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大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒
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2013-12-11 00:00 302閱讀次數(shù)
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大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒
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大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒
- 大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
選購(gòu)指南
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人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF1)ELISA試劑盒
- 人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-18 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒
- 大鼠1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF-10)ELISA試劑盒
- 大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF-10)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
安裝說(shuō)明
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人1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒
- 人1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-06 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒
- 人1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-05 00:00
操作手冊(cè)
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小鼠1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒
- 小鼠1酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-23 00:20
標(biāo)準(zhǔn)
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大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF10)檢測(cè)試劑盒
- 大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10(FGF10)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:06
安裝說(shuō)明
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酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)微血管生成的影響
- 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)微血管生成的影響[詳細(xì)]
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2012-05-09 00:00
選購(gòu)指南
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大鼠膠質(zhì)細(xì)胞酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠膠質(zhì)細(xì)胞酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠GFAP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的GFAP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠GFAP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,GFAP濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中GFAP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):100ng/ml1瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管7管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入100ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第六管中吸出300ul棄去。第七管為空白對(duì)照。加上原液管總共八管。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)GFAP含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GFAP檢測(cè)濃度小于1ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠GFAP。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠1-酸性糖蛋白(1-AGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠a1-酸性糖蛋白(a1-AGP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠a1-AGP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的a1-AGP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠a1-AGP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,a1-AGP濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中a1-AGP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):1000ug/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。所有標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1:20稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2000ug/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ug/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)a1-AGP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的a1-AGP檢測(cè)濃度小于1.5ug/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠a1-AGP。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2(FGF2/bFGF)檢測(cè)試劑盒
- 大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2(FGF2/bFGF)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 02:31
應(yīng)用文章
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人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)ELISA試劑盒
- 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-18 00:00
期刊論文
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大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒
- 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2016-08-03 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒
- 大鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2016-08-01 00:00
操作手冊(cè)
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大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
- 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
應(yīng)用文章
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大鼠白介素-1(IL-1)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠白介素-1(IL-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠IL-1單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IL-1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠IL-1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,IL-1濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):30ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入3ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IL-1含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IL-1檢測(cè)濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠IL-1。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-1a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠HIF-1a單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HIF-1a與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠HIF-1a,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,HIF-1a濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HIF-1a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿至少作1:2稀釋(取50ul,加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0PG/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HIF-1a含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的HIF-1a檢測(cè)濃度小于78pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠HIF-1a。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于11.6%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒
- 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
操作手冊(cè)
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大鼠嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Eotaxin(CCL11)單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Eotaxin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠Eotaxin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,Eotaxin濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Eotaxin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入4000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Eotaxin含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Eotaxin檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠Eotaxin。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
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