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Protein A Sepharose 4FF 產(chǎn)品使用說明書

本文由 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 整理匯編

2018-09-29 10:02 2957閱讀次數(shù)

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ProteinASepharose4FF產(chǎn)品使用說明書高IgG結(jié)合特異性高流速低蛋白A脫落產(chǎn)品特點特點結(jié)合特異性強,基團脫落少顆粒大小50-160μm基質(zhì)4%的交聯(lián)瓊脂糖凝膠推薦流速50-300cm/h配基重組proteinA使用溫度常溫配基密度6mg重組蛋白A/mlpH范圍3-10動態(tài)吸附載量60mg人IgG/ml保存溫度+4~8℃蛋白A殘留小于3ng蛋白A/mgIgG保存液體20%乙醇ProteinASepharose4FF,上海起福生物專業(yè)代理,聯(lián)系電話:4006551678產(chǎn)品介紹ProteinAsepharose介質(zhì)是經(jīng)過我們公司長期開發(fā),在公司生產(chǎn)的nativeproteinA的基礎(chǔ)上精致而成。通過ProteinASepharose4FF,可分離和純化多種哺乳動物不同亞型的抗體或包含抗體Fc片段的基因工程重組蛋白。本產(chǎn)品相對同類產(chǎn)品具有如下優(yōu)勢:1、偶聯(lián)條件溫和,更好的保持了proteinA的構(gòu)象,所以抗體載量高,同體積的介質(zhì),相同規(guī)模的純化設(shè)備,相同體積介質(zhì),抗體的產(chǎn)量明顯高于用同類產(chǎn)品,大大的降低了抗體藥物生產(chǎn)成本。2、非常穩(wěn)定,不易脫落,用其生產(chǎn)的抗體中proteinA的殘留比同類產(chǎn)品的更少。3、公司的ProteinA以及ProteinAsepharose的生產(chǎn)都是在清潔車間生產(chǎn),符合制藥企業(yè)生產(chǎn)需求。4、公司生產(chǎn)的ProteinAsepharose使用壽命長,常規(guī)條件下能夠重復(fù)使用100次以上。使用說明(1)緩沖液的準(zhǔn)備:平衡緩沖液:純化不同動物和不同亞型抗體時所用平衡緩沖液是不同的,部分參照如下:抗體種類平衡緩沖液成分人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b10mM磷酸鹽緩沖液,150mMNaCl,pH7.21人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG350mMTris-Cl,3MNaCl,pH7.8-8.5(2)樣品的準(zhǔn)備樣品上柱前先用平衡緩沖液稀釋5至10倍,從而確保樣品液的成分和pH與平衡緩沖液相近。如果上樣體積過大,可以采取調(diào)節(jié)上樣液pH和鹽濃度的方式,使樣品的pH和電導(dǎo)與平衡液接近,使樣品中的緩沖體系與平衡緩沖液相同。細胞培養(yǎng)液中大量的血清蛋白會對親和層析造成一定的干擾,去血清處理或稀釋樣品將提高純化抗體收率。樣品在上柱前也需0.45μm微孔濾膜過濾。(3)操作步驟a)填料裝柱后,用純水流洗至少3個柱管體積,以沖掉乙醇,再用平衡緩沖液流洗至少5個柱管體積來平衡柱子。b)將樣品上柱,上樣流速控制在60cm/h。c)平衡緩沖液再洗5-10個柱床體積,把UV洗至基線。d)洗脫緩沖液洗脫,收集洗脫峰,立即用中和緩沖液中和到中性。e)再生緩沖液流洗3-5個柱床體積。先后用純水、20%乙醇分別流洗3-5個柱床體積。柱子置于+4-8℃保存。操作中如果沒有在線的蛋白監(jiān)測系統(tǒng),洗脫峰時可以分階段收集,Z后根據(jù)測定結(jié)果合并活性部分。上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室

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