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硫酸多粘菌素酶聯(lián)免疫分析

本文由 上海滬峰化工有限公司 整理匯編

2018-09-19 10:01 847閱讀次數(shù)

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硫酸多粘菌素酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書1工作液準備1.1硫酸多粘菌素標準品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb1.2濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用1.3樣本稀釋液:用蒸餾水按1:10(1+9)稀釋備用1.3顯色劑:已備用,避免光線直照1.4反應終止液:已備用2樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應準確稀釋,否則會出現(xiàn)結果不準確,樣品應當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)2.1取10g粉碎的樣品,加20ml70%甲醇溶液2.2QL振蕩3分鐘2.3用WhatmanNo1濾紙過濾2.4取100μl處理后的樣品,加入400μl樣本稀釋液2.5取25μl處理后的樣品,加入25μl樣本稀釋液于反應孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)3酶免分析步驟3.1實驗須知3.1.1實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫(252℃),時間約2小時?;販厥覝兀?52℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的極ng確度和準確度。3.1.2使用后請立即將試劑放回2~8℃保存3.1.3請不要改變分析程序3.1.4請使用極ng確的微量移液器3.1.5操作一旦開始,請不要中斷任何程序3.1.6ELISA結果的可重復性極大程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作3.1.7為避免交叉污染,每個標準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣3.1.8加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內表面3.2分析步驟3.2.1預先進行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,推薦進行雙孔檢測3.2.2取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存3.2.3樣品稀釋液(10)、濃縮洗滌液(20)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)3.2.4在B0孔中加入50μl0.0ng/ml標準品溶液3.2.5在各標準孔中加入50μl的標準品溶液3.2.6在各樣品孔中加入50μl樣品溶液3.2.7在所有孔中加入50μl的抗硫酸多粘菌素抗體酶結合物3.2.8輕輕晃動反應板幾秒鐘。3.337℃溫浴30min(溫浴過程中不時輕拍反應板,可以減少雙孔誤差)3.3.1甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,Z后一次應在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。3.4反應3.4.1洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50μl顯色液A,再加50μ顯色液B;輕微晃動反應板使之徹底混勻3.4.237℃溫浴10min3.4.3每孔中加入50μl終止液,混勻3.4.4在450nm下檢測吸光度,結果在5min內讀取。

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