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DH5α感受態(tài)細(xì)胞說明書
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本文由 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司 整理匯編
2018-10-08 10:00 1202閱讀次數(shù)
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本產(chǎn)品是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。DH5α是一種常用于質(zhì)??寺〉木?,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108適用于GX的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。
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DH5α感受態(tài)細(xì)胞說明書
- 本產(chǎn)品是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。DH5α是一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108適用于GX的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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stbl3 感受態(tài)細(xì)胞說明書
- 產(chǎn)品概述:常規(guī)質(zhì)粒制備的宿主菌,可進(jìn)行藍(lán)白斑篩選;復(fù)制慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株,對慢病毒載體等較大的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的效果好,有效減低錯誤重組的可能性。細(xì)胞種類:大腸桿菌Stbl3菌株能有效地YZ長片段末端重復(fù)區(qū)的重組,非常適合于含有同向重復(fù)序列的慢病毒和其他反轉(zhuǎn)錄病毒載體的復(fù)制。此外,細(xì)胞非常穩(wěn)定,能提高慢病毒載體或其他不穩(wěn)定載體的克隆效率。轉(zhuǎn)化效率:使用1ng的質(zhì)粒DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化時:100μlCompetentCellsStbl3/1ngpUC19進(jìn)行轉(zhuǎn)化時產(chǎn)生的菌落數(shù)>1×10*8轉(zhuǎn)化子/1μgpUC19[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Rosetta(DE3)感受態(tài)細(xì)胞說明書
- 本產(chǎn)品是采用進(jìn)口Rosetta菌株,經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。Rosetta菌株是攜帶氯霉素抗性質(zhì)粒BL21的衍生菌,補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的6種稀有密碼子(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)對應(yīng)的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞說明書
- 本產(chǎn)品是大腸桿菌BL21(DE3)菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。BL21(DE3)菌株適合表達(dá)非毒性蛋白,該菌株是以T7RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的外源基因蛋白GX表達(dá)的宿主。T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達(dá)受λ噬菌體DE3區(qū)的lacUV5啟動子調(diào)控,該區(qū)整合在BL21染色體上。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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T*P10感受態(tài)細(xì)胞說明書
- 本產(chǎn)品是大腸桿菌T*P10菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。T*P10是一種常用于質(zhì)??寺〉木?,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,適用于GX的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Shuffle T7-B 感受態(tài)細(xì)胞說明書
- ShuffleT7-B感受態(tài)細(xì)胞說明書,ShuffleT7-B菌株為大腸桿菌BL21增強(qiáng)型菌株,為Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,適用于T7啟動子啟動的蛋白表達(dá)。細(xì)胞內(nèi)組成型表達(dá)的二硫鍵異構(gòu)酶DsbC不僅有利于表達(dá)蛋白形成正確的二硫鍵,并具有分子伴侶的功能,幫助不含二硫鍵的蛋白正確折疊。T7RNA聚合酶基因整合在細(xì)菌染色體上的lac操縱子區(qū)域,基因組中無λ前噬菌體序列,具有抗T1噬菌體感染特點(diǎn)。ShuffleT7-B感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率大于106cfu/μgDNA。[詳細(xì)]
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2018-12-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞說明書
- ShuffleT7-K12感受態(tài)細(xì)胞說明書[詳細(xì)]
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2018-12-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞說明書
- 本產(chǎn)品是大腸桿菌BL21(DE3)pLysS菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。該菌株攜帶pLysS質(zhì)粒,具有氯霉素抗性,適合表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白。PLysS含有表達(dá)T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平,但不干擾目的蛋白的表達(dá)。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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T7pLysY 感受態(tài)細(xì)胞
- T7pLysY感受態(tài)細(xì)胞:T7pLysY菌株為大腸桿菌BL21增強(qiáng)型菌株,為Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,用于毒性或非毒性蛋白的表達(dá)。該菌株區(qū)別于BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)pLysE菌株的優(yōu)勢在于T7RNA聚合酶基因整合在細(xì)菌染色體上的lac操縱子區(qū)域,基因組中無λ前噬菌體序列,LysY表達(dá)的T7溶菌酶保留了對T7RNA聚合酶的YZ作用但缺失了水解細(xì)胞壁的酰胺酶活性,有利于降低基因的背景表達(dá)和避免誘導(dǎo)過程中細(xì)菌的裂解,菌株具有抗T1噬菌體感染等特點(diǎn)。T7pLysY表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率大于108cfu/μgDNA。T7pLysY感受態(tài)細(xì)胞說明書見附件。[詳細(xì)]
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2018-12-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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DH5α感受態(tài)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟
- 本產(chǎn)品是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。DH5α是一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108,適用于GX的質(zhì)粒DNA克隆并能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復(fù)制。[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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TB1 Chemically Competent Cell 感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品說明書
- TB1 Chemically Competent Cell 感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2014-02-06 00:00
專利
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如何使用氯化鈣制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞
- 如何使用氯化鈣制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞[詳細(xì)]
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2024-09-28 02:06
標(biāo)準(zhǔn)
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人大腸桿菌DH5α菌體蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T1ng/L-45ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中大腸桿菌DH5α菌體蛋白含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人大腸桿菌DH5α菌體蛋白水平。用純化的人大腸桿菌DH5α菌體蛋白抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大腸桿菌DH5α菌體蛋白,再與HRP標(biāo)記的大腸桿菌DH5α菌體蛋白抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大腸桿菌DH5α菌體蛋白呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人大腸桿菌DH5α菌體蛋白濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(64ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。32ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液16ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備與組DNA的轉(zhuǎn)化
- 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備與組DNA的轉(zhuǎn)化[詳細(xì)]
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2016-07-12 00:00
其它
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E.Coli 感受態(tài)細(xì)胞的制備、質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化、提取與酶切鑒定
- E.Coli感受態(tài)細(xì)胞的制備、質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化、提取與酶切鑒定[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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說明書
- 說明書[詳細(xì)]
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2007-05-30 00:00
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