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2024-09-18 02:58 297閱讀次數(shù)

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更多資料

• 小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

  小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-18 02:58

  期刊論文

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• 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

  大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-10 00:00

  課件

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• 人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  操作手冊

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• 豬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)ELISA試劑盒

  豬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-06-12 00:00

  其它

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• 人熱休克蛋白60（Hsp-60）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

  人熱休克蛋白60(Hsp-60)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T3ng/L-90ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中熱休克蛋白60(Hsp-60)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人熱休克蛋白60(Hsp-60)水平。用純化的人熱休克蛋白60(Hsp-60)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入熱休克蛋白60(Hsp-60)，再與HRP標(biāo)記的熱休克蛋白60(Hsp-60)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的熱休克蛋白60(Hsp-60)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人熱休克蛋白60(Hsp-60)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（160ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-10-31 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人熱休克蛋白60（HSP60）ELISA試劑盒說明書

  人熱休克蛋白60（HSP60）ELISA試劑盒原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HSP60單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HSP60與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HSP60，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，HSP60濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HSP60濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：8ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等裂解產(chǎn)物盡早檢測，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成16000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入16000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進(jìn)口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以稀釋倍數(shù)50。（注意：不同的標(biāo)本HSP60的水平可能有較大差異，請根據(jù)實(shí)際情況靈活掌握稀釋度）5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋（410ul的標(biāo)本稀釋液＋50ul樣本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品（已激活）100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HSP60含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HSP60檢測濃度小于65pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測重組或天然的人HSP60。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于12％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

  小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-09 00:00

  安裝說明

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• 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒

  小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-09 00:00

  專利

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• 小鼠60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA試劑盒

  小鼠60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2016-08-18 00:00

  報(bào)價(jià)單

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• 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒

  小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 23:37

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒

  小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-29 13:41

  應(yīng)用文章

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• 小鼠熱休克蛋白90（HSP-90）檢測試劑盒說明

  小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒說明書該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD40抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD40一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型CD40一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法酶消化修復(fù)切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-10-09 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒

  豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-11 00:00

  課件

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• 豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

  豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-11 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒

  豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-11 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

  豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-11 00:00

  應(yīng)用文章

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• 大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒

  大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-10 00:00

  期刊論文

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• 人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  安裝說明

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• 人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

  人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  其它

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