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資料庫
FH-M099-小鼠腎巨噬細(xì)胞說明書
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本文由 上海富衡生物科技有限公司 整理匯編
2024-05-30 09:33 76閱讀次數(shù)
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FH-M099-小鼠腎巨噬細(xì)胞說明書
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FH-M099-小鼠腎巨噬細(xì)胞說明書- FH-M099-小鼠腎巨噬細(xì)胞說明書[詳細(xì)]
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- 小鼠巨噬細(xì)胞移動YZ因子(MIF)酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書實驗?zāi)康模罕驹噭┖袃H供科學(xué)研究使用，用于測定小鼠血清，細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中巨噬細(xì)胞移動YZ因子(MIF)含量。實驗原理：應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠巨噬細(xì)胞移動YZ因子(MIF)水平。用純化的MIF抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入巨噬細(xì)胞移動YZ因子(MIF)，再與HRP標(biāo)記的巨噬細(xì)胞移動YZ因子(MIF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨噬細(xì)胞移動YZ因子(MIF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠巨噬細(xì)胞移動YZ因子(MIF)濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：90μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。實驗注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用，如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測范圍：3μg/L-80μg/L試劑盒保存：2-8℃有效期：6個月[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠腎素酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書下載- 小鼠腎素酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書下載[詳細(xì)]
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2015-03-11 00:00
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2024-05-30 09:33
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2024-09-28 01:18
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- 小鼠腎素（Renin）酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗說明書下載
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2015-03-31 00:00
實驗操作
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- 牛腎細(xì)胞說明書
- 牛腎細(xì)胞說明書一．產(chǎn)品簡介1、產(chǎn)品名稱：牛腎細(xì)胞CalfKidneyCells2、組織來源：牛的腎組織3、產(chǎn)品規(guī)格：25cm2培養(yǎng)瓶4、細(xì)胞簡介：牛腎細(xì)胞分離自正常牛腎組織，細(xì)胞為圓形、多角形，單層貼壁生長。細(xì)胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核為圓形或卵圓形，部分細(xì)胞核周可見小空泡。體外培養(yǎng)的牛腎細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。本公司生產(chǎn)的牛腎細(xì)胞采用機(jī)械分離法制備而來，細(xì)胞總量約為1×106個/瓶，細(xì)胞純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。5、培養(yǎng)基信息：1)培養(yǎng)基類型：HAM’F122)添加因子：Insulin；EpidermalGrowthFactor(EGF)；Penicillin；Streptomycin；FBS二．使用方法客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。1、取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)；2、待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)；3、細(xì)胞傳代1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次；2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；3)用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5ml，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。三．注意事項1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月；2、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作；3、傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)；4、該細(xì)胞只可用于科研。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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2024-05-30 09:33
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