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牛胰蛋白酶 (trypsin)試劑盒使用方法
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本文由 上海基免實業(yè)有限公司 整理匯編
2024-09-28 00:26 204閱讀次數
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牛胰蛋白酶 (trypsin)試劑盒使用方法
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人胰蛋白酶 (trypsin)試劑盒使用說明書
- 實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰蛋白酶(trypsin)水平。用純化的人胰蛋白酶(trypsin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰蛋白酶(trypsin),再與HRP標記的胰蛋白酶(trypsin)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰蛋白酶(trypsin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人胰蛋白酶(trypsin)濃度。人胰蛋白酶(trypsin)試劑盒使用說明書試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(48ng/mL)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。24ng/mL5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液12ng/mL4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液6ng/mL3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液3ng/mL2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液1.5ng/mL1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。人胰蛋白酶(trypsin)試劑盒使用說明書注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-27 10:00
產品樣冊
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植物胰蛋白酶(trypsin)試劑盒(ELISA)說明書
- l本試劑盒用于體外定量檢測組織、細胞及相關液體樣本中植物胰蛋白酶(trypsin)的活性。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物胰蛋白酶(trypsin)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物胰蛋白酶(trypsin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。產品具體的檢測范圍請下載詳細說明書謝謝[詳細]
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2018-11-29 10:00
產品樣冊
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豬胰蛋白酶 (trypsin)elisa試劑盒進口說明書
- 試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定豬血清,組織及相關液體樣本中胰蛋白酶(trypsin)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬胰蛋白酶(trypsin)水平。用純化的豬胰蛋白酶(trypsin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰蛋白酶(trypsin),再與HRP標記的胰蛋白酶(trypsin)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰蛋白酶(trypsin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬胰蛋白酶(trypsin)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:22.5ng/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為15ng/mL,10ng/mL,5ng/mL,2.5ng/mL,1.25ng/mL)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15%檢測范圍:0.6ng/mL-20ng/mL保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-03 10:00
產品樣冊
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人胰蛋白酶(trypsin)ELISA試劑盒使用說明書
- 人胰蛋白酶(trypsin)試劑盒(ELISA)使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人胰蛋白酶(trypsin)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人胰蛋白酶(trypsin)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰蛋白酶(trypsin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響Z后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本處理1.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。2.實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。5.若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板8孔×12條8孔×6條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標準品濃度依次為:240、120、60、30、15、0ng/mL2.經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過Zda標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。注意事項嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。不能使用過期產品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結果計算以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍:7.5ng/mL240ng/mL。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0ng/mL。3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性:板內變異系數小于10%,板間變異系數小于15%。說明1.由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產品可能存在一定的質量技術風險。2.Z終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關,請務必準備充足的標本備份。3.不同批次的同一產品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據試劑盒內說明書進行實驗操作,網站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結果。問題解答若實驗效果不好,請及時對顯色結果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:問題可能原因解決方案標準曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物,顏色應迅速顯現來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數時間讀數在說明書推薦的讀數時間內讀數樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復實驗[詳細]
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2018-11-18 10:00
產品樣冊
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大鼠胰蛋白酶 (trypsin)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
- 實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠胰蛋白酶(trypsin)水平。用純化的大鼠胰蛋白酶(trypsin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰蛋白酶(trypsin),再與HRP標記的胰蛋白酶(trypsin)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰蛋白酶(trypsin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠胰蛋白酶(trypsin)濃度。[詳細]
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2018-09-19 10:01
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胰蛋白酶(牛胰)
- 胰蛋白酶(牛胰)[詳細]
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2014-09-29 00:00
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玉米胰蛋白酶YZ劑Corn Trypsin Inhibitor說明書
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2018-09-29 10:03
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大豆胰蛋白酶YZ因子(STI)ELISA 試劑盒使用方法
- 大豆胰蛋白酶YZ因子(STI)ELISA 試劑盒使用方法[詳細]
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2015-04-03 00:00
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牛腦炎(encephalitis)酶聯免疫分析試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T3pg/ml-85pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關液體樣本中腦炎(encephalitis)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛腦炎(encephalitis)水平。用純化的牛腦炎(encephalitis)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腦炎(encephalitis),再與HRP標記的腦炎(encephalitis)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腦炎(encephalitis)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中牛腦炎(encephalitis)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(160pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。80pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液40pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液20pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液10pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液5pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-10-03 10:00
產品樣冊
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大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒
- 大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
選購指南
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小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒
- 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-22 21:25
其它
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人抗胰蛋白酶(AT)檢測試劑盒
- 人抗胰蛋白酶(AT)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-22 17:59
期刊論文
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牛ELISA試劑盒
- 【兔子巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒技術與自動化過程】在一般的概念里,牛ELISA試劑盒技術的可操作性強,不需復雜設備,甚至完全手工加樣、洗板和肉眼判讀結果,便可完成兔子巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒技術的操作。隨著人們對質量控制意識的加強,盡可能做到Zdi限度的減少系統誤差,以及減少勞動強度等觀念的不斷改進,解決ELISA技術中加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的系統誤差問題及GX率運作問題導致了自動化概念的形成。ELISA技術的加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的科學地、有機地、系統地結合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,便成為自動化ELISA技術的理論基礎。在自動化ELISA技術中,可以將整個體系分成加樣系統、溫育系統、洗板系統及判讀系統、機械臂系統、液路動力系統及軟件控制系統等幾種結構,這些系統既獨立又緊密聯系。加樣系統包括加樣針、條碼閱讀器、樣品盤、試劑架及加樣臺等構件。加樣針有兩手中,一為有TEFLON涂層的金屬針,另一為可更換的一次性加樣頭(Tip)0有些儀器的加樣針只配金屬針,無一次性加樣頭,有些是兩種針都配備。加樣針的功能主要是加樣品及試劑,它是靠液路動力系統提供動力,通過注射器樣的分配器進行極ng確加樣的。加樣針的數量在各型號儀器上是不同的,有一根的、兩根的或多根的O條碼閱讀器是幫助識別標本的重要工作,目前的儀器均配有此裝置。樣品盤除了放置標本外,還能放置稀釋標本用的稀釋管,供不同檢測目的使用。試劑架是供放置酶標記試劑、顯色液、終止液等試劑用的,有些型號的儀器這一部分是獨立的,有些是并在樣品盤上O加樣臺是酶標板放置的平臺,有些儀器在臺上設置溫育裝置,讓溫育在臺上進行O整個加樣系統由控制軟件進行協調操作。溫育系統主要由加溫器及易導熱的金屬材料板架構成O有些是盒式的,有些是臺式的O一般控制的溫度可在室溫-50°C之間。溫育時間及溫度設置是由控制軟件需確調控的。洗板系統是整個體系的重要組成部分,主要由支持板架、洗液注入針及液體迸出言路等組成。;洗液注入針一般是8頭的。每項洗板的洗板殘留量一般控制在5L以內。**設備可控制在2L內。洗板次數可通過軟件控制實現并可更改次數。讀板系統由光源、激光片、光導纖維、鏡片和光電倍增管組成,是酶促反應Z突結果客觀判讀的設備。各型號儀器的比色探頭配置不一樣,有單頭的3也有8頭的??刂栖浖ㄟ^機械臂和輸送軌道將酶標板送入讀板器進行自動比色,再將光信號轉變成數據信號又回送到軟件系統進行分析,Z終得出結果。酶標板的移動靠機械臂或軌道運輸系統來完成。牛ELISA試劑盒機械臂的另一重要功能是移動抽樣針O機械系統的運動受控子控制軟件,其運動非常地極ng確和到位。[詳細]
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2018-09-27 10:00
產品樣冊
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人類胰蛋白酶(Tryptase)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網址:http://www.westang.com人類胰蛋白酶(Tryptase)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Tryptase單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的Tryptase與單抗結合,加入生物素化的抗人Tryptase,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,Tryptase濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中Tryptase濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入2ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應Tryptase含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Tryptase檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Tryptase。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
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胰蛋白酶說明
- 胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種,EC3.4.21.4。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是作為酶的前體胰蛋白酶原而被合成的。作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性Z強的蛋白酶,在決定蛋白質的氨基酸排列中,它成為不可缺少的工具。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個,分子量為23300,活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。除存在于脊椎動物外,還存在于蠶、海盤車、姑、放線菌等范圍廣泛的生物體中。另外與高等動物的血液凝固和炎癥等有關的凝血酶、纖溶酶、舒血管素等蛋白酶在化學結構和特異性等方面與胰蛋白酶具有密切的關系,可以認為這些酶是從共同的祖先酶在進化過程中分化而來的。胰糜蛋白酶與彈性蛋白酶在結構和催化機制方面也具有密切關系,但其特異性則完全不同。胰蛋白酶系自牛、羊或豬胰中提取的一種蛋白水解酶。ZG藥品標準規(guī)定按干燥品計算,每1mg的效價不得少于2500單位。由牛、羊、豬胰臟提取而得的一種肽鏈內切酶,只斷裂賴氨酸或精氨酸的羧基參與形成的肽鍵。白色或米黃色結晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和。分子量24000,pI10.5,Z適pH值7.8~8.5左右。pH值2~3是穩(wěn)定的。pH值5以上易自溶失活。pH>9.0不可逆失活。Ca2+對酶活性有穩(wěn)定作用;重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶YZ劑對其活性有強烈YZ。臨床用于KY消腫,工業(yè)上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。作用與用途 本品為蛋白質水解酶,能選擇地水解蛋白質中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構成的肽鏈,能消化溶解變性蛋質,對未變性的蛋白質無作用,因此,能使膿、痰液、血凝塊等分解、變稀,易于引流排除,加速創(chuàng)面凈化,促進肉芽組織新生,此外還有KY癥作用。臨床上用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷、瘺管等所產生的局部水腫、血腫及膿腫等。噴霧吸入,用于呼吸道疾病。也可用于ZL毒蛇咬傷。還常用于動物細胞培養(yǎng)前對組織的處理。劑量與用法肌內注射,1000~2000U或5000U用生理鹽水或注射用水溶解,1次/日。治毒蛇咬傷,取本品2000U,1~3支,加0.25%~0.5%鹽酸普魯卡因液(或注射用水)4ml~20ml溶解,以牙痕為ZX,在傷口周圍作浸潤注射?;蛟谀[脹部位上方作環(huán)形封閉1~2次,如病情需要可重復使用。副作用1寒戰(zhàn)、發(fā)熱、頭痛、頭暈、胸痛及腹痛、腹瀉等。2不可用于急性炎癥及出血空腔中。3肝、腎損傷、血凝異常和有出血傾向者忌用。[詳細]
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2024-09-29 00:11
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