本文由 北京昊諾斯科技有限公司 整理匯編

2016-06-03 00:00 268閱讀次數(shù)

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更多資料

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  DHS 自動(dòng)凝膠染色&Blot膜處理工作站[詳細(xì)]

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  DHS GelStainer自動(dòng)凝膠染色工作站產(chǎn)品樣冊(cè)[詳細(xì)]

  2016-10-19 17:32

  其它

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  HC-16型顆粒物采樣器（自動(dòng)換膜）用于采集空氣中的PM10、PM2.5?及PM1等不同粒徑大小的顆粒物，可對(duì)Z多20張濾膜進(jìn)行自動(dòng)更換采樣，同時(shí)可對(duì)采集到的樣品進(jìn)行低溫保存，有效防止樣品中的揮發(fā)性有機(jī)物的損失，能同時(shí)滿足對(duì)環(huán)境空氣中質(zhì)量濃度、無機(jī)陰陽(yáng)離子、無機(jī)元素、有機(jī)碳及有機(jī)物分類和顆粒物分散度分析的需求。[詳細(xì)]

  2024-09-13 10:55

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• LZM-100 CO?激光器光纖熔接處理工作站

  LZM-100 CO?激光器光纖熔接處理工作站產(chǎn)品資料[詳細(xì)]

  2020-04-09 09:38

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• 自動(dòng)涂膜烘干機(jī) HAD-250

  自動(dòng)涂膜烘干機(jī)/小型流延涂布烘干機(jī)型號(hào):HAD-250產(chǎn)品簡(jiǎn)介：本產(chǎn)品廣泛用于各種高溫涂膜研究，例如陶瓷類薄膜、晶體類薄膜、電池材料薄膜、特殊納米薄膜；能夠適應(yīng)未來高溫條件下成膜的科學(xué)技術(shù)的發(fā)展標(biāo)準(zhǔn)配置：配微米級(jí)可調(diào)涂膜器寬度100mm主要特點(diǎn)：*數(shù)字顯示溫度控制的烘干系統(tǒng)，Z高工作溫度200℃；*數(shù)字顯示計(jì)時(shí)器，可自由設(shè)定烘干時(shí)間；*涂膜速度在0～100mm/秒范圍內(nèi)可調(diào)；*真空鋁盤，可快速放置或取下基片；*在10～250mm之間可通過行程開關(guān)調(diào)整行程；*帶調(diào)整涂膜厚度（精度0.01mm）的gua刀；*外形尺寸小，可節(jié)約空間；*外觀精致，鈑金采用立體幾何設(shè)計(jì)，簡(jiǎn)潔美觀技術(shù)參數(shù)*涂膜速度：0～100mm/秒；*Zda行程：250mm；*真空板：帶真空鋁平板；*真空板尺寸：L365mm×W200mm×H30mm；*gua刀可調(diào)范圍：0.01～3.5mm；*加熱烘干系統(tǒng)：室溫～200℃,數(shù)顯溫度控制器,精度±1℃*電源：220V/50Hz；*重量：50KG；*外形尺寸：L500mm×W310mm×H330mm操作規(guī)程（1）.將極片放在真空板上，啟動(dòng)電源，開啟真空，極片吸附在真空板上；（2）.將涂膜器放在極片上，放入涂料漿；（3）.開啟涂膜，涂膜裝置自動(dòng)推動(dòng)涂膜器行走，自動(dòng)涂膜；（4）.取出涂膜器和推桿，蓋上發(fā)熱蓋，設(shè)定加熱溫度和時(shí)間，進(jìn)行加熱烘干；（5）.烘干完成后，翻開發(fā)熱蓋，取出涂膜好的極片，將涂膜裝置復(fù)位完成；[詳細(xì)]

  2024-09-16 07:32

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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  DHS TL2020&TL2010S研磨儀[詳細(xì)]

  2016-06-03 00:00

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  DHS TL2020+TL2010S+TL1000組織研磨儀[詳細(xì)]

  2016-04-29 00:00

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• 全自動(dòng)高通量樣品前處理工作站產(chǎn)品樣冊(cè)

  全自動(dòng)高通量樣品前處理工作站產(chǎn)品樣冊(cè)[詳細(xì)]

  2024-09-17 06:55

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  2006-08-11 00:00

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• 自動(dòng)液體樣品處理平臺(tái)

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  2016-01-28 00:00

  期刊論文

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• 自動(dòng)涂膜烘干機(jī)的特點(diǎn)

  自動(dòng)涂膜烘干機(jī)的特點(diǎn)[詳細(xì)]

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  自動(dòng)固相萃取工作站VERSA 10 SPE產(chǎn)品樣冊(cè)[詳細(xì)]

  2016-10-19 17:06

  課件

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• 使用epMotion 5075 工作站自動(dòng)提取植物組織DNA

  在水稻及其制品轉(zhuǎn)基因成分的檢測(cè)中，高質(zhì)量DNA模板的獲取，是進(jìn)行有效檢測(cè)的前提和關(guān)鍵。采用手工方法對(duì)水稻及其制品進(jìn)行DNA提取，不僅步驟繁瑣、耗時(shí)耗力，而且許多提取方法中都含有有毒的有機(jī)溶劑，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境也是一種危害。[詳細(xì)]

  2024-09-29 08:57

  應(yīng)用文章

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• 電化學(xué)工作站/化學(xué)工作站/工作站

  電化學(xué)工作站/化學(xué)工作站/工作站型號(hào)：WHS-CS350WHS-CS350電化學(xué)工作站（電化學(xué)測(cè)試系統(tǒng)）是集電化學(xué)分析方法和電化學(xué)測(cè)試方法于一體的電化學(xué)通用儀器，能完成循環(huán)伏安、階梯伏安、脈沖伏安、溶出伏安等電化學(xué)分析方法；還可以完成恒電流（位）極化、動(dòng)電位（流）掃描、任意恒電流（位）方波，多恒電流（位）階躍、電化學(xué)噪聲（電偶電流）、電化學(xué)阻抗（EIS）等電化學(xué)測(cè)試等功能，還可以進(jìn)行線性掃描循環(huán)伏安（CV）、階梯波循環(huán)伏安（SCV）、方波循環(huán)伏安（SWV）、差分脈沖伏安（DPV）和常規(guī)脈沖伏安（NPV）以及差分常規(guī)脈沖伏安（DNPV）等電分析方法。測(cè)試系統(tǒng)控制與數(shù)據(jù)處理軟件是基于Windows98/2000/XP操作系統(tǒng)的，用戶界面遵守Windows軟件的設(shè)計(jì)規(guī)則，容易安裝和使用。系統(tǒng)軟件為方便使用者提供了強(qiáng)大的功能，包括文件管理、全面的實(shí)驗(yàn)控制、靈活的圖形顯示、方便的圖形放大和還原、多種數(shù)據(jù)處理功能、數(shù)據(jù)的存貯與打印等。系統(tǒng)軟件具有良好的用戶界面，命令行參數(shù)所用的電化學(xué)理論和方法都盡可能采用Z為通用的電化學(xué)方面的術(shù)語(yǔ)，全中文菜單和界面，更方便地為教學(xué)和科研服務(wù)。WHS-CS350可用于較大電流和較高槽壓的電化學(xué)測(cè)量和應(yīng)用，例如電池、電分析、腐蝕、電解、電鍍等。儀器由數(shù)字信號(hào)發(fā)生器（DDS）和直接數(shù)據(jù)存儲(chǔ)器（DMA）和恒電位儀/恒電流儀組成，電流/電位同步數(shù)據(jù)采集。儀器的電流輸出范圍為±2A，槽壓為±21V。電壓控制范圍：±10V；電流控制范圍：±2.0A；電流測(cè)量下限低于10pA。WHS-CS350電化學(xué)工作站采用恒電流階躍直接測(cè)量高阻體系介質(zhì)電阻（如混凝土或涂層等介質(zhì)電阻），可對(duì)溶液電阻進(jìn)行實(shí)時(shí)或軟件補(bǔ)償；可對(duì)測(cè)試曲線進(jìn)行數(shù)字平滑，能對(duì)極化曲線進(jìn)行電化學(xué)參數(shù)解析，可計(jì)算極化電阻Rp值，Tafel斜率ba，bc值，交換電流密度icorr，腐蝕速率,還可計(jì)算統(tǒng)計(jì)噪聲電阻Rn，并可將圖形以矢量方式拷貝到MicrosoftWord97/2000文檔中。CorrTestTM電化學(xué)工作站采用USB或RS232串行口與計(jì)算機(jī)通訊，設(shè)備安裝簡(jiǎn)單，即插即用。外形尺寸：36.5cm（寬）30.5cm（深）16cm（高）儀器重量：6.5KgWHS-CS350電化學(xué)工作站技術(shù)指標(biāo)1、硬件參數(shù)指標(biāo)恒電位儀電位控制范圍：±10V電流控制范圍：±2.0A電位控制精度：0.1%×滿量程讀數(shù)±1mV電流控制精度：0.1%×滿量程讀數(shù)電位分辨率：10uV（>100Hz）,2uV（<10Hz）電流分辨率：10pA電位上升時(shí)間：<1uS（<10mA）,<10uS（<2A）輔助數(shù)據(jù)采集24位@10KHz參比電極輸入阻抗：1012歐姆||10F電流量程：2A～200nA,共8檔槽壓：21VCV和LSV掃描速度：0.01～20000mV/sCA和CC脈沖寬度：0.0001～1000s電位掃描時(shí)電位增量：0.1mV@1V/mSSWV頻率：1～100KHzDPV和NPV脈沖寬度：0.0001～1000sAD數(shù)據(jù)采集：16位@1MHz,24bit@100HzCV的Z小電位增量：0.01mV電位和電流測(cè)量低通濾波器電流與電位量程：自動(dòng)和手動(dòng)設(shè)置2、電化學(xué)阻抗測(cè)量指標(biāo)信號(hào)發(fā)生器頻率響應(yīng)：10uHz~100kHz信號(hào)幅值：0mV~10V直流偏差：-10~+10V輸出阻抗：50歐姆波形：正弦波，三角波，方波正弦波失真：<1%掃描方式：對(duì)數(shù)/線性，增加/下降Zda負(fù)載電容：1nF；Zda負(fù)載電感：10uH信號(hào)分析器積分時(shí)間：Z小值：10mS或者一個(gè)循環(huán)的Z長(zhǎng)時(shí)間Zda值：106個(gè)循環(huán)或者105S測(cè)量時(shí)間延遲：0~105秒直流偏置補(bǔ)償電位自動(dòng)補(bǔ)償范圍：-10V~+10V電流補(bǔ)償范圍：-1A~+1A帶寬調(diào)整（Bandwidth）：自動(dòng)或手動(dòng)設(shè)置，共8級(jí)可調(diào)WHS-CS350測(cè)量與控制軟件主要功能開路電位-時(shí)間曲線（OCPT）恒電位法（計(jì)時(shí)電流法,CA）恒電流法（計(jì)時(shí)電位法,CP）多電位階躍（VSTEP）多電流階躍（ISTEP）動(dòng)電位掃描（極化曲線）線性極化（LPR）鈍化回掃曲線（按擊穿電流回掃）動(dòng)電流掃描任意恒電位方波任意恒電流方波恒電流儀循環(huán)伏安法（CV）階梯伏安法（SCV）差分脈沖伏安法（DPV）常規(guī)脈沖伏安法（NPV）方波伏安法（SWV）交流伏安法（ACV）溶出伏安法常規(guī)差分脈沖伏安法（DNPV）電化學(xué)阻抗電化學(xué)噪聲測(cè)量電偶腐蝕測(cè)量氫滲透監(jiān)測(cè)腐蝕速率計(jì)算應(yīng)用領(lǐng)域1）研究電化學(xué)機(jī)理；物質(zhì)的定性定量分析；2）常規(guī)電化學(xué)測(cè)試，包括電合成、電鍍和電池性能評(píng)價(jià)。3）功能材料和能源材料的機(jī)理和制備研究；4）緩蝕劑、水質(zhì)穩(wěn)定劑、涂層以及陰極保護(hù)效率快速評(píng)價(jià)以及氫滲測(cè)試等；5）金屬材料在導(dǎo)電性介質(zhì)（包括水/混凝土等環(huán)境）中的腐蝕電化學(xué)測(cè)試。系統(tǒng)配置每套工作站包括：1）儀器主機(jī)一臺(tái)；2）白金電極、參比電極、工作電極及專用電解池各一支（套）；3）模擬電解池一個(gè)；4）USB數(shù)據(jù)線一條；5）噪聲測(cè)量專用電纜線一條；6）WHS-CS350測(cè)試與分析軟件CD一張。網(wǎng)址；www.51658042.com北京恒奧德儀器儀表有限公司聯(lián)系方式：010-51658042/51760331/51717696手機(jī)：15010245973/15313176001/15313175998聯(lián)系人:李經(jīng)理地址:北京市海淀區(qū)阜城路42號(hào)院中裕商務(wù)花園6C-211傳真：010-51717696郵箱：hadgs2009@163.com網(wǎng)址：http://www.51658042.com。http://www.had200911.cn:http://had200911.b2b.hc360.com。54pc.com/netshow/20100104193745/QQ:1968156761116912188023626135142661074941[詳細(xì)]

  2018-09-24 10:02

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 處理SERS活性金島膜表面雜質(zhì)

  處理SERS活性金島膜表面雜質(zhì)[詳細(xì)]

  2013-05-13 00:00

  專利

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• 蛋白質(zhì)印跡分析（Western Blot Analysis）

  蛋白質(zhì)印跡分析（WesternBlotAnalysis）【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹苛私獾鞍踪|(zhì)印跡法的基本原理及其操作和應(yīng)用?！緦?shí)驗(yàn)原理】蛋白質(zhì)印跡法又稱為免疫印跡法，這是一種可以檢測(cè)固定在固相載體上蛋白質(zhì)的免疫化學(xué)技術(shù)方法。待測(cè)蛋白既可以是粗提物也可以經(jīng)過一定的分離和純化,另外這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用需要利用待測(cè)蛋白的單克隆或多克隆抗體進(jìn)行識(shí)別。如圖所示，可溶性抗原，也就是待測(cè)蛋白首先要根據(jù)其性質(zhì)，如分子量，分子大小，電荷以及其等電點(diǎn)等采用不同的電泳方法進(jìn)行分離；通過電流將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯膜上；利用抗體（一抗）與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的原理，以抗體作為探針釣取目的蛋白。值得注意的是在加入一抗前應(yīng)首先加入非特異性蛋白，如牛血清白蛋白對(duì)膜進(jìn)行“封阻”而防止抗體與膜的非特異性結(jié)合。經(jīng)電泳分離后的蛋白往往需再利用電泳方法將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相載體上,我們把這個(gè)過程稱為電泳印跡。常用的兩種電轉(zhuǎn)移方法分別為:1.半干法:凝膠和固相載體被夾在用緩沖溶液浸濕的濾紙之間,通電時(shí)間為10分鐘~30分鐘。2.濕法：凝膠和固相載體夾心浸放在轉(zhuǎn)移緩沖溶液中，轉(zhuǎn)移時(shí)間可從45分鐘延長(zhǎng)到過夜進(jìn)行。由于濕法的使用彈性更大并且沒有明顯浪費(fèi)更多的時(shí)間和原料，因此我們?cè)谶@里只描述濕法的基本操作過程。對(duì)于目的蛋白的識(shí)別需要采用能夠識(shí)別一抗的第二抗體。該抗體往往是購(gòu)買的成品，已經(jīng)被結(jié)合或標(biāo)記了特定的試劑，如辣根過氧化物酶。這種標(biāo)記是利用辣根過氧化物酶所催化的一個(gè)比色反應(yīng)，該反應(yīng)的產(chǎn)物有特定的顏色且固定在固相載體上，容易鑒別。因此可通過對(duì)二抗的識(shí)別而識(shí)別一抗，進(jìn)而判斷出目標(biāo)蛋白所在的位置。其他的識(shí)別系統(tǒng)包括堿性磷酸酶系統(tǒng)和125I標(biāo)記系統(tǒng)?！緦?shí)驗(yàn)操作】⒈.蛋白質(zhì)的分離根據(jù)目的蛋白的性質(zhì)，利用電泳方法將其進(jìn)行分離。為提高電轉(zhuǎn)移的效率，通常采用SDS/PAGE技術(shù)。分離實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，首先將樣品墻的上邊緣用小刀去除，然后在膠板的右上角切一個(gè)小口以便定位，小心放入轉(zhuǎn)移緩沖溶液中待用。⒉.電轉(zhuǎn)移⑴準(zhǔn)備PVDF膜根據(jù)膠的大小剪出一片PVDF膜，膜的大小應(yīng)略微小于膠的大小。將膜置于甲醇中浸泡1分鐘，再移至轉(zhuǎn)移緩沖溶液中待用。夾心放置順序⑵制作膠膜夾心在一淺盤中打開轉(zhuǎn)移盒，將一個(gè)預(yù)先用轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸泡過的海綿墊放在轉(zhuǎn)移盒的黑色篩孔板上，在海綿墊的上方放置經(jīng)轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸濕的3MM紙，小心地將膠板放在3MM紙上，并注意排除氣泡。將PVDF膜放在膠的上方同時(shí)注意排除氣泡，再在膜的上方放上一張同樣用轉(zhuǎn)移緩沖溶液浸濕過的3MM紙并趕出氣泡，放置另一張浸泡過的海綿墊，關(guān)閉轉(zhuǎn)移盒。將轉(zhuǎn)移盒按照正確的方向放入轉(zhuǎn)移槽中，轉(zhuǎn)移盒的黑色篩孔板貼近轉(zhuǎn)移槽的黑色端，轉(zhuǎn)移盒的白色篩孔板貼近轉(zhuǎn)移槽的白色端，填滿轉(zhuǎn)移緩沖溶液同時(shí)防止出現(xiàn)氣泡。⑶電轉(zhuǎn)移連接電源,在4°C條件下維持恒壓100v，1小時(shí)⒊.免疫檢測(cè)⑴膜染色斷開電源，將轉(zhuǎn)移盒從轉(zhuǎn)移槽中移出，將轉(zhuǎn)移盒的各個(gè)部分分開。用鑷子將PVDF膜小心放入一個(gè)干凈的容器中，用TBS緩沖溶液進(jìn)行短暫清洗，從膜上剪下一條寬約5mm的膜放入另一個(gè)干凈的容器中。將這條膜在染色液中浸泡1分鐘，然后在脫色液中脫色30分鐘,確定蛋白質(zhì)已經(jīng)轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。⑵膜的封閉和清洗對(duì)于沒有進(jìn)行染色的膜，首先倒出TBS緩沖溶液,加入3%封閉緩沖溶液,輕輕搖動(dòng)至少1小時(shí)。倒掉3%封閉緩沖溶液，并用TBS緩沖溶液清洗3次,每次5分鐘。⑶一抗倒掉TBS緩沖溶液，加入10ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的一抗，輕輕搖動(dòng)1小時(shí)以上。從容器中倒出一抗及封閉緩沖溶液，用TTBS緩沖溶液清洗兩次，每次10分鐘。⑷二抗倒出TTBS緩沖溶液，加入5ml0.5%封閉緩沖溶液及適量的二抗。輕輕搖動(dòng)30分鐘，倒出二抗及封閉緩沖溶液，用TTBS緩沖溶液清洗兩次，每次10分鐘。⑸檢測(cè)倒掉TTBS緩沖溶液，并加入顯影劑，輕輕搖動(dòng)PVDF膜，觀察顯影情況，當(dāng)能夠清晰的看到顯色帶時(shí)，用蒸餾水在30分鐘內(nèi)分三次清洗PVDF膜以終止顯色反應(yīng)的繼續(xù)進(jìn)行?！緦?shí)驗(yàn)結(jié)果】檢查膜上顯色結(jié)果，藍(lán)紫色帶所對(duì)應(yīng)的即是目標(biāo)蛋白的位置。WesternBlotAnalysis【Purpose】ComprehendthetheoryofWesternblotting;understanditsbasicmanipulationandapplication.【Principle】WesternblottingisalsocalledImmunoblotting.Itisakindofimmunochemicaltechniqueswhichisusedtodetectaproteinimmobilizedonamatrix.Thetargetproteincanbeinacrudeextractoramorepurifiedpreparationandthemonoclonalorpolyclonalantibodyagainstthisproteinisnecessarytohelpustorecognizetheantigen.AsintheFigure,solubleantigens（thetargetprotein）maybeseparatedbyelectrophoresisbasedonitsmolecularweight（SDS/PAGE）,sizeandcharge（nondenaturatinggelelectrophoresisorisoelectricpoint（isoelectricfocusing）.Aftertheseparation,theproteinsaretransferredfromthegeltoaPVDFmembrane.Onceonthemembraneantibodies（firstantibodies）canbeusedtoprobeforthepresenceofparticularproteinbecauseofthespecificallybindingofantigenwithagainstit.Non-specificbindingsitecanbe“blocked”usingothernon-specificproteinsuchasbovineserumalbuminbeforeaddingfirstantibodytoavoidnon-specificbinding.Proteintransferismostcommonlyaccomplishedbyelectrophoresis，Thisprocedureiscalledelectrophoreticblotting.Thetwocommonelectrophoreticmethodsare:⒈Semi-dryblotting,inwhichthegelandimmobilizingmatrixaresandwichedbetweenbuffer-wettedfilterpapersthroughwhichacurrentisappliedfor10-30minutes.⒉Wet（tank）blotting,inwhichthegel-matrixsandwichissubmergedintransferbufferforelectrophoresis,whichmaytakeaslittleas45minutesormaybeallowedtocontinueovernightWeonlydescribewetblottinghere,sinceitpermitsgreaterflexibilitywithoutbeingsignificantlymoreexpensiveintimeormaterials.Thedetectionoftargetproteinisusingasecondantibody,whichcanrecognizethefirstantibody.Typically,thesecondantibodyispurchasedalreadyconjugatedtoalabe領(lǐng)agentsuchastheenzymehorseradishperoxidase.Thismarkeristhenvisualizedbyacolorimetricreactioncatalyzedbytheenzymewhichyieldsacoloredproductthatremainsfixedtothemembrane.Thus,itispossibletorecognizefirstantibodythroughrecognizingsecondantibody,andthenidentifythepositionoftargetprotein.Otherdetectionsystemsincludealkalinephosphataseand125Ilabels.【Materials】⒈Apparatus:ApparatusofSDS-PAGE,ElectroblottingApparatus,Powersupply,PVDFmembrane（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）,Whatman3MMpaper,AdditionalTools:Forceps,spongepad,scissor,gloves,smallplasticorglasscontainer,Shallowtray.⒉Reagents:⑴10xtransferbuffer（1L）:30.3gTrizmabase（0.25M）,144gGlycine（1.92M）,pH首ldbe8.3;withoutadjustment.⑵1xtransferbuffer（2L）:400mlMethanol,200ml10xtransferbuffer,1400mlwater.⑶TBSbuffer:Add1.22gTris（10mM）and8.78gNaCl（150mM）to1LdistilledwaterandadjustpHto7.5withHCl.⑷TTBSbuffer:1LTBSbufferadd0.5mlTween20（0.05%）.⑸Firstantibody:antibodyagainstthetargetprotein.⑹Secondantibody:goatanti-rabbit-HRP（horseradishperoxidase）.⑺3%Blockingbuffer（0.5L）:Add15mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑻0.5%Blockingbuffer（0.5L）:Add2.5mgBovineserumalbumininTBSbuffertofinalvolume0.5L,keepat4°Ctopreventbacterialcontamination.⑼Developingreagent:1mlchlonoaphtholsolution（30mg/mlinmethanol）,add10mlmethanol,addTBSbufferto50mlandadd30ul30%H2O2.⑽Stainingbuffer:Add1gamidoblack18B（0.1%）,250mlisopropanol（25%）and100mlaceticacid（10%）todistilledwaterwithfinalvolume1L.⑾Destainingbuffer:Add350mlisopropanol（35%）and2mlaceticacid（2%）todistilledwaterwithfinalvolume1L.【Procedure】⒈.SeparationofProteinRunanelectrophoreticseparationofknownantigenicproteins.Themethodofseparationdecidedbythecharactersoftargetprotein,butforsufficientlytransferring,themostcommonmethodisSDS-PAGE.Afterseparation,removeuppersideofsamplewellswitharazorblade.Notchingbottomright-handcornerofgelfororientationandputgelintransferbufferuntilreadytouse.⒉.Electrotransfer⑴PreparationofmembraneCutapieceofPVDFmembrane（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）accordingtothesizeofgel.Incubateinmethanolforabout1minonarockeratroomtemp.Removemethanolandequilibratemembranein1xtransferbufferuntilreadytouse.⑵Arrangegel-membranesandwichInashallowtray,openthetransfercassette.Putawell-soakedspongepadontheblackpieceofthetransfercassetteandawetted3MMpaperonthespongepad.Placethegelonthepaperandarrangewellsothatallairbubblesareremoved.LaythePVDFmembraneonthetopofgelandremoveanyairbubbles.Placeawettedsheetof3MMpaperoverthePVDFmembraneandremovethebubble.Coveredwiththesecondwell-soakedpad.Closethesandwichwiththewhitepieceofthecassette.Mountthesandwichinthetransfertank;puttheblacksidesneartheblacksideofthedevice.Fillthebuffertankwiththetransferbuffer.⑶Electrotransfer:Attachtheelectrodes.Setthepowersupplyto100V（constantvoltage）for1hat4°C.⒊.Immunodetection⑴MembranestainingDisconnecttransferapparatus,removetransfercassette,andpeel3MMpaperfrommembrane.Removethemembranetoasmallcontainer.Add10mlTBSbufferandwashforshorttime.Cutoutonestripewith5mmwidthandputinanothercleancontainer.Stainthisstripeinstainingbufferfor1min.Destainfor30minindestainingbuffertocheckwhetherproteinhasbeentransferredfromgeltomembraneornot.⑵MembraneblockingandwashingForotherpartofmembrane,pouroffTBSbuffer.Add3%blockingbuffer，rockgentlyforatleast1h.Pouroff3%blockingbufferandrinsebrieflywithTBSbufferthreetimes,5minutesforpertime.⑶FirstantibodyPouroffTBSbuffer.Addfirstantibodyatappropriatedilutionin10ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyforatleast1h;pourofffirstantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑷SecondantibodyPouroffTTBSbuffer.Addsecondantibodyatappropriatedilutionin5ml0.5%blockingbuffer.Rockgentlyfor30min,pouroffsecondantibodysolutionfrommembraneandwashtwicefor10minuteswithTTBSbuffer.⑸DetectionPouroffTTBSbufferfrommembraneandadddevelopingreagent,RockPVDFgently,monitoringdevelopment.Whenthebandscanbeseenclearly,stopdevelopmentbywashingmembranewithdistilledwaterfor30minuteswith3changes.【Result】Checkthebandsonmembrane,thebandwithblue-purplecolorcorrespondingtothetargetprotein.實(shí)驗(yàn)材料】1.實(shí)驗(yàn)器材SDS/PAGE實(shí)驗(yàn)相關(guān)材料；電轉(zhuǎn)移裝置；供電設(shè)備；PVDF膜（MilliporeImmobion-P#IPVH00010）；Whatman3MM紙；其他工具：鑷子、海綿墊、剪子、手套、小塑料或玻璃容器、淺盤。Detection2.實(shí)驗(yàn)試劑⑴10x轉(zhuǎn)移緩沖溶液（1L）：30.3gTrizmabase（0.25M）,144g甘氨酸（1.92M）,加蒸餾水至1L,此時(shí)pH約為8.3，不必調(diào)整。⑵1x轉(zhuǎn)移緩沖溶液（2L）：在1.4L蒸餾水中加入400ml甲醇及200ml10x轉(zhuǎn)移緩沖溶液。⑶TBS緩沖溶液:將1.22gTris（10mM）和8.78gNaCl（150mM）加入到1L蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)pH至7.5。⑷TTBSbuffer：在1LTBS緩沖溶液中加入0.5mlTween20（0.05%）。⑸一抗：兔抗待測(cè)蛋白抗體（多克隆抗體）。（6）二抗：辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔。⑺3%封阻緩沖溶液（0.5L）：牛血清白蛋白15mg加入TBS緩沖溶液并定容至0.5L，過濾，在4°C保存以防止細(xì)菌污染。⑻0.5%封阻緩沖溶液（0.5L）：牛血清白蛋白2.5mg加入TTBS緩沖溶液并定容至0.5L，過濾，在4°C保存以防止細(xì)菌污染。⑼顯影試劑：1ml氯萘溶液（30mg/ml甲醇配置），加入10ml甲醇，加入TBS緩沖溶液至50ml，加入30ul30%H2O2。⑽染色液：1g氨基黑18B（0.1%），250ml異丙醇（25%）及100ml乙酸（10%）用蒸餾水定容至1L。⑾脫色液：將350ml異丙醇（35%）和20ml乙酸（2%）用蒸餾水定容至1L。[詳細(xì)]

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