本文由 上海紀寧實業(yè)有限公司 整理匯編

2024-09-29 02:31 151閱讀次數

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更多資料

• 大鼠成纖維細胞生長因子2(FGF2/bFGF)檢測試劑盒

  大鼠成纖維細胞生長因子2(FGF2/bFGF)檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-29 02:31

  應用文章

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• 大鼠成纖維細胞生長因子10（FGF10）檢測試劑盒

  大鼠成纖維細胞生長因子10（FGF10）檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-18 18:06

  安裝說明

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• 大鼠堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）ELISA檢測試劑盒

  www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷大鼠堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被大鼠堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白；預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品（32pg/mL）0.6mL0.6mL按說明書進行稀釋標準品稀釋液6mL3mL無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：32、16、8、4、2、1pg/mL.試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。2.靈敏度：Zdi檢測濃度小于1.0pg/mL。3.特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性：板內、板間變異系數均小于15%。5.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6個月免責聲明1.試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。2.嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。[詳細]

  2018-09-22 10:00

  產品樣冊

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• 人成纖維細胞生長因子受體底物2(FRS2)檢測試劑盒

  人成纖維細胞生長因子受體底物2(FRS2)檢測試劑盒[詳細]

  2015-09-30 00:00

  專利

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• 大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF-10)ELISA試劑盒

  大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF-10)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-09 00:00

  安裝說明

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• 大鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒

  大鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-11 00:00

  選購指南

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• 牛成纖維細胞生長因子2（FGF-2）說明書

  www.biokanu.com牛成纖維細胞生長因子2(FGF-2)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定牛血清，血漿，細胞上清及相關液體樣本中成纖維細胞生長因子2(FGF-2)的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛成纖維細胞生長因子2(FGF-2)水平。用純化的牛成纖維細胞生長因子2(FGF-2)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入成纖維細胞生長因子2(FGF-2)再與HRP標記的羊抗人抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的成纖維細胞生長因子2(FGF-2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中牛成纖維細胞生長因子2(FGF-2)濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：1350ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟：標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為900ng/L，600ng/L，300ng/L，150ng/L，75ng/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：30ng/L-700ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-22 10:00

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• 大鼠成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）說明書

  www.biokanu.com大鼠成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關液體樣本中成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）水平。用純化的大鼠成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入成纖維細胞生長因子-23（FGF-23），再與HRP標記的成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠成纖維細胞生長因子-23（FGF-23）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：90ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為60ng/L，40ng/L，20ng/L，10ng/L，5ng/L）。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15%檢測范圍：2ng/L-80ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-22 10:00

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• 大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA試劑盒

  大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-11 00:00

  產品樣冊

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• 大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒

  大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-28 00:31

  產品樣冊

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• 大鼠Toll樣受體2(TLR-2)檢測試劑盒

  大鼠Toll樣受體2(TLR-2)檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-16 12:35

  課件

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• 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒

  人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2014-08-21 00:00

  專利

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• 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒

  人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-27 23:54

  其它

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• 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒

  人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-20 03:00

  專利

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• 雞堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒

  雞堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-29 10:54

  產品樣冊

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• 上海滬峰大鼠堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）說明書

  上海滬峰生化試劑有限公司是一家專業(yè)經營生物、儀器、試劑、耗材的公司，在廣大用戶的幫助和支持下，經過不懈的努力，已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一，代理許多國際先進水平的高科技產品，包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應用領域。[詳細]

  2024-09-28 07:04

  產品樣冊

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• 人成纖維細胞生長因子4(FGF4)ELISA試劑盒

  人成纖維細胞生長因子4(FGF4)ELISA試劑盒[詳細]

  2015-03-18 00:00

  期刊論文

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• 人酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)ELISA試劑盒

  人酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)ELISA試劑盒[詳細]

  2015-03-18 00:00

  實驗操作

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• 大鼠白介素-2（IL-2）ELISA試劑盒

  電話：021-6533363955229872網址：http://www.westang.com大鼠白介素-2（IL-2）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠IL-2單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的IL-2與單抗結合，加入生物素化的抗大鼠IL-2，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，IL-2濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中IL-2濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應IL-2含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的IL-2檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的大鼠IL-2。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于9.6％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:00

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• 大鼠轉化生長因子β2試劑盒說明書

  大鼠轉化生長因子β2試劑盒檢測原理：本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠轉化生長因子β2（TGF-β2）單克隆抗體透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉化為藍色產物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中大鼠轉化生長因子β2（TGF-β2）濃度呈正相關，450nm波長下測定OD值，根據標準品和樣品的OD值，計算樣本中大鼠轉化生長因子β2（TGF-β2）含量。大鼠轉化生長因子β2試劑盒操作步驟：1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。7、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。9、顯色：每孔先加入顯色劑A液50μL，再加入顯色劑B液50μL，平板混勻器混勻30s（或用手輕輕震蕩混勻30s），37℃避光顯色15min。10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。大鼠轉化生長因子β2試劑盒注意事項：1、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。2、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為5-160pg/mL，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果（5-160pg/mL范圍內），乘以總稀釋倍數即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。8、試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。[詳細]

  2018-11-16 10:02

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