北京卓立漢光儀器有限公司研制的“FinderVista”顯微共聚焦拉曼光譜儀系統(tǒng)；532nm激發(fā)光源進(jìn)行激發(fā)；積分時(shí)間為3s，掃描尺寸為100X物鏡。數(shù)據(jù)分析在一定條件下，拉曼特征峰強(qiáng)度與待測物濃度成正比，但是，激光功率、測量參數(shù)、外界環(huán)境等對拉曼特征峰強(qiáng)度均具有一定影響，因此，不能利用拉曼的強(qiáng)度判斷物質(zhì)的含量。變異山羊絨纖維1450cm-1波數(shù)的拉曼特征峰主要由氨基酸側(cè)鏈上CH2和CH3的彎曲振動引起，不受肽鏈主鏈構(gòu)象變化的影響。為比較變異山羊絨纖維的拉曼強(qiáng)度差異，選該譜帶為內(nèi)標(biāo)，采用峰面積比法，分析變異山羊絨纖維表面與內(nèi)部縱向剖析的拉曼光譜特征對于變異山羊絨纖維的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的拉曼光譜特征峰，根據(jù)已有文獻(xiàn)，可以解釋酰胺帶、S-S鍵帶、酪氨酸、胱氨酸等譜峰帶的信息。828cm-1：弱，酪氨酸振動；851cm-1：中等強(qiáng)度，酪氨酸雙峰譜帶，該雙峰譜帶強(qiáng)度比值的變化反映了酪氨酸化學(xué)環(huán)境的變化；935cm-1：肽鏈主鏈螺旋的C-C骨架伸展振動；1001.77cm-1：色氨酸與丙氨酸共同的搖擺振動晶帶，由于色氨酸含量很少及不敏感性，該峰主要與苯丙氨酸有關(guān)，難以反映出色氨酸含量的變化；1031cm-1：弱，苯基丙氨酸振動；變異山羊絨纖維的化學(xué)結(jié)構(gòu)主要是角朊蛋白，由多種氨基酸組成，不同的變異山羊絨種類，氨基酸組成和含量有一定差異。所以，分析變異山羊絨的氨基酸含量對于鑒別山羊絨的種類與生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)、羊絨產(chǎn)品具有很高的指導(dǎo)意義。不同變異山羊絨纖維的蛋白質(zhì)在氨基酸組成及二級結(jié)構(gòu)上不同的。變異山羊絨纖維的氨基酸拉曼光譜如圖所示，峰面積歸一化強(qiáng)度如表所示。圖四種變異山羊絨纖維的拉曼光譜圖表變異山羊絨纖維峰面積歸一化強(qiáng)度特征峰羊毛兩型毛二細(xì)毛羊絨8280.3958240.4089070.4318430.4893118510.7389720.7597910.7727070.7802829350.7634420.7387080.5512080.59439310020.598590.4946670.5142510.72120210310.4544580.4627640.4861810.540878828、851cm-1代表酪氨酸的振動情況，1002cm-1拉曼特征峰的歸一化強(qiáng)度代表色氨酸含量差異，1031cm-1代表苯基丙氨酸振動。從表中數(shù)據(jù)可以分析，酪氨酸、色氨酸、苯丙基氨酸的含量整體上隨著羊毛、兩型毛、二細(xì)毛、羊絨纖維的順序而增加，說明絨纖維的蛋白質(zhì)的含量要高于毛纖維，這也是絨纖維具有更加優(yōu)異的手感與理化功能的原因之一。935cm-1波數(shù)處的拉曼特征峰屬于螺旋構(gòu)象的C-C骨架伸展振動，這一峰值表示變異山羊絨纖維的螺旋含量的多少。從表中數(shù)據(jù)可以看出，毛纖維的螺旋構(gòu)象的C-C骨架含量要明顯由于絨纖維。C-C骨架振動區(qū)出現(xiàn)在890-960cm-1區(qū)，主要是骨架的拉伸振動，表征變異山羊絨纖維的拉伸性能，通過該特征峰可以為羊毛、羊絨纖維的拉伸、防粘縮等工藝提供指導(dǎo)意見?？偨Y(jié)本公司利用拉曼光譜表征了變異山羊絨纖維的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)，取得了優(yōu)異的結(jié)果。四種變異山羊絨纖維的蛋白質(zhì)氨基酸含量，如酪氨酸、色氨酸、苯丙基氨酸的含量整體上隨著羊毛、兩型毛、二細(xì)毛、羊絨纖維的順序而增加，說明絨纖維的蛋白質(zhì)的含量要高于毛纖維，這也是絨纖維具有更加優(yōu)異的手感與理化功能的原因之一。螺旋構(gòu)象也呈現(xiàn)相似特征。這也是從理論上上證明了絨纖維的手感、光澤、拉伸等性能要優(yōu)于毛纖維。通過拉曼光譜對變異山羊絨纖維的為進(jìn)一步探究變異山羊絨纖維的拉伸、染色、防縮等性能以及后加工整理技術(shù)提供一定的判斷依據(jù)。[詳細(xì)]

  2018-09-12 10:00

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  蛋白質(zhì)的分離純化[詳細(xì)]

  2013-03-31 00:00

  專利

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• 提取蛋白質(zhì)的方法

  植物組織蛋白質(zhì)提取方法：1、根據(jù)樣品重量（1g樣品加入3.5ml提取液，可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入），準(zhǔn)備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上靜置（3-4小時(shí)）。3、用離心機(jī)離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8）45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g這種方法針對SDS-PAGE，垂直板電泳！三氯醋酸丙酮沉淀法1、在液氮中研磨葉片2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下，然后離心（4℃8000rpm以上1小時(shí)）棄上清。3、加入等體積的冰浴丙酮（含0.07%的β-巰基乙醇），搖勻后離心（4℃8000rpm以上1小時(shí)），然后真空干燥沉淀，備用。4、上樣前加入裂解液，室溫放置30分鐘，使蛋白充分溶于裂解液中，然后離心（15℃8000rpm以上1小時(shí)或更長時(shí)間以沒有沉淀為標(biāo)準(zhǔn)），可臨時(shí)保存在4℃待用。5、用Brandford法定量蛋白，然后可分裝放入-80℃?zhèn)溆谩?a href="/doc/detail_87a108bac081a029.html" target="_blank">[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 蛋白質(zhì)的性質(zhì)簡介

  蛋白質(zhì)的性質(zhì)簡介①具有兩性蛋白質(zhì)是由α-氨基酸通過肽鍵構(gòu)成的高分子化合物，在蛋白質(zhì)分子中存在著氨基和羧基，因此跟氨基酸相似，蛋白質(zhì)也是兩性物質(zhì)。②可發(fā)生水解反應(yīng)蛋白質(zhì)在酸、堿或酶的作用下發(fā)生水解反應(yīng)，經(jīng)過多肽，Z后得到多種α-氨基酸[1]。蛋白質(zhì)水解時(shí)，應(yīng)找準(zhǔn)結(jié)構(gòu)中鍵的“斷裂點(diǎn)”，水解時(shí)肽鍵部分或全部斷裂。③溶水具有膠體的性質(zhì)有些蛋白質(zhì)能夠溶解在水里（例如雞蛋白能溶解在水里）形成溶液。蛋白質(zhì)的分子直徑達(dá)到了膠體微粒的大?。?0－9～10－7m）時(shí)，所以蛋白質(zhì)具有膠體的性質(zhì)。④加入電解質(zhì)可產(chǎn)生鹽析作用少量的鹽（如硫酸銨、硫酸鈉等）能促進(jìn)蛋白質(zhì)的溶解。如果向蛋白質(zhì)水溶液中加入濃的無機(jī)鹽溶液，可使蛋白質(zhì)的溶解度降低，而從溶液中析出，這種作用叫做鹽析。這樣鹽析出的蛋白質(zhì)仍舊可以溶解在水中，而不影響原來蛋白質(zhì)的性質(zhì)，因此鹽析是個(gè)可逆過程．利用這個(gè)性質(zhì)，采用分段鹽析方法可以分離提純蛋白質(zhì)。⑤蛋白質(zhì)的變性在熱、酸、堿、重金屬鹽、紫外線等作作用下，蛋白質(zhì)會發(fā)生性質(zhì)上的改變而凝結(jié)起來．這種凝結(jié)是不可逆的，不能再使它們恢復(fù)成原來的蛋白質(zhì)．蛋白質(zhì)的這種變化叫做變性。蛋白質(zhì)變性后，就失去了原有的可溶性，也就失去了它們生理上的作用．因此蛋白質(zhì)的變性凝固是個(gè)不可逆過程。造成蛋白質(zhì)變性的原因物理因素包括：加熱、加壓、攪拌、振蕩、紫外線照射、X射線、超聲波等：化學(xué)因素包括：強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬鹽、三*乙酸、乙醇、丙酮等。⑥顏色反應(yīng)蛋白質(zhì)可以跟許多試劑發(fā)生顏色反應(yīng)．例如在雞蛋白溶液中滴入濃硝酸，則雞蛋白溶液呈黃色．這是由于蛋白質(zhì)（含苯環(huán)結(jié)構(gòu)）與濃硝酸發(fā)生了顏色反應(yīng)的緣故．還可以用雙縮脲試劑對其進(jìn)行檢驗(yàn),該試劑遇蛋白質(zhì)變紫⑦蛋白質(zhì)在灼燒分解時(shí)，可以產(chǎn)生一種燒焦羽毛的特殊氣味．利用這一性質(zhì)可以鑒別蛋白質(zhì)Anti-Tubulin-Beta/FITC熒光素標(biāo)記微管蛋白抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Tubulin-Beta/FITC熒光素標(biāo)記微管蛋白抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Tubulin-Gamma/FITC熒光素標(biāo)記微管蛋白-γ抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Beta-Actin/HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記β-肌動蛋白（抗體）Multi-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Tuberin/TSC2/FITC熒光素標(biāo)記馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Phospho-Tuberin/TSC2(Tyr320)/FITC熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1387)/FITC熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Phospho-Tuberin/TSC2(Ser939)/FITC熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Phospho-Tuberin/TSC2(Tyr1571)/FITC熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2mlAnti-Phospho-Tuberin/TSC2(Thr1462)/FITC熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-classantibodies規(guī)格：0.2ml[詳細(xì)]

  2018-10-18 10:00

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  2013-06-05 00:00

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  抗體的結(jié)構(gòu)抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構(gòu)，其中2條較長、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）；2條較短、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種，重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列。可變區(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面，Z多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，少則只有2～3個(gè)。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-bindingfragment,Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystallinefragment,FC），糖結(jié)合在FC上。[詳細(xì)]

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