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2024-09-29 06:29 101閱讀次數(shù)

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  1使用目的：本試劑盒用于飼料、肉類組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、牛奶中三聚氰胺殘留的定量檢測。2實驗原理本試劑盒采用競爭ELISA方法，在微孔板包被有三聚氰胺偶聯(lián)抗原，加入三聚氰胺標準品或樣品，游離三聚氰胺與微孔條上預包被的三聚氰胺偶聯(lián)抗原互相競爭抗三聚氰胺抗體酶標記物，用TMB底物顯色，加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色，用酶標儀在450nm波長下進行檢測，吸光值與樣品中三聚氰胺含量成反比，通過標準曲線計算樣品中三聚氰胺的含量。3試劑盒組成3.1預包被的三聚氰胺偶聯(lián)抗原的可拆酶標板：1塊（12孔×8條）。3.2三聚氰胺標準品：6瓶（1ml/瓶），含量分別是：0ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb。3.3抗三聚氰胺抗體酶結(jié)合物：1瓶（6ml）。3.4顯色液A：1瓶（6ml）。3.5顯色液B：1瓶（6ml）。3.6終止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7樣本稀釋液：1瓶（10×,6ml），用于樣品稀釋用。3.8濃縮洗滌液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9說明書一份。4需要而未提供的材料4.1設(shè)備4.1.1波長450nm酶標儀。4.1.2粉碎機。4.1.3量筒。4.1.4振蕩器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相當?shù)臑V紙。4.1.7微量移液器。4.2試劑4.2.1去離子水或蒸餾水。4.2.2甲醇。5貯存5.1試劑盒貯存于2~8℃，切勿冷凍5.2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存6注意事項6.1使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。26.2不要使用過期試劑盒。6.3試劑盒使用前，將試劑恢復至室溫（25±2℃），建議至少回溫2小時。6.4標準品中含有三聚氰胺，使用時應(yīng)特別注意，操作時應(yīng)帶手套。6.5終止液中含有硫酸，使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.6不同標準品、樣品所用吸頭不能混用，否則會影響試驗結(jié)果。6.7不同批號試劑盒中的試劑不得混用；不同標準品、樣品所用吸頭不得混用，否則會影響實驗結(jié)果。6.8稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液，否則會影響實驗結(jié)果6.9混合試劑時應(yīng)避免起泡。7工作液準備7.1三聚氰胺標準品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb7.2濃縮洗滌液：用蒸餾水按1:20（1+19）稀釋備用7.3樣本稀釋液：用蒸餾水按1:10（1+9）稀釋備用7.3顯色劑：已備用，避免光線直照7.4反應(yīng)終止液：已備用8樣品處理程序（樣品在提取過程中，要嚴格按說明書操作，提取過程中應(yīng)準確稀釋，否則會出現(xiàn)結(jié)果不準確，樣品應(yīng)當保存在陰涼避光之處及冷藏保存）8.1取10g粉碎的樣品，加20ml70%甲醇溶液8.2QL振蕩3分鐘8.3用WhatmanNo1濾紙過濾8.4取25μl處理后的樣品，加入25μl樣本稀釋液于反應(yīng)孔中（樣本稀釋倍數(shù)為2）9酶免分析步驟9.1實驗須知9.1.1實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫（25±2℃），時間約2小時?；販刂潦覝兀?5±2℃）后再取出微孔條，多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存。注：一定保證回溫充分，否則影響檢測的極ng確度和準確度。9.1.2使用后請立即將試劑放回2~8℃保存9.1.3請不要改變分析程序9.1.4請使用極ng確的微量移液器9.1.5操作一旦開始，請不要中斷任何程序9.1.6ELISA結(jié)果的可重復性極大程度的取決于操作程序，請嚴格按照要求操作9.1.7為避免交叉污染，每個標準品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣9.1.8加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面9.2分析步驟9.2.1預先進行編號，標記B0、標準品和樣品的位置，推薦進行雙孔檢測9.2.2取所需數(shù)量的微孔（微孔條可拆），將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3樣品稀釋液（10×）、濃縮洗滌液（20×）稀釋成工作液（蒸餾水或去離子水稀釋）9.2.4在B0孔中加入50μl0.0ng/ml標準品溶液9.2.5在各標準孔中加入50μl的標準品溶液9.2.6在各樣品孔中加入50μl樣品溶液9.2.7在所有孔中加入50μl的抗三聚氰胺抗體酶結(jié)合物9.2.8輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。9.337℃溫浴30min（溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板，可以減少雙孔誤差）9.3.1甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔板5次，Z后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液3體。9.4反應(yīng)9.4.1洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個微孔中先加入50μl顯色液A，再加50μl顯色液B；輕微晃動反應(yīng)板使之徹底混勻9.4.237℃溫浴10min9.4.3每孔中加入50μl終止液，混勻9.4.4在450nm下檢測吸光度，結(jié)果在5min內(nèi)讀取。10結(jié)果計算10.1定量分析10.1.1所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值（B）除以**個標準（0標準）的吸光度值（B0）再乘以1**%，即百分吸光度值。B標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值B00μg/L標準溶液的平均吸光度值10.1.2以三聚氰胺濃度的對數(shù)值為X軸，百分吸光度值為Y軸，繪制標準曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值，可從曲線上得到對應(yīng)點的橫坐標，即為三聚氰胺濃度的對數(shù)值，求得反對數(shù)即為測定液中三聚氰胺濃度C（ppb）10.1.3由于樣品經(jīng)過了預先稀釋，因此根據(jù)標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。10.2半定量測定10.1.1目測半定量測定：首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行，根據(jù)樣品與標準品吸光度值的高低比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。10.1.2儀器半定量測定：首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行，根據(jù)樣品與標準品顏色深淺比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。11特異性物質(zhì)交叉反應(yīng)三聚氰胺1**%12試劑盒參數(shù)本試劑盒檢測下限為0.05ppbB0吸光度**值應(yīng)大于1.0試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8％，板間誤差小于15％。用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80％。13標準曲線模式（僅供參考）試劑盒提供的標準曲線范圍為0.1ppb~8.1ppb。414分析限制本試劑盒檢測為陽性的樣品應(yīng)該用另一種方法如HPLC或GC/MS加以確證。__[詳細]

  2018-10-03 10:00

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  2018-10-03 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 奶粉中三聚氰胺wan美分析

  奶粉中三聚氰胺wan美分析[詳細]

  2013-04-01 00:00

  課件

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• 肥料中的三聚氰胺及其相關(guān)物質(zhì)的同時分析

  本文向您介紹按照日本獨立行ZF人農(nóng)林水產(chǎn)消費安全技術(shù)ZX（FAMIC）主編的肥料試驗法中（2016，8.1.c）的規(guī)定，對肥料中的三聚氰胺及其相關(guān)物質(zhì)三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸進行預處理和使用島津Prominence進行分析的示例。[詳細]

  2018-08-26 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 奶粉中的三聚氰胺類添加劑分析 Rxi-5Sil MS

  奶粉中的三聚氰胺類添加劑分析 Rxi-5Sil MS[詳細]

  2013-07-22 00:00

  應(yīng)用文章

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• 三聚氰胺的分析 方法參照日本衛(wèi)生試驗法

  三聚氰胺的分析 方法參照日本衛(wèi)生試驗法[詳細]

  2024-09-29 05:26

  標準

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• 三聚氰胺

  試驗建立了飼料中三聚氰胺殘留檢測的反相GX液相色譜方法。樣品經(jīng)乙腈水提取，離心分離，過0．2btm濾膜，采用RPHPLCUv法測定，外標法定量。試驗對色譜分離條件進行了優(yōu)化，三聚氰胺在1．0～50．0gg／mL范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)為0．99996。在4．0～80．0mg／kg濃度范圍內(nèi)，平均加標回收率為87．0％～105．0％，相對標準偏差為2．86％～7．70％，Zdi檢出限為1mg／kg。該方法簡便、快速，滿足食品中三聚氰胺殘留量的檢驗工作需要。此外，試驗還建立了三聚氰胺的液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用條件，以供確證之用。[詳細]

  2018-09-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 牛奶（飼料）中三聚氰胺檢測（分析）方法

  牛奶（飼料）中三聚氰胺檢測（分析）方法[詳細]

  2024-09-23 13:58

  報價單

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• 食品中三聚氰胺的檢測

  食品中三聚氰胺的檢測[詳細]

  2010-02-24 00:00

  專利

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• 牛奶中三聚氰胺的檢測

  牛奶中三聚氰胺的檢測[詳細]

  2014-10-13 00:00

  期刊論文

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